ZnO量子点的制备及其发光特性研究

利用溶胶-凝胶法在乙醇溶液中制备出ZnO量子点。通过紫外-可见吸收光谱(UV-Vis)和荧光光谱对合成量子点的发光性质进行了研究。结果表明,ZnO量子点的荧光光谱由两部分组成:一是较弱较窄的紫外荧光峰(346nm),另一是较强较宽的可见荧光发射峰(510nm)(λex=329nm);在反应温度为40℃,ZnAc2·2H2O与LiOH·H2O的物质摩尔比为1∶2时能产生明亮的黄绿色荧光。

稳定过表达TOX3的乳腺癌MDA-MB-231细胞系的建立

目的构建人TOX高迁移率蛋白家族成员3(TOX3)基因慢病毒表达载体并建立稳定过表达TOX3的MDA-MB-231人乳腺癌细胞系。方法通过全基因合成法合成TOX3基因序列片段,并进行PCR扩增。将TOX3基因克隆到pLVEF-1a/GFP-Puro载体中,构建pLVEF-1a/GFP-Puro-TOX3慢病毒载体。经酶切和测序鉴定后,将构建好的慢病毒载体进行病毒包装和病毒滴度检测。用获得的慢病毒液转染MDA-MB-231人乳腺癌细胞系,通过嘌呤霉素选择性培养,用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达,采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测MDA-MB-231细胞中TOX3 mRNA的表达,Western blot法检测MDA-MB-231细胞中TOX3蛋白的表达。结果经酶切和测序鉴定,成功构建了pLVEF-1a/GFP-Puro和pLVEF-1a/GFP-Puro-TOX3慢病毒表达载体,病毒包装后检测病毒滴度分别为2×108TU/mL和1×108TU/mL,转染MDA-MB-231细胞后,GFP表达的细胞达95%以上。与阴性对照组相比,qRT-PCR和Western blot结果显示,MDA-MB-231-TOX3细胞中TOX3的mRNA和蛋白表达水平均明显升高。结论成功构建了TOX3慢病毒表达载体并建立了稳定过表达TOX3的MDA-MB-231细胞系。

莪术对正常和血瘀证孕大鼠血液流变学的影响

目的观察莪术对正常和血瘀证孕大鼠血液流变学的影响。方法采用皮下注射盐酸肾上腺素与冷刺激的方法制备血瘀证模型,造模后将正常组随机分为空白对照组和高、中、低剂量莪术组,将血瘀证模型组随机分为模型对照组和高、中、低剂量莪术组。受孕后第6～19d给予不同剂量的莪术水煎液。检测受孕雌鼠血液流变学指标。结果莪术高、中、低剂量组均能降低正常组与血瘀证模型组在不同切变率下全血黏度。与正常对照组相比较,正常+莪术高剂量组在不同切变率下全血黏度有显著性差异(P<0.05),而在中切变率下,各剂量血瘀+莪术组的全血黏度与正常对照组相比较均有显著性差异(P<0.05)。结论莪术+血瘀证模型组能使全血黏度降至正常孕大鼠水平,证明了中医"有故无殒,亦无殒"的中药辨证减毒理论。

FUT8基因RNAi慢病毒载体的构建及对MCF-7细胞增殖的影响

旨在构建FUT8基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体并观察其对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响。针对FUT8基因设计3组短发夹RNA序列,退火合成双链DNA,通过连接线性化的p GC-LV-GFP载体,构建mi RNA慢病毒载体质粒,并将其转化至感受态细胞DH5α;测序验证正确后进行FUT8基因慢病毒载体的包装及病毒滴度测定,将获得的重组慢病毒p GC-sh FUT8转染MCF-7细胞,利用Real time-PCR、Western blot分别验证转染后MCF-7细胞中FUT8 m RNA及蛋白的表达,MTT法及克隆形成实验检测sh FUT8对MCF-7细胞增殖能力的影响。测序证实成功构建针对FUT8基因的RNAi慢病毒载体;慢病毒载体经293T细胞包装成功,测定病毒悬液滴度>5×108 TU/m L;荧光显微镜下观察各转染组细胞GFP的表达,转染效率达90%以上;Real-time PCR、Western blot结果显示干扰组FUT8的m RNA及蛋白表达水平较对照组显著降低,其中p GC-sh FUT8-2序列对FUT8基因的干扰效率可达80%,干扰效果最佳,FUT8沉默后MCF-7细胞增殖能力下降。

镇肝熄风汤对帕金森模型小鼠脑黑质Bcl-2家族mRNA表达的影响

目的观察镇肝熄风汤对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methy-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahy-dropyridine,MPTP)诱导的帕金森病(PD)模型小鼠脑黑质Bcl-2家族蛋白表达的影响。方法采用连续灌胃给予C57BL/6小鼠不同剂量镇肝熄风汤(12.5、25和50 g/kg)14天,于第11天开始,给药前1 h皮下注射MPTP(30mg/kg),连续4天,造模后运用实时定量PCR法检测Bax、Bad、Bcl-2和Bcl-xl mRNA的表达。结果 PCR结果显示,镇肝熄风汤下调了Bax mRNA表达(P<0.05),同时上调了Bcl-2和Bcl-xl mRNA表达(P<0.05),对Bad mRNA表达无影响。结论镇肝熄风汤具有抑制PD模型小鼠脑黑质Bax mRNA表达,促进Bcl-2和Bcl-xL mRNA表达的作用。

ZnO量子点的制备及其条件优化

利用溶胶-凝胶法在乙醇溶液中制备出ZnO量子点。通过紫外-可见吸收光谱(UV-Vis)和荧光光谱对合成量子点的合成条件(反应温度、反应时间、摩尔比)进行了优化。结果表明,在反应温度为40℃、反应时间为1 h、Zn Ac2与Li OH的物质的质量比为1∶2时,得到的ZnO量子点的发光性能最佳,此时能产生明亮的黄绿色荧光。

白藜芦醇对人胶质瘤细胞迁移能力的影响

目的:探讨白藜芦醇对人胶质瘤U251细胞迁移能力的影响。方法:常规培养人胶质瘤U251细胞,取对数生长期细胞进行实验。采用细胞划痕实验检测经终浓度为50和100μg/ml的白藜芦醇刺激后的人胶质瘤U251细胞的迁移距离。结果:细胞划痕实验结果显示,对照组、50μg/ml白藜芦醇组和100μg/ml白藜芦醇组刺激的U251细胞迁移率分别为(25.7±2)%、(19.8±7)%和(8.3±2)%,均有显著性差异(p<0.05)。结论:白藜芦醇具有抑制人胶质瘤U251细胞迁移的作用。

北纬53°地区人群体质指数、腰臀比与高血压关系的调查

目的解高寒地区人群超重肥胖、中心性肥胖发生率及其与高血压的关系。以期为肥胖和高血压的防治措施制定提供研究依据。方法对北极村1064例体检者进行身高、体重、腰围、臀围、血压等检测,并按照腰臀比值、体质指数进行分层分析各组与高血压相关性。结果受检者肥胖患病率为19.55%,超重的患病率为35.81%,中心性肥胖患病率为69.64%,高血压患病率为27.16%。正常人群随着BMI的增加,高血压的患病率呈明显上升趋势;中心性肥胖人群随着BMI的增加高血压的患病率显著上升(P<0.0001)。将WHR和BMI作为自变量对高血压的患病率进行相关性分析,结果显示,肥胖组和超重组高血压的患病率明显高于正常体重组(P<0.0001);中心性肥胖组的高血压率明显高于正常体型组(P<0.0001)。经多因素相关分析,WHR和BMI与高血压都有极显著性意义(P<0.0001)。结论该研究结果显示,超重,肥胖和中心性肥胖都是高血压的独立危险因素。即使BMI仍在标准范围的人,若是任由腰围一直变大,对健康而言,仍是一种非常不良的信号。因此,如果只注意体重,而忽视腹部脂肪过多,仍有发生慢性疾病的危险。

浅谈微课在药剂学实验课的建设与应用

微课是一种新兴的教学手段。本文论述了微课在药剂学实验课中的优势,分析了微课在药剂学实验课中的应用,为其他学校药剂实验课教学提供参考。

老年2型糖尿病患者血糖波动与循环内皮祖细胞及微血管病变的相关性

目的探讨老年2型糖尿病患者血糖波动通过动员内皮祖细胞造成微血管病变的机制。方法选取老年2型糖尿病患者进行眼底检查和尿微量白蛋白排泄率检测,分为微血管病变组和非病变组,采用动态血糖监测系统(CGMS)24 h监测血糖,记录空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 h PG),计算每日平均血糖值(MBG)、平均血糖标准差(SDMG)及平均年龄血糖波动幅度(MAGE)等,表征患者血糖波动和离散程度;采用流式细胞仪法测定样本血样中CD34和激酶插入结构阈受体(KDR)阳性的循环内皮祖细胞含量;记录患者肝肾功能、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)及糖化血红蛋白(HbA1c)表征患者的血管病变程度。结果病变组患者的2 h PG较非病变组患者高〔(11.98±1.42)vs(9.41±0.56)mmol/L〕(P=0.016)。病变组SDMG和MAGE(2.34±0.73;6.34±1.35)较非病变组(1.72±0.14;3.13±1.10)大(P=0.021,0.001)。病变组表征循环内皮祖细胞含量的CD34+KDR+细胞比例较低(P=0.007);患者血内皮祖细胞的数量与MAGE呈负相关关系,(r=-0.49,P=0.006);病变组患者血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)及TG水平较非病变组显著升高(P=0.009;0.013;0.006)。Logistic回归模型分析显示患者的病程、TG、SDMG、MAGE以及CD34+KDR+细胞的含量之间存在显著相关性(P<0.05)。结论血糖的波动程度与老年2型糖尿病患者的微血管病变程度具有显著相关性,患者应采用不同的手段监测血糖波动情况,早期防治微血管病变。

没食子酸乙酯通过线粒体通路诱导人结肠癌Lovo细胞凋亡的机制研究

目的研究没食子酸乙酯(ethyl gallate,EG)对人结肠癌细胞Lovo凋亡的影响并探讨相关机制。方法以体外培养的Lovo细胞作为研究对象,采用倒置显微镜观察细胞生长的变化、Annexin V-FITC/PI双染法和DNA Ladder琼脂糖凝胶电泳法检测没食子酸乙酯的凋亡诱导作用;采用免疫细胞化学法检测cleaved caspase-3,cleaved caspase-9蛋白的表达。结果没食子酸乙酯可明显抑制Lovo细胞生长,倒置显微镜下观察到细胞密度明显降低:各用药组的细胞凋亡率随着药物浓度升高而升高:DNA琼脂糖凝胶电泳可见明显DNA梯状条带:各用药组细胞cleaved caspase-3,cleaved caspase-9基因蛋白阳性表达率明显升高。结论没食子酸乙酯可通过上调cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白的表达,激活线粒体通路从而促进Lovo细胞凋亡,这是没食子酸乙酯发挥其抗癌作用的重要机制之一。

谷红注射液对非痴呆性血管认知障碍的疗效以及对脂蛋白相关磷脂酶A2的影响

目的:观察谷红注射液治疗非痴呆性血管性认知障碍(VCIND)的临床疗效,并且探讨其对脂蛋白相关磷脂酶A2的影响。方法:2011年1月-2012年12月在某院就诊的112例VCIND患者,随机分为观察组和对照组。对照组患者接受常规治疗,观察组患者除了常规治疗外还接受静脉滴注谷红注射液,20 ml·d-1,治疗8周后比较2组患者治疗前后的事件相关电位-P300(ERP-·P300)、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分以及血清脂蛋白相关磷脂酶A2水平的变化。结果:(1)治疗后观察组患者ERP-300潜伏期较对照组显著延长(P<0.01),ERP-300波幅较对照组显著增加(P<0.01);(2)治疗后观察组患者MoCA评分较对照组显著增加(P<0.01);(3)治疗后观察组患者Lp-PLA2水平较对照组显著降低(P<0.01)。结论:谷红注射液可改善VCIND患者的认知功能,并且可以降低VCIND患者的脂蛋白相关磷脂酶A2水平。

黄豆苷元对抑郁模型小鼠行为及海马DG区病理形态学影响

目的:探讨黄豆苷元的抗抑郁作用及其机制。方法:昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、氟西汀组(3.0 mg·kg-1,ig)、黄豆苷元低、中、高剂量组(10,20,40 mg·kg-1,ig),每组10只。给药组每日应激前1 h ig给药,共21 d。采用慢性不可预知性温和应激(CUMS)法建立抑郁小鼠模型,通过体重和旷场实验检测小鼠抑郁样行为;采用尼氏染色法检测海马DG区神经元病理形态学变化;TUNEL法检测神经元凋亡情况。结果:与正常组比较,模型组小鼠出现明显的行为学异常,表现为体重减少(P<0.01);旷场实验水平运动及垂直运动得分减少(P<0.01,P<0.05);尼氏染色显示海马DG区神经元形态不规则,细胞分层不清;TUNEL法显示神经元凋亡数量增加(P<0.01)。与模型组比较,氟西汀组及黄豆苷元低、中、高剂量组小鼠行为学异常均有明显改善,小鼠体重增加(P<0.01),旷场实验水平运动及垂直运动得分增加(P<0.01);海马DG区神经元损伤性变化减轻;神经元凋亡率减少,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:黄豆苷元可能通过减少神经元凋亡改善CUMS抑郁模型小鼠行为学异常,产生抗抑郁作用。

莪术醇对人脑胶质瘤U251细胞增殖及凋亡作用的影响

目的:探讨莪术醇对人脑胶质瘤U251细胞增殖及凋亡作用的影响。方法:采用MTT法和流式细胞仪检测法检测不同浓度下莪术醇(12.5、25、50、100μg/ml)对U251细胞增殖和凋亡作用的影响。结果:MTT结果显示,不同浓度的莪术醇(12.5、25、50、100μg/ml)增殖率明显低于对照组(P<0.05);流式细胞仪检测显示,不同浓度莪术醇(12.5、25、50、100μg/ml)的凋亡率较对照组明显升高(P<0.05)。结论:莪术醇具有抑制U251细胞增殖和促进U251细胞凋亡的作用。

Fas途径参与没食子酸乙酯诱导结肠癌Lovo细胞凋亡

目的研究死亡受体通路在没食子酸乙酯诱导结肠癌细胞Lovo凋亡过程中的作用。方法以结肠癌细胞Lovo为研究对象,采用AO/EB荧光染色法观察药物作用后凋亡细胞形态学变化;免疫细胞化学法检测用药前后凋亡相关基因Caspase-8,Fas,Survivin蛋白的表达。结果没食子酸乙酯作用后,AO/EB双染后荧光显微镜下观察Lovo细胞呈典型的凋亡形态学改变。免疫细胞化学结果表明,实验组活性Caspase-8蛋白和Fas蛋白阳性表达率增强,而Survivin阳性表达率减弱,与对照组相比具有显著差异。结论没食子酸乙酯可通过上调Fas和活性Caspase-8蛋白的表达,下调Survivin蛋白的表达。死亡受体通路参与没食子酸乙酯诱导Lovo细胞凋亡的过程,这可能是EG发挥抗肿瘤作用机制之一。