医学细胞生物学实验教学中多元化教学方法的研究

采用多元化教学方法应用于医学细胞生物学的实验教学中,通过将问题式教学法、小组讨论式教学法和示范性教学法相结合,形成以"问题-讨论-示范-指导-解决-反馈-应用"为模式的协调的教学过程,使学生的学习态度更积极,学习效果更明显,各项能力的发展更均衡,提高医学细胞生物学实验的教学质量。

启发式教学法在遗传学教学中的应用

课堂教学是教学中的中心环节。如何培养学生的智能,怎样将课堂教学由注入式转向启发式,以利于教学质量的提高,激发学生的学习兴趣,培养开拓型人才,是当前教学中研究的主要课题。我们在医学遗传学教学中运用下面几种形式收到了良好效果。一、巧设悬念法即先提出问题,不给予解释,使学生带着问号听课,为学生创造了思考问题的意境,使之产生探求未知的欲望。

PCR技术在医学中的应用

PCR技术(多聚酶链反应Polymerase Chain Reactionn简称PCR)诞生于1985年，由美国Ce-tus公司的Saiki等研究成功。问世以来，以其简便、快速、敏感、特异等特点受到医学界普遍重视．被誉为里程碑式的分子生物学技术，列为90年代生物技术十大热点之首．及1989年世界重大科技进展之一。目前其广泛应用于人类遗传病的基因诊断、产前诊断，病原微生物的检验．肿瘤分子遗传掌的研究，性别鉴定，器官移植配型．法医鉴定，

肌肽通过调节JNK和NF-kappaB通路抑制高糖诱导的心肌细胞凋亡(英文)

高血糖症是糖尿病并发心血管疾病的重要危险因素.高血糖诱导产生的活性氧(ROS)能够引起糖尿病心肌病.我们的前期工作已经证实,肌肽对高糖环境下细胞凋亡具有保护作用,但其机制尚未明确.为研究肌肽对高糖诱导的大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及相关信号机制,以高糖诱导心肌细胞H9c2为模型,采用Brdu-ELISA法检测细胞增殖过程中DNA合成情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫印迹实验检测JNK/c-Jun、NF-κB的磷酸化水平,RT-PCR检测TNF-α的mRNA表达.实验结果显示,肌肽能够提高高糖损伤的H9c2细胞增殖能力,降低心肌细胞凋亡,抑制高糖激活的JNK、c-Jun和NF-κB磷酸化水平及TNFα的mRNA表达.上述结果表明,肌肽拮抗高糖诱导的心肌细胞凋亡机制与抑制p-JNK/p-c-Jun、p-NF-κB水平和TNF-α表达有关.

Grx1抑制高糖诱导的H9c2细胞中Caspase-8/3和JNK/c-Jun凋亡通路的激活

谷氧还蛋白1(glutaredoxin 1,Grx1)作为一种重要的抗氧化剂,通过响应多种重要蛋白质的活动和功能调节细胞的关键过程.了解Grx1功能,对寻求糖尿病和心肌病等,以凋亡失调和氧化还原稳态改变为发病机制的疾病的新颖治疗策略至关重要.为研究Grx1对高糖诱导的大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及相关信号机制,本研究以高糖诱导大鼠心肌细胞H9c2建立高糖损伤模型,采用免疫印迹实验检测caspase-3、8、9蛋白活性片段的表达和凋亡信号蛋白JNK/c-Jun的磷酸化水平.结果显示,与正常对照组相比,高糖组caspase家族中,剪切的caspase-3、caspase-8、caspase-9相对含量均显著增多,JNK和c-Jun蛋白的磷酸化水平均显著上调.但给予外源性Grx1保护后,剪切的caspase-3和caspase-8相对含量均显著降低,JNK和c-Jun蛋白的磷酸化水平均显著下调.上述结果表明,高糖通过介导caspase-8/3和caspase-9/3凋亡通路,并激活凋亡相关信号通路JNK/c-Jun诱导H9c2心肌细胞凋亡.给予外源性Grx1保护后,可通过抑制caspase-8/3凋亡通路和JNK/c-Jun信号通路的激活,拮抗高糖诱导的心肌细胞凋亡.

胰高血糖素样多肽-1拮抗2型糖尿病胰岛细胞凋亡损伤（英文）

胰高血糖素样多肽-1(glucogen-like peptide-1,GLP-1)在胰岛素分泌过程中扮演重要角色,并在改善β细胞功能方面有着令人瞩目的效应,但有关其作用机制尚需更深入研究。本研究探讨GLP-1对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠模型胰岛细胞损伤的影响,观察GLP-1在T2DM大鼠胰岛细胞凋亡损伤机制中所发挥的作用。HE染色结果发现,糖尿病大鼠胰岛损伤。ELISA结果表明,糖尿病患者和糖尿病大鼠血清中GLP-1表达水平上调。放射免疫结果表明,GLP-1和谷氧还蛋白1(Grx1)促进HIT-T 15细胞分泌胰岛素,Cd抑制胰岛素的分泌。免疫组化结果表明,糖尿病大鼠GLP-1加药处理后,各组与糖尿病组相比,药物提高了Grx1和胰岛素表达水平,降低了胰高血糖素表达水平,同时降低了活性胱天蛋白酶3(caspase-3)的表达。本研究结果提示,GLP-1在肥胖T2DM大鼠胰岛细胞凋亡中起保护作用,同时可调节胰岛素和胰高血糖素水平,其机制可能与Grx1相关。

谷氧还蛋白1调节高糖诱导的心肌细胞自噬

人谷氧还蛋白1（Grx1）在体内具有广泛的抗氧化、抗凋亡作用,与氧化应激损伤导致的糖尿病和心肌病等多种疾病的发病机制密切相关.研究表明,糖尿病心血管病与自噬调节异常密切相关,但糖尿病心血管病变时自噬水平如何调节才能够保护受损的心肌还尚未定论.为研究自噬在高糖诱导心肌细胞凋亡中的作用及其与Grx1的关系,以明确Grx1对高糖诱导的心肌细胞凋亡的抑制作用及相关机制,本研究以高糖诱导大鼠心肌细胞H9c2建立高糖损伤模型,采用氧化还原蛋白免疫印迹法检测蛋白质的氧化水平.免疫印迹检测活性caspase 3蛋白和自噬蛋白Beclin1和LC3以及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平.研究发现,高糖可诱导蛋白质的氧化水平增加,而Grx1可拮抗高糖诱导的H9c2细胞中蛋白质的氧化.并且含血清的高糖（25和50 mmol/L）作用H9c2心肌细胞后,自噬蛋白Beclin 1表达水平在6-48 h显著上调.同时发现,活性caspase 3水平也呈时间依赖性表达上调,caspase 3和自噬蛋白表达水平的同趋势增加,说明升高的自噬水平与心肌细胞凋亡的调节有关.Grx1保护组的自噬蛋白及活性caspase 3表达水平均显著下调,Grx1抑制剂镉组可拮抗Grx1调节的自噬蛋白和凋亡蛋白水平,说明Grx 1通过抑制自噬及caspase 3水平抑制高糖诱导的心肌细胞凋亡.以上研究结果提示,通过提高Grx1/GSH抗氧化系统功能,调节氧化还原稳态,可以有效减少高糖诱导的心肌损伤,保护糖尿病心脏功能.

下调解耦联蛋白2表达抑制Fadu细胞增殖

目的探讨解耦联蛋白2(UCP2)对下咽癌Fadu细胞的影响,及UCP2对细胞周期以及细胞增殖的影响;同时探讨临床常用化疗药物顺铂(cisplatin)对UCP2基因下调后的Fadu细胞增殖的影响。方法流式细胞术/PI染色法检测UCP2基因对Fadu细胞周期的影响;集落形成实验检测UCP2基因下调对Fadu细胞增殖的影响;MTT法和Brdu法检测UCP2能否增强Fadu细胞对顺铂的敏感性以及使用UCP2抑制剂京平尼(genipin)处理细胞后,Fadu细胞的增殖情况。结果干扰UCP2表达抑制Fadu细胞周期于G_1/S期;抑制细胞集落形成,但干扰UCP2表达对cisplatin抑制Fadu增殖无协同作用;genipin抑制UCP2的表达后,细胞增殖受到抑制,具有时间/浓度依赖性。结论下调UCP2的表达后,Fadu细胞的增殖能力减弱,且抑制细胞周期于G_1/S期,提示UCP2可能在下咽癌Fadu细胞增殖过程中发挥重要的调节作用。

氯喹对S180荷瘤小鼠的抑瘤作用及其机制

目的探讨氯喹(CQ)对小鼠移植性肉瘤S_(180)的抑瘤作用及其可能机制。方法采用40只S_(180)荷瘤小鼠分为模型组,氯喹低剂量组,氯喹中剂量组,氯喹高剂量组进行体内抑瘤实验,观察不同浓度氯喹对小鼠肉瘤S_(180)的抑制作用;透射电子显微镜观察氯喹作用下荷瘤鼠肿瘤细胞超微结构的变化;流式细胞术检测氯喹诱导荷瘤鼠S_(180)细胞凋亡的情况;免疫组织化学方法检测相关凋亡因子Bcl-2、细胞色素C和Cle-Caspase-3的表达情况;Western blotting检测荷瘤组织Bcl-2和Cle-Caspase-3蛋白表达水平的变化以及线粒体和细胞质中细胞色素C蛋白含量的变化。结果与模型组相比较,氯喹处理组小鼠移植肉瘤S_(180)生长速度显著减慢,肿瘤体积和瘤质量明显减小(P<0.05);透射电子显微镜观察发现,与模型组比较氯喹处理组肿瘤细胞形态出现明显凋亡损伤改变,凋亡小体形成;各剂量组氯喹均可诱导荷瘤鼠S_(180)细胞凋亡,使抗凋亡因子Bcl-2表达下调,凋亡因子Cle-Caspase-3表达上调(P<0.05);并且氯喹能够降低线粒体内细胞色素C蛋白的表达,提高细胞质细胞色素C蛋白的表达(P<0.05),促使线粒体内细胞色素C向细胞质内释放。结论氯喹能够抑制小鼠S_(180)肉瘤的生长,可能是通过线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡,从而发挥抑瘤的作用。

对原生质体灭活后融合的初步研究

将啤酒酵母菌QSB_8与龙清16的原生质体分别热灭活与紫外灭活后融合,计算原生质体制备率、再生率和融合率,并对融合前、融合时的各种因素进行分析,为以后的癌细胞研究以及单克隆抗体的制备打下基础。

先天性红绿色盲一个大家系的调查分析报告

在普查遗传病工作中,我们发现先天性红绿色盲一个大家系,现将调查结果报告如下: 一、调查方法与结果我们根据先证者提供的情况,按照《医学遗传学》和《眼科检查与诊断》所要求的方法。对分居在各地的小家系进行遗传咨询和追踪考证,除个别人失去联系和年龄小者外,全部家系成员均接受我们的直接检查或调查。