幽门螺杆菌阿莫西林稳定耐药克隆的筛选及其基因突变的检测

目的探讨阿莫西林(AMX)不稳定耐药的幽门螺杆菌(Hp)演化成AMX稳定高水平耐药的表型及其突变基因的检测。方法以冻存后的Hp菌株H390作为出发菌株,在不断增加AMX浓度的培养基上连续传代,筛选对AMX耐药的克隆,检测耐药克隆的最小抑菌浓度(MIC),置于-80℃冻存3个月后再复苏,根据冻存后MIC下降情况判断其耐药性是否稳定。对获得的AMX最高MIC值的克隆H390r和出发菌株H390进行基因组测序分析和外排泵抑制试验,检测并鉴定与H390r获得的AMX高水平耐药性相关的基因突变。结果通过AMX筛选获得4个AMX高水平耐药克隆,MIC分别为12、32、64和≥256 mg/L,经-80℃冻存后,MIC均未发生改变。相比于亲本菌株H390,AMX稳定耐药克隆H390r存在多个基因的突变,包括与AMX耐药性相关的编码RND外排系统的hefC、编码孔蛋白的hopB与hopC和编码青霉素结合蛋白的ftsI。H390r在有外排泵抑制剂存在时对AMX的MIC大幅降低。结论AMX能够在不稳定耐药的Hp中筛选出稳定耐药的克隆;H390r存在与AMX耐药相关的hefC、hopB、hopC和ftsI基因突变。这些突变可能是H390r获得AMX稳定高水平耐药的主要原因。

黔东南地区血液流变学参考范围调查及在相关疾病中的运用

目的:建立黔东南地区血流变正常参考范围,探讨不同疾病血粘度的变化。方法:采用全自动血流变仪对本地区健康体检人群和不同疾病的患者进行全血粘度、血浆粘度检查,同时观察红细胞相关指数的变化。结果:黔东南地区健康体检人群的全血粘度(高切、低切)高于厂家提供的参考范围,血浆粘度和红细胞压积低于参考范围,男性高于女性(P<0.05);糖尿病、高血压、冠心病、脑梗塞患者的全血黏度高于与健康人群(P<0.05)。结论:黔东南地区血液流变学参考范围与厂家提供的不完全一致,各地应该建立符合本地区的正常参考范围。

医院感染852份标本分离鉴定主要病原菌及耐药性分析

由于介入性诊断治疗技术的广泛应用。放疗和化疗手段的开展．抗菌药物、激素的使用，特别是抗菌药物的不合理使用以及消毒灭菌技术使用过程中存在的问题等，使得医院感染不断出现．要及时地采取预防、治疗、隔离等措施，就必须有及时准确的病原学诊断。因此，加强细菌的分离鉴定和耐药性监测显得十分必要。笔者统计了2008年1月～10月分离鉴定的主要病原菌并进行耐药性分析．旨在为临床合理使用抗生素提供参考依据。

医院感染168例不动杆菌临床分布及耐药性分析

目的了解我院感染不动杆菌的临床分布和对常用抗菌药物的耐药情况。方法收集本院2009年1月至2010年12月住院病人各种感染标本进行不动杆菌的分离鉴定和药敏试验。细菌鉴定用VITEK2-Compact全自动微生物分析仪及其配套的GN13微生物鉴定板卡,药敏实验用配套的GN-AST药敏卡。结果通过对168株不动杆菌耐药性检测,结果显示抗生素亚胺培南和阿米卡星对不动杆菌的敏感率高(分别为96.77%,87.10%)。耐药率高的为头孢唑啉、头孢他啶、头孢替坦、头孢曲松、氨曲南、氨苄西林和呋喃妥因(96.77%～85.88%)。结论不动杆菌呈多重耐药性,临床应加强耐药性监测,控制耐药菌株的流行。

黔东南地区健康成人HbA2和HbF参考范围调查

目的建立黔东南地区健康成人HbA2和HbF参考范围。方法采用Capillarys2毛细管电泳仪检测6570例健康成人Hb,以±1.96S建立HbA2参考范围,以第95百分位点的值建立HbF参考范围上限。结果 HbA2参考范围分别是男性:2.4%~3.2%、女性2.3%~3.1%,男女组间比较差异有统计学意义(P<0.01);HbF参考范围分别是男性:<1.1%,女性:<1.3%,男女组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。101例验证标本符合率为92.07%(93/101)。结论本研究所建立的参考范围适用于黔东南地区大部分健康成人,对临床诊断地贫有一定的参考价值。

医院铜绿假单胞菌分布及耐药性分析

目的分析医院铜绿假单胞菌分布特点及对各类抗菌药物耐药性,为后续临床合理应用抗菌药物提供用药依据。方法采用WHONET 5.6软件统计分析2017年1月-2019年9月黔东南州人民医院住院患者分离的非重复铜绿假单胞菌654株,采用全自动微生物鉴定仪对其鉴定及药敏试验。结果铜绿假单胞菌株数654株,主要标本类型包括呼吸道、尿液、分泌物、血液及腹腔积液,其中呼吸道标本构成比最高;科室分布以呼吸内科、ICU为主;铜绿假单胞菌对阿米卡星耐药率偏低,其中妥布霉素、庆大霉素、美罗培南、环丙沙星、左旋氧氟沙星及复方新诺明呈现上升趋势。结论医院感染铜绿假单胞菌标本以呼吸道为主,呼吸内科感染人群逐年上升,ICU下降,要求临床合理应用抗菌药物,及时监控及管理。

42例临床血液常规检验临床分析

目的:对影响血常规检测因素进行分析研究。方法:选择进行血常规检测,并发现其血液采集检测标本不合格的42例患者的临床资料进行探讨和研究,通过统计学方法对其进行了分析。结果:在42例进行血常规检测的患者中,标本不合格的主要因素是由于标本量采集不足或过多、出现溶血状况、血液采集时间不当、血液标本内有一定程度的凝块以及其他一些因素造成的。其中由于血液标本量采集不足或过多而出现标本不合格情况的患者占总体患者的1/4。结论:为了更加规范血常规检验采集规范,需要相关医护人员具有过硬的专业技能,严谨的工作态度,规范的工作措施,才能保证血液采集标本以及检验结果的准确和可靠。

联合检测CEA、NSE、CYFRA21-1、CA72-4在老年肺部恶性肿瘤中的临床价值

目的联合检测胚胎抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白片段(CYFRA)21-1、糖类抗原(CA)72-4在老年肺部恶性肿瘤中的临床价值。方法选取158例老年肺癌患者为肺癌组,92例老年良性肺病患者为良性组,50例体检健康老年人为对照组,采用电化学发光法检测血清CEA、NSE、CYFRA21-1及CA72-4水平。结果3组血清CEA、NSE、CYFRA21-1及CA72-4水平差异有统计学意义(P<0.001);其中肺癌组均显著高于良性组和对照组,良性组CEA、CYFRA21-1及CA72-4水平均显著高于对照组(P<0.05);不同肿瘤类型患者血清CEA、NSE、CYFRA21-1及CA72-4水平差异有统计学意义(P<0.001);其中CEA水平以腺癌患者最高,NSE水平以小细胞癌患者最高,CYFRA21-1、CA72-4水平以鳞癌患者最高(P<0.05);血清CEA、NSE、CYFRA21-1及CA72-4联合检测灵敏度为84.18%,特异度为90.14%,准确度为91.67%,其灵敏度和准确度较单一检测明显升高(P<0.05),特异度无明显变化(P>0.05)。结论血清CEA、NSE、CYFRA21-1及CA72-4联合检测可有效提高早年肺癌患者的诊断灵敏度和准确度,其水平还与肺癌的组织学类型有关。

神经外科患者医院感染病原菌分布及耐药性分析

目的了解神经外科患者医院感染病原菌分布及其耐药性,为临床医师预防与治疗医院感染、合理使用抗菌药物提供科学依据。方法将2011年7月-2013年8月神经外科住院患者送检的各类临床标本严格按照《全国临床检验操作规程》进行常规分离培养,病原菌鉴定及药敏采用法国生物梅里埃公司VITEK-2微生物分析仪及配套试剂,数据统计用Whoent5.4软件进行分析。结果 436例神经外科送检标本来源依次为呼吸道245例、泌尿道79例、颅内引流液34例、褥疮分泌物12例,其他66例,分别占56.19%、18.12%、7.80%、2.75%、15.14%;共分离出病原菌436株,其中革兰阴性菌303株占69.50%,革兰阳性菌70株占16.05%,真菌63株占14.45%;未发现耐万古霉素、利奈唑胺、替加环素葡萄球菌、肠球菌和耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌;铜绿假单胞菌和鲍氏不动杆菌检出泛耐药株,真菌对常用抗真菌药物敏感性较高。结论神经外科患者医院感染病原菌以革兰阴性菌为主,对抗菌药物的耐药性差异较大,且出现多药耐药株,临床应加强病原菌分离鉴定及药敏试验,合理使用抗菌药物及规范的医疗行为,减少耐药菌株的产生,对预防和降低神经外科患者医院感染的发生非常重要。

电化学发光法与放射免疫法测定血清甲胎蛋白的比较

目的了解电化学发光法测定血清中甲胎蛋白(AFP)的临床应用价值及优越性。方法参照相关评价方案对电化学发光法和放射免疫法进行线性试验、精密度、和回收率的比较,并采用25份含有高、中、低值的患者血清标本用两种方法平行测定,进行相关性分析。结果两种方法的相关性良好(r=0.987 8,P>0.05),回收率均在95%以上,电化学发光法明显高于放射免疫法;线性范围电化学发光较放射免疫法宽;试验重复性电化学发光法优于放射免疫法。结论电化学发光法更能满足临床需要,可以取代放射免疫法用于临床检测血清AFP。

新鲜全血在不同血细胞分析仪上的比对和校准探讨

目的探讨新鲜全血在不同时间及保存条件下在血细胞分析仪比对和校准中的可行性分析。方法每天留取白细胞增高、正常和减低的标本6例,其中3例放入2～8℃的冰箱,另外3例放置于室温,第2天在不同的血细胞分析仪上检测比对其结果,以监测不同仪器之间结果的符合性。结果通过在不同时间、不同温度保存的条件下进行检测和比对,用当天正常的新鲜全血最好,可以解决校准和结果的统一性,减少因设备的不同产生的误差。结论应用新鲜全血可以作为对同一实验室不同血细胞分析仪的室内质量控制检测和调整,其方法简便且效果理想。

ENA多肽抗体检测及临床意义

目的探讨抗核抗体中的盐水可提取核抗原(ENA)抗体对风湿免疫性疾病的诊断意义。方法取380例患者血清,采用免疫印迹(IB)法检测ENA抗体。结果SLE患者抗Sm及抗U1RNP抗体分别为32.4%、26%。抗rRNP主要见于SLE为14.6%。9例MCTD抗U1RNP均为阳性。抗SS-A和抗SS-B抗体在15例SS患者中分别为14/15和13/15例。DM患者抗Sc l-70为3/12例。PSS患者抗Jo-1阳性1/8例。其他疾病仅检测到抗SS-A 18.1%、抗SS-B 4.5%、抗rRNP3.3%。与其他疾病组及对照组比较差异有显著性(P<0.01)。结论ENA抗体在风湿免疫性疾病中有较高的检出率,对风湿免疫性疾病的诊断具有重要意义。抗Sm抗体为SLE标志性抗体。仅凭一条条带即报告某一抗体阳性应慎重。

速率法测定a-L-岩藻糖苷酶(AFU)活性试剂的评价

目的本文对速率法测定a-L-岩藻糖苷酶活性的试剂进行性能评价。方法利用日立7080全自动生化分析仪对速率法测定AFU试剂进行方法学的评价试验。结果该法精密度好,批内CV<2.2%,批间CV<2.4%。三酰甘油≤5.0mmol/L、Hb≤2.5g/L、胆红素≤500μmol/L、维生素≤10g/L时经配对差异比较,均无显著干扰(P<0.05);抗凝剂中EDTA.K2、草酸钠对检测无明显干扰,而肝素使AFU测定假性增高。与进口同类产品比较,y=0.9813x-0.3746,r=0.9991,两者相关性良好。结论该试剂为液体试剂,采用速率法测定,使用方便、反应快速、结果准确,抗干扰能力强,适用于全自动生化分析。

荚膜组织胞浆菌病误诊一例报告

1．1一般资料 患者男，50岁，系贵州省雷山县丹江镇人，因受凉后出现于“持续高热，并头痛、腹痛、腹泻”于2005年1月底按“疑似伤寒”就诊当地县医院，住院1周治疗效果不佳，于2005年2月7日转入我院传染科，住院期间病人的基本情况为：高热体温在38-39．5℃之间，以下午及夜间为主，伴头痛以左侧颜面部为明显，腹痛以左上腹为主，无畏寒、咳嗽、咳痰、胸闷、胸痛及恶心和呕吐等不适。PE：P120次／min；R25次／min；BP90／60mmHg，营养中等，急性病容，神清白动体位，全身皮肤、粘膜无明显黄疸、皮疹及出血点，浅表淋巴结未扪及，左上腹肋下扪及一约15cm×16cm大小包块，质硬，

应用热导传感器测定血清(浆)总二氧化碳

正确评价实验学方法．对提高临床检验质量有着十分重要的意义。AFT—TCO2分析仪是一台用于门急诊测定血清总二氧化碳的新型分析仪．它是采用热导传感器来完成的。笔者除用酶法测定血清中总二氧化碳外．还用热导传感器测定。为更好的了解该方法的实验性能．本人根据实验学评价办法．对该方法进行了评价．现报告如下。

高密度脂蛋白胆固醇的直接测定法研究

目的用甾类糖苷化合物、胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶制备的高亲和性酶化合物结合特殊表面活性剂,通过对测定条件的优化,建立了高密度脂蛋白胆固醇的直接测定方法。方法本法与磷钨酸镁沉淀法和葡聚糖-氯化镁沉淀法[1-2]相关性良好。结果纯低密度脂蛋白胆固醇浓度在10.0mmol/L以内对本法无显著干扰,磷钨酸镁沉浸法和葡聚糖-氯化镁沉淀法结果分别为相关系数(r)=0.9901、Y=1.0160X-0.0818和r=0.9960,Y=1.0080X-0.0630,批内变异系数(CV)<1.6%,日间CV<2.1%,线性范围达5.4mmol/L,回收率(100±5)%。三酰甘油浓度达30mmol/L、抗坏血酸小于3.5mmol/L、血红蛋白小于4.8g/L和胆红素小于540μmol/L时无显著干扰。应当用纯的不同浓度的低密度脂蛋白加入准确定值的新鲜血清中观察脂蛋白在血清中的反应。结论本文建立的高密度脂蛋白胆固醇直接测定法,其性能指标符合临床使用要求。标本无需预处理,精密度好,准确性高,适用于各种自动生化分析仪。

流式细胞术在血液系统疾病诊断中的应用

目的探讨流式细胞术在血液系统疾病诊断中的应用价值。方法选取2017年12月至2018年9月黔东南州人民医院确诊的125例血液系统疾病患者。所有患者均行流式细胞术,并采用常规FAB法进行鉴别诊断。比较流式细胞术和常规FAB法对各类血液系统疾病的鉴别诊断准确率,同时分析两者对不同类型白血病的鉴别诊断准确率。结果流式细胞术对血液系统鉴别诊断准确率(96.8%)显著高于常规FAB法(78.4%),差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术对各类型白血病鉴别诊断准确率(94.67%)显著高于常规FAB法(81.33%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论流式细胞术对于多种血液系统疾病诊断准确性较高,且对白血病鉴别诊断价值较高,临床应用高效可靠。

贵州省97家临检室阴道分泌物常规检验方法及质控情况调研

目的调查贵州省医疗机构临床检验实验室阴道分泌物常规检验方法及质控（QC）情况。方法现况调查。于2009年随机抽取贵州省97家实验室，调查阴道分泌物常规检验方法和室内质控（IQC）开展情况，同时，向参与调研的实验室进行IQC措施重要性的宣教。于2011年再次对相同实验室的相同内容调研，并对两次调查检验方法和IQC变化情况进行x^2检验。结果2009年与2011年相比，仅采用生理盐水悬浮法进行阴道分泌物检验的实验室分别有16家与17家（）（2=0．037，P〉0．05）；同时用生理盐水和10％KOH悬浮法的实验室分别有16家与2家（X^2=12．003，P〈0．01）；采用染色法的实验室分别有64家与79家（X^2=5．488，P〈0．05）；采用悬浮法结合染色法检测的实验室分别有60家与73家（x^2=4．041，P〈0．05），其中以生理盐水悬浮法结合瑞氏和革兰染色检测的实验室分别有3家与28家（X^2=23．996，P〈0．01）；采取IQC措施的实验室分别有2家与88家（X^2=153．293，P〈0．01）。结论本次调研实验室中检测阴道分泌物以悬浮法为主。通过宣教可提高检验质量。

医院宫颈病变患者感染HPV的基因分型特点

目的 研究贵州省黔东南州女性感染HPV亚型分布,以及宫颈病变样本中HPV16 E2、E6、E7和L1突变情况。方法 采集11 268例就诊患者宫颈标本,提取核酸进行型别检测。选取HPV16阳性的宫颈病变样本,PCR扩增并测序。结果 ≤30岁,30~40岁,40~50岁,50~60岁和>60岁年龄组患者分别为2 538、3 795、3 622、1 123和190例。2 243例患者样本检出HPV病毒,总检出率19.91%。分离出2 781株HPV病毒,其中HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV43、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58和HPV66亚型分别为:326、112、49、73、59、150、34、29、155、450、139、106、235和69株。5份HPV16阳性样本中检出22个DNA突变位点。HPV16 E2检出10个位点突变,其中8个错义突变和2个同义突变。错义突变分别为:G2827A(Asp→Asn)、C3158A(Thr→Lys)、T3383C(Ile→Thr)、C3409T(Pro→Ser)、G3448A(Glu→Lys)和C3786A(Asp→Gln)。HPV E6检出5个错义突变,分别为:G131A(Gly→Arg)、T178A(Asp→Glu)、T178G(Asp→Glu)、C278G(Pro→Ala)和G350T(Val→Leu)。HPV E7发生4个位点突变,其中1个错义突变和3个同义突变。错义突变为A647G(Asn→Ser),同义突变G666A(Glu→Glu)、T843C(Cys→Cys)和T846C(Ser→Ser)。L1序列检出3错义突变分别为:A503G(Asp→Gly),A620C(Asn→Thr)和G736A(Val→Ile)。结论 本研究中女性感染HPV亚型以HPV52检出率最高,其次是HPV16和HPV58;60岁以上患者各亚型检出率与其他组差异较大;HPV16 E2、E6、E7和L2蛋白均有不同程度突变,可能与宫颈病变的有关。