激发医学生生物化学学习动力的探讨

生物化学是研究生物体内化学分子与化学反应的基础生命科学,是医学院校学生的一门必修课。其理论和技术已渗透到基础医学和临床医学的各个领域,常用于疾病的诊断、治疗和预防,反之,许多疾病的机制又需要从分子水平上加以探讨。因此,生物化学课程是为其他医学基础课程和临床医学课程提供必要的理论基础,是一门重要的医学基础课程。多年来,作者对如何激发医学生生物化学的学习动力、提高教学质量作了一些探索,现归纳如下。

ApoE基因多态性对毛南族人群血清apoA1、apoB水平的影响

目的探讨载脂蛋白(apo)E基因多态性对毛南族人群血清apoA1、apoB水平的影响。方法收集221名贵州省黔南州毛南族人群血样品,采用免疫透射比浊法测定血清apoA1、apoB浓度;应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)检测apoE2、E3、E4基因多态性。结果与apoE2/2+E2/3+E2/4基因型亚组(n=37)比较,apoE3/4+E4/4基因型亚组(n=41)和apoE3/3基因型亚组(n=143)血清apoB水平升高(P<0.05),apoA1/B比值降低(P<0.05);apoE3/4+E4/4基因型亚组apoB水平高于apoE3/3亚组(P<0.05)。未发现不同apoE基因型亚组间血清apoA1水平差异存在统计学意义(P>0.05)。结论毛南族人群apoE基因多态性明显影响血清apoB水平和apoA1/B比值,但未见该基因多态性与血清apoA1水平相关联。

贵州毛南族人群CSF1PO,TPOX和TH01STR基因座基因频率调查

目的：调查贵州毛南族人群CSF1PO,TPOX和TH01STR基因座等位基因频率.方法：chelex-100提取法提取104名毛南族无关个体DNA,PCR复合扩增,变性PAGE分型,直接计数基因型,用modified-powerstats软件包计算各多态性指标,采用SPSS13.0统计软件包对贵州毛南族人群与广西两个毛南族群体相同基因座等位基因频率进行比较.结果：CSF1PO,TPOX和TH01STR基因座共检出等位基因数17个,等位基因频率范围在0.0288~0.4087之间;共检出基因型40种,各基因座基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡定律（P〉0.05）.3个基因座的杂合率（H）、非父排除率（PPE）、个体识别率（DP）、多态信息量（PIC）分别大于0.69,0.5,0.8,0.6,累积个体识别率（TDP）为0.99743.贵州毛南族人群和广西两个毛南族群体等位基因频率分布有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）.结论：CSF1PO,TPOX和TH01 3个STR基因座在贵州毛南族人群中有较高的遗传多态性,在群体遗传学和法医鉴定中有较高的应用价值.起源于古代同一族系的同一民族或不同民族,遗传结构有丰富的遗传多样性,其等位基因频率分布与地域呈平行关系.

花脸香蘑液体发酵次生代谢产物中挥发性物质的化学成分研究

采用GC-MS联用技术,结合质谱信息经计算机检索NIST147标准质谱图库与人工解析,分析了花脸香蘑Lepista sordida(Fr)Sing菌株发酵液CH2Cl2提取物的挥发性成分,发酵液中气相色谱共分离了19个峰,经解析确定了16个成分,在培养基(对照组)中CH2Cl2提取物气相色谱共分离了16个峰,经解析确定了14个成分,主要次生代谢产物为1-Decanol,1,2-Benzendicarboxylic acid,2,6-Dichlorophenylisothiocyanate,Benzenemethanol,1-H-3α,7-Methanazulen-5ol,2-Chloro-4,5-dimethoxybenzaldehyde,5-Chloro-2-methoxybenzoic acid,Geranic acid,Pyrrolo[1,2-α]pyrazine-1,4-dione,Cyclo-(1-leucyl-1-phenylalanyl)。

藏族人群ABO血型分布及其遗传关系

目的:了解中国和印度28个藏族群体ABO血型分布特征。方法:采用Phylip3.68和MEGA4.1遗传分析软件包对基因频率数据进行处理,输出Nei’s遗传距离,分析他们的遗传关系。结果:甘肃、青海、四川、云南、西藏和印度藏族群体ABO血型表型分布特征为O>A>B>AB,民族指数和遗传距离分别为0.63～0.98和0～0.0072。结论:各地藏族的先民可能存在一定的历史渊源,由于其历史上的分化事件不同,而致不同地区藏族群体ABO血型的基因频率分布特征存在多样性。

都匀亚洲牛带绦虫及从江牛带绦虫实验感染家畜血清酶学动态研究

目的观察都匀亚洲牛带绦虫及从江牛带绦虫实验感染猪牛的血清酶学活性的动态变化及其在肝脏损伤中的作用。方法采用都匀亚洲牛带绦虫及从江牛带绦虫孕节灌喂健康乳猪,乳牛,隔离饲养。分别于感染前、感染后25d、50d、75d抽血,检测γ谷氨酰转移酶(γGT)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总蛋白(TP)、前白蛋白(PA)、碱性磷酸酶(ALP)、N乙酰βD氨基葡萄糖苷酶(NAG)、乳酸脱氢酶(LDH)、亮氨酸氨基肽酶(LAP)和α1抗胰蛋白酶(α1AT)含量变化并进行分析。结果都匀亚洲牛带绦虫及从江牛带绦虫感染猪牛后,γGT、ALT、AST、NAG、LDH、LAP和α1AT含量升高,感染75d与感染前相比含量呈倍数增加,而PA含量呈下降趋势。结论:都匀亚洲牛带绦虫及从江牛带绦虫感染家畜后的血清酶的活性变化,可反映宿主肝脏损伤程度。牛带绦虫囊尾蚴寄生宿主不同,其指标存在不同差异。

IFN-γ对亚洲牛带绦虫囊尾蚴病小鼠肝肉芽肿的影响

采用免疫组织化学技术链酶亲和素-生物素化过氧化物酶复合物技术观察感染小鼠不同时期肝内γ干扰素(IFN-γ)水平,以及细胞外基质纤维连接蛋白(FN)、层连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)水平及分布,并以FN、LN及PCⅢ作为判断IFN-γ对肝纤维化抑制作用的动态变化指标。结果表明,都匀亚洲牛带绦虫感染小鼠肝内IFN-γ含量与肝纤维化程度呈反比(P<0.01),注射IFN-γ后囊尾蚴肉芽肿面积明显减少,囊尾蚴肉芽肿减少(P值均<0.01)。

贵州荔波水族人群CSF1PO,TPOX和TH01STR基因座遗传多态性

目的:调查贵州荔波水族人群CSF1PO,TPOX和TH01STR基因座的遗传多态性.方法:采集贵州省荔波县水尧水族乡97名水族无关个体EDTA抗凝血标本,Chelex-100法提取DNA,PCR进行扩增,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染方法进行分型,获取CSF1PO,TPOX和TH01STR基因座的基因型,基因频率及杂合度(H),多态信息量(PIC),个体识别率(DP)和非父排除率(PPE)等法医学相关数据,并利用该人群这3个STR基因座的基因频率与文献报道的广西侗族等南方其他6个民族群体相同基因座的基因频率进行聚类分析.结果:贵州荔波水族人群CSF1PO,TPOX和TH01STR基因座分别检出等位基因6,5和5个,基因型分别为15,12和13个,各基因座基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05).三个基因座的H分别为0.7287,0.5423,0.6904;PIC分别为0.6652,0.4880和0.6806;DP为0.8782,0.7361和0.8563;PPE为0.6148,0.3646和0.5737.结论:CSF1PO和TH01基因座在贵州荔波水族人群中有较高的遗传多态性,该人群与广西侗族等6民族群体间的遗传关系和民族学研究的结果基本吻合.

贵州布依族人群载脂蛋白E基因多态性与血脂、载脂蛋白的关系

目的研究贵州布依族人群载脂蛋白E基因多态性分布特征,分析apoE基因多态性对脂质代谢的影响。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)对贵州省黔南州201例布依族和217例汉族人群血样品进行apoE基因分型,并研究等位基因频率特征与血脂的关系。结果 201例布依族和217例汉族apoε2、ε3、ε4等位基因频率分别为:6.71%、82.34%、10.95%;9.22%、84.10%、6.68%,二者差异无统计学意义(P>0.05)。与其他种族、民族人群比较,布依族ε2、ε3、ε4等位基因频率处于中等水平。布、汉两民族apoE不同基因型亚组血脂、载脂蛋白、脂蛋白结果显示:与apoE2携带者(apoE2/2+E2/3+E2/4)比较,apoE3/3纯合子和apoE4携带者(apoE3/4+E4/4)血清TC、LDL-c、apoB水平均显著升高(P<0.01)。结论 apoE基因型和等位基因频率存在民族、种族差异。布依族apoE基因多态性与血脂、载脂蛋白、脂蛋白水平有关。

鸡胚地龙膏对兔急性软组织损伤血清及组织液中疼痛指标的影响

目的观察鸡胚地龙膏对兔急性软组织损伤血清及组织液中疼痛指标的影响。方法以105只新西兰白兔为研究对象,随机选出21只作为正常对照组,剩余84只新西兰白兔造模成功后随机分为4组,分别为模型对照组、阳性药物组、鸡胚地龙膏低剂量组和鸡胚地龙膏高剂量组,每组21只动物。模型组不作任何处理,自然恢复愈合,阳性药物组采用奇正消痛膏治疗(0.75g/kg),鸡胚地龙膏低剂量组和鸡胚地龙膏高剂量组采用鸡胚地龙膏治疗,药物剂量分别为0.15g/kg和0.75g/kg。阳性药物组、鸡胚地龙膏低剂量组和鸡胚地龙膏高剂量组药膏涂布面积以超过受损区面积1/2以上为度,外用特制胶布及卫生胶布固定、包扎,每天换药1次,共给药8天。各组分别于损伤前,损伤后即刻,损伤后第1、2、3、6、8天抽取5ml静脉血后,处死动物,留取损伤部位组织,制作组织液。采用酶联免疫法分别测定不同时间血液和组织液中前列腺素E2(PGE2)、5-羟色胺(5-HT)和组织胺(HIS)的含量水平,并进行统计学分析。结果鸡胚地龙膏高剂量组从损伤后第2天开始血清及组织液中PGE2、5-HT、HIS逐渐降低,其血清及组织液中PGE2、5-HT、HIS含量水平低于鸡胚地龙膏低剂量组和阳性药物组(P<0.01)。伤后3天鸡胚地龙膏高剂量组血清及组织液中PGE2、5-HT恢复到损伤前水平,较鸡胚地龙膏低剂量组和阳性药物组提前5天恢复到损伤前的正常水平。而HIS含量伤后6天恢复正常,较鸡胚地龙膏低剂量组和阳性药物组提前2天。结论鸡胚地龙膏可有效降低兔急性软组织损伤后的血清和组织液中PGE2、5-HT和HIS等疼痛因子的含量水平,减轻损伤后疼痛程度。

都匀亚洲牛带绦虫病患者生化指标的观察

目的观察都匀亚洲牛带绦虫病患者生化指标的改变。方法应用全自动生化分析仪和全自动放射测量仪对都匀亚洲牛带绦虫病患者肝功能指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、前白蛋白(PA),肾功能指标尿素氮(BUN)、肌酐(CREA),血清酶学指标r-谷氨酰转移酶(r-GT)、碱性磷酸酶(ALP)及肝纤维化指标(HA)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)进行测定和分析。结果都匀亚洲牛带绦虫病患者与对照组相比血清r-GT、ALP、HA、Ⅳ-C显著升高(P<0.05),ALB、PA显著下降(P<0.05)。结论都匀亚洲牛带绦虫病患者肝功能、血清酶学、肝纤维化指标有明显变化。

改进生化教学加强学生能力培养对教学质量的影响

目的研究改进生化教学方法加强学生学习能力培养对教学质量的影响。方法将任课班级随机设为对照班和教改班,对照班采用传统的"以授课为基础的学习"(lecture based learning,LBL)模式,教改班采取"以问题为基础的学习"(problem based learning,PBL)模式即通过课前精心编制教案、设计问题链、课堂提问、病案教学、课后总结、课后练习等方法加强学生学习能力的培养。结果通过两个班级教学过程中学习能力及期末综合考核成绩比较,教改班学习能力显著提高(P<0.01),教学效果明显优于对照班(P<0.01)。结论生化教学中通过改变教学方法,采取积极有效措施,加强学生学习能力培养,可大大提高学生的学习兴趣及教学质量。

鸡胚地龙膏活性肽抗氧化作用的研究

目的探讨鸡胚地龙膏活性肽提取物抗氧化作用。方法测定鸡胚地龙膏活性肽提取物在邻苯三酚自氧化体系中对超氧阴离子自由基、Fenton反应体系中对羟基自由基的清除作用。通过对新西兰大白兔急性软组织损伤模型测定其血液和组织抗氧化酶活性及丙二醛(MDA)含量,检测鸡胚地龙膏活性肽提取物在新西兰大白兔体内的抗氧化能力。结果体外试验研究证实,鸡胚地龙膏活性肽提取物能有效清除超氧阴离子自由基和羟基自由基的作用。体内试验中,鸡胚地龙膏高剂量治疗组血液及组织液中的SOD、CAT、GSH-PX活性水平分别与正常对照组、模型组、阳性药物组及鸡胚地龙膏低剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.01);而血液及组织液中的MDA含量水平明显低于其他4组(P<0.01)。结论鸡胚地龙膏活性肽提取物具有较强的清除活性氧及抗氧化作用,可能是鸡胚地龙膏治疗急性软组织损伤的机制之一。

贵州布依族人群三个STR基因座遗传多态性

目的调查贵州布依族人群CSF1PO、TPOX和TH013个人类短串联重复序列(STR)基因座遗传多态性。方法用chelex-100提取法对101名布依族无关个体DNA进行提取,聚合酶链反应(PCR)复合扩增,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和银染分型,数据统计采用Modified-Powerstat统计软件。结果CSF1PO、TPOX和TH01基因座分别检出8个、6个和7个等位基因,基因型为17、15和18种,各基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。CSF1PO、TPOX和TH01基因座杂合率(H)分别为0.7129、0.6238和0.7030;多态信息量(PIC)为0.6934、0.5714和0.6830;个体识别率(DP)为0.8809、0.7929和0.8523;非父排除率(PPE)为0.5485、0.4204和0.5329。结论贵州布依族CSF1PO和TH01两个基因座具有较高的遗传多态性,在群体遗传学和法医学个体识别中有较高的应用价值。

ApoE通过影响mir-30a-5p调控BDNF表达

目的研究ApoE基因型是如何影响脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)的表达,以更好的理解AD的发病机制。方法在SH-SY5Y细胞系和大鼠原代神经元中加入Apo E3和Apo E4重组蛋白,用real-time PCR、Western blot和ELISA检测BDNF的表达水平;用luciferase assay、real-time PCR和Western blot证实BDNF是mir-30a-5p的靶基因;用Taq Man技术检测mir-30a-5p的水平。结果与对照组相比,Apo E3增加了BDNF的mRNA、蛋白水平和培养基中的BDNF浓度,而ApoE4减少了BDNF的mRNA、蛋白水平和培养基中的BDNF浓度; hsa-mir-30a-5p抑制BDNF的3’UTR的luciferase活性,mRNA和蛋白水平。ApoE3降低mir-30a-5p的表达,Apo E4增加mir-30a-5p的表达,而过表达mir-30a-5p inhibitor可以逆转ApoE4对BDNF的抑制效果。结论BDNF是mir-30a-5p的靶基因,ApoE是通过影响mir-30a-5p的水平来调控BDNF的表达。

慢性锑中毒患者细胞因子水平与抗氧化能力相关分析

目的探讨慢性锑中毒患者细胞因子水平与抗氧化能力的相关性。方法对慢性锑中毒患者和对照组血清白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平进行检测及分析。结果与对照组相比,慢性锑中毒患者血清IL-2I、L-8和TNF-α水平显著增高(P<0.01),SOD、GSH-Px活性明显降低,而MDA水平增高(P<0.01)。锑中毒患者IL-2I、L-8、TNF-α含量与SOD、GSH-Px活性呈负相关(P<0.01),与MDA水平呈正相关(P<0.01)。结论慢性锑中毒患者的细胞因子水平随抗氧化能力的降低而升高。

植物蛋白激酶的研究进展

蛋白激酶是酶中的一个大家族,在诸如发育、自交不亲和、雄性不育、抗逆和抗病反应中起重要作用。为了促进蛋白激酶的研究,本文对植物蛋白激酶如:钙依赖蛋白激酶(Calcium-dependent calmodulin-independent protein kinases,CDPKs)、钙/钙调素依赖蛋白激酶(calcium/calmodulin-dependent protein kinase,Ca MK)、类受体蛋白激酶(Receptor-like kinases,RLKs)、促分裂原蛋白激酶(MAPK)、核糖体蛋白激酶(ribosomal-protein kinas)、转录调控蛋白激酶(transcription-regulation protein)的研究现状进行了综述。

中药复方活血通对糖尿病大鼠肾组织晚期糖基化终产物影响的研究

目的观察中药复方活血通对糖尿病大鼠晚期糖基化终产物(AGEs)的影响,探讨中药复方活血通防治糖尿病慢性并发症的作用机制。方法采用链脲佐菌素糖尿病大鼠模型,随机分为预防组和治疗组,给予中药复方活血通灌胃,并以氨基胍作为对照,治疗12周,观察中药复方活血通对糖尿病大鼠血糖和肾组织AGEs的影响。结果中药复方活血通预防组和治疗组血糖、中药复方活血通预防组、治疗组和氨基胍组肾组织AGEs均较模型组为低(P<0.01);氨基胍组血糖高于中药复方活血通预防组(P<0.05),与模型组比较,差异也有显著性(P<0.05)。结论中药复方活血通可能通过降低血糖,抑制终末期糖基化终产物在肾皮质中的形成,延缓糖尿病慢性并发症的进一步发展。