多重PCR技术对贵州省肺炎链球菌脑膜炎病例病原分型的研究

目的研究用多重PCR技术对肺炎链球菌脑膜炎的病原进行分型。方法获取患者脑脊液标本,离心,上清液用乳胶凝集试剂进行抗原检测,沉淀进行革兰氏染色并提取其DNA。根据全国流行肺炎链球菌主要的血清型设计和合成9对特异性引物,优化多重PCR条件并对病原体DNA进行扩增,通过电泳对肺炎链球菌血清型进行初分类,然后用普通PCR对可疑血清型进行再次确定,最后对PCR产物进行测序和序列分析。结果乳胶凝集试验出现肺炎链球菌乳胶凝集颗粒,多重PCR分别在约600bp和220bp处出现阳性条带,考虑为CPSA和6B血清型;普通PCR进一步确认为CPSA和6B。测序后分析为肺炎链球菌血清群6,血清型为6A/6B/6C/6D-f。结论多重PCR技术由于使用的标本量少,且可以提高诊断速度、经济,故可以直接用于临床标本的肺炎链球菌血清分群/型。