病理质控管理系统在临床病理实验教学中的应用

目的病理质控管理系统已经在很多医院得到了广泛应用,将该系统应用于病理实验教学旨在为临床病理实验教学改革带来新模式,通过此模式的培养为临床病理医生的"三导向"执业能力培养奠定基础。方法选取齐齐哈尔医学院病理学院2014、2015级学生,共计150人作为研究对象。通过问卷调查,了解学生对病理质控系统操作、运用能力和对以该系统为载体的新教学模式的主观感受及客观评价;通过病理切片分析的方式对学生的病理学习能力进行客观测评。结果两组学生期末考试总成绩对比,差异无统计学意义(P>0.05);实验组学生的实验考试成绩分数高于传统组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论通过学生反馈发现,利用病理质控系统进行病理实验教学的方法,学生更有兴趣并对疾病的发生发展有了更深刻的理解。

LncRNA UNC5B-AS1对胶质母细胞瘤细胞增殖、迁移、侵袭的影响及与microRNA-199的关系

目的探究长链非编码RNA UNC5B-AS1(LncRNA UNC5B-AS1)对胶质母细胞瘤(GBM)细胞增殖、迁移、侵袭的影响及与microRNA-199(miR-199)的关系。方法体外培养GBM细胞系U251,分为对照组、空载组、抑制组及过表达组。对照组细胞不做处理;空载组、抑制组、过表达组分别采用空载质粒、siLncRNA UNC5B-AS1、过表达LncRNA UNC5B-AS1载体转染GBM细胞系U251。qRT-PCR检测LncRNA UNC5B-AS1、miR-199的表达;CCK-8法、划痕实验、Transwell实验分别检测U251细胞增殖、迁移及侵袭能力;双萤光素酶法检测LncRNA UNC5B-AS1与miR-199的靶向作用;Western blotting检测PI3K/Akt通路蛋白的表达。结果与对照组、空载组比较,抑制组LncRNA UNC5B-AS1降低(P<0.05),miR-199升高(P<0.05),过表达组LncRNA UNC5B-AS1升高(P<0.05),miR-199降低(P<0.05)。与对照组、空载组比较,抑制组细胞活力指数、划痕愈合率、细胞侵袭数、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白相对表达量降低(P<0.05),过表达组细胞活力指数、划痕愈合率、细胞侵袭数、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白相对表达量升高(P<0.05)。双萤光素酶实验结果显示,LncRNA UNC5B-AS1与miR-199-mimics基因上存在结合靶点。结论LncRNA UNC5B-AS1在GBM细胞中高表达,抑制LncRNA UNC5B-AS1能够抑制GBM细胞的增殖、迁移、侵袭作用,其作用机制可能与靶向调控miR-199和调节PI3K/Akt通路有关。

miR-200c阻滞转化生长因子-β1在腹膜后成纤维细胞增殖和迁移侵袭中的作用

目的:阐明miR-200c对腹膜后成纤维细胞增殖的影响,并分析其分子机制,为抑制腹膜后纤维化提供理论依据。方法:收集36例人腹膜后组织,原代培养成纤维细胞,以5 ng/ml TGF-β1刺激者为TGF-β1组,pc DNA3.1-miR-200c转染成纤维细胞,再给予5 ng/ml TGF-β1刺激者为miR-200c组,仅以pc DNA3.1质粒转染者为pc DNA3.1质粒组,正常培养的成纤维细胞为对照组。分别以噻唑蓝(MTT)细胞增殖实验、细胞划痕实验、Transwell细胞小室迁移实验检测成纤维细胞增殖和迁移能力,并以ELISA实验检测各组细胞裂解液中Akt蛋白的含量。结果:miR-200c组成纤维细胞的增殖OD值明显比TGF-β1组降低(P<0.01);与TGF-β1组相比,miR-200c组细胞迁移率明显降低(P<0.01);miR-200c组Akt蛋白的含量比TGF-β1组明显降低(P<0.01)。结论:miR-200c下调Akt通路而抑制TGF-β1对成纤维细胞的增殖或迁移效果,对抑制腹膜纤维化具有重要意义。

MiR200对肾癌细胞纤维化影响的相关性分析

目的研究MiR200对肾癌细胞纤维化的影响机制,为鉴定治疗靶标提供理论依据。方法整群选取2013年1月—2015年1月该院收治的51例肾癌患者病例资料,于实验室,建立肾癌细胞株模型,采用癌旁正常组织作为对照,应用细胞侵袭实验和Westermblot法检测靶基因蛋白表达方法进行试验。结果 MiR-200组在SN12-PM6和786-0平均穿膜细胞的个数差异有统计学意义(P<0.05),MiR-200组ZEB1蛋白表达下降,而在E-cadberin蛋白表达上升,经相关系数比较,MiR-200的表达与E-cadberin成正相关(r=0.824)而ZEB1成负相关(r=-0.762)。结论 MiR-200能够调节皮脂纤维化的侵袭,降低ZEB1蛋白表达,从而E-cadberin蛋白表达上升。

MiR200对肾癌细胞增殖的影响分析

目的研究MiR200对肾癌细胞增殖的影响。方法整群选取2013年1月—2015年1月于齐齐哈尔医学院第三附属医院就诊的51例肾癌患者病理细胞和正常癌旁组织细胞,以及构建裸鼠肾癌模型,测量MiR-200在不同细胞中的表达量和肿瘤增殖情况。结果 MiR-200在裸鼠的SN12-PM6和人的786-o、A498表达中均低于正常组织的表达（P〈0.05）,在48 h后能够抑制肾癌细胞增殖（P〈0.05）,48~72 h抑制情况最为显著（P〈0.05）。结论 MiR-200在肿瘤细胞中呈低表达水平,能够抑制肾癌细胞增殖并能够抑制裸鼠肾癌细胞生长。

组织型基质金属蛋白酶抑制剂-1、基质金属蛋白酶-9在老年女性压力性尿失禁患者阴道壁中的表达及意义

目的观察组织型基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1和基质金属蛋白酶(MMP)-9在女性压力性尿失禁(SUI)患者阴道壁中的表达情况及其机制。方法随机选取25例SUI患者作为观察组,25例盆底器官脱垂症(POP)患者作为脱垂组,25例妇科良性疾病患者作为对照组。取所有受试者阴道壁结缔组织制成切片,采用免疫组织化学法对切片进行染色,采用RT-PCR法检测所有组织中TIMP-1和MMP-9 mRNA的表达情况。结果观察组和脱垂组TIMP-1、MMP-9蛋白的表达及TIMP-1、MMP-9 mRNAΔCt值差异显著(P>0.05),对照组TIMP-1蛋白表达显著高于观察组和脱垂组,而MMP-9蛋白表达显著低于观察组和脱垂组(P<0.05)。结论在SUI和POP患者的阴道壁组织中,MMP-9呈现高表达,TIMP-1呈现低表达,二者可能参与了SUI和POP的发病过程。

低电离辐射对肝癌模型兔免疫功能的影响

目的探讨低电离辐射对肝癌模型兔的免疫功能的影响。方法15只正常家兔采用随机数字表法分为空白组(正常家兔)、对照组(未经低电离辐射的肝癌模型兔)和实验组(经低电离辐射的肝癌模型兔)各5只。空白组不种瘤,不照射;对照组种瘤,不照射;实验组种瘤、照射。对研究组肝癌模型兔进行剂量为75 mGy的辐射,检测实验组血常规及各组IgG、IgM含量、白细胞介素(IL)-4水平、巨噬细胞功能、脾脏指数,并进行免疫功能评价。利用B超进行瘤组织监测,镜下观察癌细胞切片得到其形态学变化结果。结果低电离辐射4 d后,实验组血清中IL-4、IgG、IgM水平均明显高于对照组(P<0.05);实验组各项血常规指标较照射前均明显下降(P<0.05);实验组照射后第8天白细胞(WBC)、血小板(PLT)、淋巴细胞(LY)水平较第4天明显升高(P<0.05);低电离辐射8 d后,实验组血清中IL-4、IgG、IgM水平与第4天比较无显著差异(P>0.05)。实验组巨噬细胞吞噬百分数和脾脏指数均明显高于对照组(P<0.05)。结论通过低电离辐射诱导免疫系统兴奋效应,可一定程度上提升肝癌模型兔的免疫功能。

补体C1q在胶质母细胞瘤替莫唑胺耐药中的作用及机制研究

目的:探究补体C1q在胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)替莫唑胺(TMZ)耐药中的作用及机制研究。方法:公共数据库挖掘补体C1q相关基因(C1QA、B和C)在GBM中的表达模式,实时荧光定量PCR(RTqPCR)检测C1QA、B和C的表达水平。CCK8法测定U251和U251耐药株(U251/TR)细胞活力和半数抑制浓度(IC_(50)),流式细胞术检测U251和U251/TR细胞凋亡。Transwell法检测U251/TR细胞迁移能力,Western Blot法检测补体C1q A链(C1QA),O^(6)-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)的蛋白表达水平。结果:生物信息学分析显示C1QA、B和C在GBM中表达升高,且C1QA和B与肿瘤分级相关。RT-qPCR和Western Blot证实C1QA在U251/TR中表达下降,且在U251/TR中过表达C1QA可以下调IC_(50),并增加了TMZ诱导的细胞凋亡和细胞迁移抑制,以及下调MGMT的蛋白水平。结论:GBM对TMZ耐药后C1QA水平下降,过表达C1QA可以逆转部分GBM的耐药性。