实验小鼠与人体内寄生华支睾吸虫成虫的对比研究

目的 探究华支睾吸虫在实验小鼠体内发育的成熟度,了解其与人体内自然感染获得的华支睾吸虫是否存在差异。方法 使用华支睾吸虫囊蚴对8只实验小鼠进行灌胃感染。于感染3周后,每间隔1 d采用水洗沉淀法对小鼠粪便进行检查,在粪便中检出虫卵后安乐死小鼠,获得虫体。对小鼠体内获得的虫体进行醋酸洋红染色,制成标本后将其与人体自然感染获得的华支睾吸虫标本进行整体及内部结构的测量比较。结果 华支睾吸虫在实验小鼠体内23 d即可发育成熟。小鼠体内获得的华支睾吸虫成虫的大小、口吸盘、腹吸盘、咽、子宫、卵巢、受精囊、睾丸以及虫卵均小于人体中获得的华支睾吸虫成虫。结论 华支睾吸虫可以在小鼠体内发育成熟,但其小于在人体内获得的成虫。

PEI介导VEGFR-3siRNA转染对VEGF-C诱导LEPCs分化的影响

目的应用聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)介导淋巴管内皮祖细胞(lymphatic endothelial progenitor cells,LEPCs)VEGFR-3基因siRNA,体外沉默LEPCs VEGFR-3基因表达,观察VEGFR-3siRNA对VEGF-C诱导LEPCs分化的影响。方法采用Ficoll法分离人脐血单个核细胞,流式细胞仪、免疫荧光分选并鉴定LEPCs。PEI包裹前期实验抑制效果最好的VEGFR-3siRNA体外转染入LEPCs,荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效率。流式细胞仪检测经VEGF-C诱导7天各组LEPCs CD133+细胞所占比例,14天后各组LYVE-1+细胞所占比例。结果 VEGFR-3siRNA成功转染入LEPCs,转染效率30%,与lipofectimine转染效率无差异,VEGFR-3siRNA转染组7天的LEPCs CD133+细胞所占比例明显高于VEGF-C诱导组(P<0.05),而14天后两组之间LYVE-1+细胞所占比例无显著差异(P>0.05)。结论体外经由PEI介导的siRNA能有效的沉默LEPCsVEGFR-3的表达,从而抑制VEGF-C诱导的LEPCs分化。

RNAi体外沉默淋巴管内皮祖细胞VEGFR-3基因表达

目的应用聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)包裹淋巴管内皮祖细胞(lymphatic endothelial progenitor cells,LEPCs)血管内皮生长因子受体3(vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3)基因siRNA,体外沉默VEGFR-3基因表达,研究抑制LEPCs分化抗肿瘤淋巴管新生的作用。方法 Ficoll法分离人脐血单个核细胞,流式细胞仪、免疫荧光分选并鉴定LEPCs。PEI包裹VEGFR-3siRNA并转染入LEPCs,流式细胞仪检测转染效率。RT-PCR和Western blot检测mRNA和蛋白质水平VEGFR-3基因沉默效果。结果 VEGFR-3siRNA成功转入LEPCs,转染效率30%。VEGFR-3siRNA转染组LEPCs VEGFR-3mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05)。结论体外经由PEI介导的siRNA能有效的抑制LEPCs VEGFR-3的表达,为以LEPCs为靶点抑制肿瘤淋巴管新生提供了实验依据。