临床药理学PBL融入思政的探索与实践

为提高临床药理学教学水平的同时培养学生正确的价值观,在齐齐哈尔医学院2017级临床药学专业的临床药理PBL课程《心血管系统疾病用药》中融入思政教育,并以问卷的形式调查其教学效果。在教学实施中共发放38份问卷,回收问卷38份,有效回收率为100%。调查问卷结果显示,97%的学生认为思政教育可以很好地促进基础知识与临床实践相融合;97%的学生认为思政教育能提高学习积极性,激发学习兴趣;100%的学生认为思政教育能增强职业使命感和责任感;95%的学生认为思政教育可以树立专业自信,感受临床药理的学科价值。思政教育在临床药理PBL教学中的应用具有良好的效果,提高了学生的学习兴趣。

大量摄入乙醇对大鼠海马区自噬相关蛋白ATG5及LC3Ⅰ/Ⅱ的影响

目的探讨大量乙醇灌胃1~4天大鼠海马区内自噬相关蛋白LC3Ⅰ/Ⅱ及ATG5表达的动态过程。方法利用连续大量灌胃给予乙醇1~4天建立大鼠模型,分别为对照组、D1、D2、D3、D4共5组。D1、D2、D3、D4组用乙醇(25%W/V,5 g/kg)灌胃,D1组大鼠给予乙醇灌胃1天,D2组大鼠给予乙醇灌胃2天,D3组大鼠给予乙醇灌胃3天,D4组大鼠给予乙醇灌胃4天。每8小时灌胃一次。对照组给予等体积纯净水灌胃。利用血液乙醇浓度测定试剂盒检测各组大鼠血液中乙醇浓度后,采用Western Blot技术检测各组大鼠大脑海马区LC3Ⅰ/Ⅱ,ATG5蛋白的表达情况并进行统计学分析。结果 D1~D4组大鼠血液乙醇浓度均大于300 mg/d L,说明大鼠均处于严重醉酒状态。D1~D4组大鼠海马区的LC3Ⅱ蛋白的相对灰度值分别为(0.63±0.03)、(1.30±0.07)、(1.26±0.07)和(1.24±0.07),与对照组(0.46±0.02)相比,D2、D3、D4组均显著性上调(P<0.001)。D1~D4组大鼠海马区ATG5蛋白的相对灰度值分别为(1.12±0.06)、(0.54±0.08)、(0.55±0.16)和(0.75±0.04),与对照组(0.60±0.07)相比,D1组显著性上调(P<0.01)。结论大量摄入乙醇过程中,大鼠均处于严重醉酒状态,乙醇可能通过上调大鼠大脑海马区的ATG5蛋白的表达激活自噬,从而增加自噬小体LC3Ⅱ的积累,是亚慢性乙醇脑损伤大鼠海马脑区自噬活性增强的可能机制之一。

没食子酸乙酯对乳腺癌细胞生长的影响

目的检测狼毒大戟中活性成分没食子酸乙酯Ethyl gallate(EG)对乳腺癌细胞生长的影响。方法以两种乳腺癌细胞MDA-MB-231、MCF-7为研究对象,采用MTT法检测不同浓度EG作用乳腺癌细胞24 h、48 h、72 h后对细胞生长的影响;采用流式细胞术分析EG作用后乳腺癌细胞的凋亡作用;采用免疫荧光染色法观察细胞的形态学变化;采用western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果 EG对人乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞增殖具有明显抑制作用,呈浓度、时间依赖性;可明显诱导MDA-MB-231细胞凋亡,凋亡率高达(P<0.05),荧光显微镜下可见凋亡的典型形态学变化;与空白对照组相比,EG处理组可使凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax表达明显下降(P<0.05)。结论体外实验中,EG可抑制乳腺癌细胞的生长,其可能的机制是促进细胞凋亡,抑制凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax表达有关。

人参皂苷二醇型二酮内酯的还原反应及抗菌活性研究

目的研究人参皂苷二醇型二酮内酯的两个还原反应及衍生物抗菌活性筛选。方法分别将人参皂苷二醇型二酮内酯进行Na BH4反应和Raney Ni催化加氢反应,并将得到的衍生物进行了部分抗菌活性筛选。结果制备了2个衍生物,结果显示化合物3对绿脓杆菌、白念珠杆菌、大肠杆菌具有一定的抗菌活性。结论通过人参皂苷二醇型二酮内酯的两个还原反应得到2个衍生物,发现其具有一定的抗菌活性,为得到大量衍生物奠定了基础。

脱氢表雄酮对血管性痴呆小鼠学习和记忆能力的改善作用

目的:研究脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)对血管性痴呆小鼠学习和记忆能力的改善作用及可能机制。方法:将小鼠随机分为假手术组、模型组及DHEA(20、40和60 mg/kg)组。采用夹闭小鼠双侧颈总动脉15 min再放开的方法,建立全脑缺血再灌注所致的血管性痴呆小鼠模型。通过Y迷宫和新物体辨别实验测试小鼠的学习和记忆能力;采用Western blot法检测小鼠海马组织神经元核抗原(NeuN)、突触小泡蛋白(SYP)和突触后致密蛋白95(PSD-95)的含量。结果:与假手术组相比,在Y迷宫和新物体辨别实验中,模型组小鼠出现显著的学习和记忆障碍,DHEA治疗能显著增加Y迷宫实验中小鼠自发交替反应率,同时还可显著提高小鼠新物体辨别实验的优先指数和辨别系数(P <0. 05),其中DHEA中剂量组效果最为显著(P <0. 01)。Western blot实验结果显示,模型组小鼠海马组织NeuN、SYP和PSD-95的表达水平与假手术组比显著降低(P <0. 05); DHEA组小鼠海马组织NeuN、SYP和PSD-95蛋白的表达较模型组显著增多(P <0. 05)。结论:DHEA具有提高血管性痴呆小鼠学习和记忆能力的作用,其机制可能与减少神经元的丢失和改善突触的可塑性有关。

葛根素下调Atg5、LC3Ⅰ/Ⅱ蛋白对缺血再灌注脑损伤小鼠的神经保护作用

目的 观察葛根素通过下调自噬相关基因5(Atg5)、微管相关蛋白轻链Ⅰ/Ⅱ(LC3Ⅰ/Ⅱ)蛋白表达发挥抗缺血再灌注脑损伤小鼠的神经保护作用。方法 将ICR小鼠48只随机分为4组,分别为假手术组、模型组和低剂量、高剂量实验组,每组12只。实验时间共10 d,于第6天夹闭小鼠双侧颈总动脉缺血30 min后进行再灌注,建立缺血性脑损伤小鼠模型,低、高剂量实验组小鼠造模前后5天均腹腔注射葛根素(50,100 mg·kg^(-1)·d^(-1))。用平衡木实验评价小鼠的平衡能力,用自主活动实验评价小鼠的日常活动能力,用蛋白质印迹法检测各组小鼠大脑皮层自噬关键蛋白Atg5、LC3Ⅰ/Ⅱ的相对表达。结果 在术后1 d,假手术组、模型组和低、高剂量实验组小鼠穿越平衡木的时间分别为(5.71±4.23),(21.23±9.49),(10.48±6.50)和(11.33±8.91)s;在术后3 d各组小鼠穿越平衡木的时间分别为(6.09±2.73),(16.83±7.51),(9.48±5.94)和(8.09±5.17)s;在术后5 d各组小鼠穿越平衡木的时间分别为(5.32±2.15),(20.33±11.17),(8.24±5.31)和(8.27±5.54)s;这4组小鼠大脑皮层的LC3Ⅱ蛋白相对表达水平分别为1.00±0.25,1.87±0.14,1.37±0.19和1.03±0.17;这4组小鼠大脑皮层的Atg5蛋白相对表达水平分别为1.00±0.15,1.64±0.38,0.97±0.20和1.01±0.16;上述指标:模型组与假手术组相比,实验组与模型组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 葛根素可能通过下调自噬关键蛋白Atg5及LC3Ⅰ/Ⅱ发挥抗缺血再灌注脑损伤小鼠的神经保护作用。

没食子酸乙酯对人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响及其机制

研究狼毒大戟中没食子酸乙酯(ethyl gallate,EG)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响,并对其作用机制进行探讨。采用细胞与Matrigel黏附实验,Transwell小室检测EG对人乳腺癌MDA-MB-231细胞黏附、侵袭和运动能力的影响。RT-PCR检测EG对MMP-2、MMP-9的m RNA表达的影响;Western blot法检测EG对Akt-NF-κB信号转导通路蛋白表达的变化。结果显示,EG在体外可显著抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞的侵袭、运动以及黏附能力(P<0.05)。EG可抑制MMP-2、MMP-9的m RNA水平,抑制Akt-NF-κB信号转导通路中的Akt磷酸化和NF-κB蛋白表达。因此认为EG在体外具有一定的抑制乳腺癌细胞侵袭迁移的作用,其机制与抑制MMP-2、MMP-9的m RNA水平、抑制Akt磷酸化过程和NF-κB蛋白表达有关。

葛根素通过抗氧化应激对缺血性脑损伤小鼠的神经保护作用

目的观察葛根素通过抗氧化应激对抗缺血性脑损伤小鼠的神经保护作用。方法根据体重将小鼠随机分为4组:假手术组、模型组和低、高2个剂量实验组,每组各15只。造模之前,低、高2个剂量实验组小鼠每天分别腹腔注射葛根素(50,100 mg·kg^(-1)),连续4 d。于第5天夹闭小鼠双侧颈总动脉缺血30 min后,进行再灌注,建立缺血性脑损伤模型。低、高2个剂量实验组小鼠继续连续给药物8 d。假手术组与模型组小鼠给予生理盐水。用筑巢实验评价小鼠的日常活动自理能力,用Y迷宫实验评价小鼠的空间工作记忆能力,用试剂盒检测小鼠的前额叶皮质脑内丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量。结果模型组、假手术组和低、高2个剂量实验组的筑巢实验评分分别为(2.67±0.33),(4.22±0.28)(3.89±0.42)和(4.22±0.15)分;这4组的MDA含量分别为(2.56±0.17),(1.13±0.10),(1.61±0.12)和(1.91±0.14)μmol·mg^(-1)。模型组的上述指标与假手术组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01);低、高2个剂量实验组的上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论葛根素可能通过抗脑内氧化应激发挥改善缺血性脑卒中小鼠自理能力和空间学习记忆能力的神经保护作用。

葛根素通过抗氧化应激对亚慢性乙醇脑损伤大鼠的神经保护作用

目的研究葛根素对亚慢性乙醇脑损伤大鼠的神经保护作用及其抗氧化应激作用机制。方法按照体重将大鼠分为5组:正常组、模型组和低、中、高3个剂量实验组。通过连续大量灌胃给予乙醇4 d建立亚慢性脑损伤大鼠模型。从灌胃给予乙醇第1天起,正常组与模型组大鼠腹腔注射0.9%Na Cl 5.0mL·kg^(-1)·d^(-1);低、中、高3个剂量实验组腹腔注射葛根素50,100,150mg·kg^(-1)·d^(-1),连续7 d。以血液乙醇浓度检测试剂盒检测大鼠血液乙醇浓度,Y迷宫检测大鼠空间学习记忆能力,FJB染色评价大鼠前额叶皮层神经元数量,试剂盒法检测各组大鼠前额叶皮层内超氧化物岐化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平。结果大量灌胃给予乙醇1~4 d,大鼠血液乙醇浓度显著增加并持续高于人类的醉酒状态(>320 mg·d L^(-1))。给药后,正常组、模型组与低、中、高3个剂量实验组大鼠自发反应交替率分别为(76.18±5.70)%,(38.61±5.70)%,(45.70±4.39)%,(74.46±2.77)%和(75.62±6.89)%;这5组的SOD活性分别为(15.18±1.81),(7.88±0.97),(9.20±0.88),(14.53±0.89)和(14.36±0.70)U·mg^(-1);这5组的MDA活性分别为(1.04±0.04),(1.31±0.06),(1.24±0.03),(1.10±0.07)和(1.08±0.09)μmol·mg^(-1)。模型组的上述指标与正常组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);中、高2个剂量实验组的上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论葛根素可通过增加SOD活性、减少MDA水平,发挥对抗亚慢性乙醇脑损伤的神经保护作用。

过表达α 2,3-唾液酸转移酶基因对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响

目的研究过表达α2,3-唾液酸转移酶(ST3GalⅢ)基因对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响。方法构建ST3GalⅢ慢病毒表达载体,转染MDA-MB-231细胞。将转染细胞分为空白组(未转染,Mock cells,M)、对照组(转染对照慢病毒,Parent cells,P)和实验组(转染慢病毒载体,ST3GalⅢ,ST3)。用实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫印迹法检测转染后ST3GalⅢmRNA及蛋白表达,流式细胞术分析转染后ST3GalⅢ催化形成下游产物唾液酸化Lewis抗原(SLe X)变化;用细胞黏附实验、Transwell小室检测MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响。结果 RT-PCR与Western bolt显示对照组和实验组中ST3GalⅢmRNA相对表达量分别为0.91±0.04,1.85±0.08;蛋白相对表达量分别为0.94±0.04,1.96±0.10;实验组mRNA和蛋白表达分别为对照组1.84倍和1.76倍(P<0.05);实验组细胞表面SLe X含量为92.86±4.41,为对照组的1.61倍,含量明显升高(P<0.05)。细胞黏附检测结果表明,空白组、对照组和实验组的OD570nm分别为0.32±0.02,0.29±0.01和0.46±0.03;细胞侵袭能力结果表明,空白组、对照组和实验组的OD570nm分别为0.93±0.02,0.81±0.01和1.46±0.13,实验组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论过表达ST3GalⅢ基因可提高MDA-MB-231细胞侵袭能力。