抗菌肽Cn-AMP2双靶点抗菌机制的光谱学研究

目的合成抗菌肽Cn-AMP2并用光谱学方法研究其抗革兰阴性菌和革兰阳性菌的作用机制。方法通过Fmoc固相合成的方式制备抗菌肽Cn-AMP2并测定抗菌肽Cn-AMP2对不同菌株的最低抑菌浓度。使用圆二色光谱法测定抗菌肽Cn-AMP2在不同缓冲溶液体系中的二级结构;以N-苯基-1-萘胺为探针进行细胞外膜渗透性实验。以溴化乙锭为荧光探针,通过肽与DNA竞争结合荧光光谱研究抗菌肽Cn-AMP2对细菌基因组DNA作用。结果通过Fmoc固相合成制备的抗菌肽Cn-AMP2经高效液相色谱纯化后,质谱测定分子量为1 266.40Da,表明合成无误。对革兰阴性菌和革兰阳性菌均具有较强的杀伤作用。针对不同菌株,最低抑菌浓度MIC为50.0~100.0μg/mL。在圆二色光谱测定结果表明抗菌肽Cn-AMP2为螺旋结构多肽。在模拟的疏水环境下,其摩尔椭圆率为-2 548 degree·cm^2·dmo^l(-1)。在细菌外膜渗透性实验表明细胞膜是抗菌肽的作用靶点。抗菌肽Cn-AMP2与基因组DNA具有结合能力,表明基因组DNA也是作用靶点。结论抗菌肽Cn-AMP2通过作用于细胞膜和基因组DNA产生抗菌作用。