翻转课堂在组织学与胚胎学教学中的实践与反思

随着信息技术发展,翻转课堂已成为教育改革的新方向。本研究对翻转课堂教学模式在组织学与胚胎学教学中进行了尝试与探索,结果显示学生对翻转课堂教学的欢迎度较高,且在提高自主学习能力、分析问题解决问题等多方面的培养给予了肯定,文章也对翻转课堂实践中遇到的一些问题进行了分析和反思,从而为提高组织胚胎学教学质量和实现教学目标提供参。

翻转课堂教学法在《组织学与胚胎学》实验教学中的应用

目的探讨翻转课堂教学法在《组织学与胚胎学》实验教学中的应用效果。方法以齐齐哈尔医学院2015级临床医学专业368人为研究对象,共分为4个行政班级。其中临床医学9~13班为实验组,共计171人,采用翻转课堂教学模式,临床医学5~8班为对照组,共计197人,采用传统教学模式.比较授课效果。结果两组学生实验考试成绩在最高分上无差异,但实验组平均分显著优于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。在各分数段人数分布上看,实验组在成绩大于10.5分人数多于对照组,小于6分人数少于对照组,成绩中上等人数较多,成绩优于对照组。结论翻转课堂作为一种新型教学模式受到极大关注,是教学改革的新方向。通过对翻转课堂教学模式在组织学与胚胎学实验教学中进行了尝试与探索,基于探究性学习为学生带来的主动学习,激发学生的学习积极性和主动性,构建了＂以问题为导向,以学生为中心＂的教学模式。研究表明,翻转课堂能够提高学生的自主学习能力、团队协作能力、分析问题解决问题能力及创新思维等,从而提升教学效果,为信息时代的教与学提供新的思路。

如何建立组织胚胎学信息网

随着Internet的发展与普及,远程教育逐步发展起来.网络教学已经走进我们的教室,由此高等院校的各学科都希望建立一个关于本学科内容的教学、科研网站.这样,不但能够对学生进行远程辅导,而且方便与同行之间的交流与合作.及时了解专业发展动态,紧跟时代发展.本文结合我的个人体会,淡淡如何免费建立功能较为齐全的组织胚胎学教学、科研网站.

胚胎学实验课教学中开设“鸡胚整封标本制作与观察”课的尝试

胚胎学教学包括理论教学与实验教学两部分,理论教学内容抽象,较难理解,所以如何通过胚胎学实验课使学生更好地掌握胚胎学的基本概念、基本内容是一个值得探讨的问题.胚胎学实验课传统的模式是:学生观看胚胎学录像2学时,观察人体胚胎发生模型2学时.由于缺乏对胚胎发生真实过程的观察及动手操作的机会,因而学生对人体胚胎发育的基本过程、结构特点掌握的不够理想,影响了对胚胎学的学习的兴趣及积极性.为了增加学生动手动脑能力,加强直观感受,我们自1999年起开设了"鸡胚整封标本制作与观察"实验课.通过近几年的尝试与探索,使胚胎学实验教学收到了较为满意的效果,现总结如下.

急性缺氧大鼠肺组织病理改变和诱导型一氧化氮合酶的表达

目的:观察急性缺氧时大鼠肺组织损伤和诱导型一氧化氮合酶的分布和活性变化。方法:实验于2004-01/2005-12在齐齐哈尔医学院微形态实验室完成。取Wistar雌性大鼠40只,随机分为正常对照组,缺氧1,3,5,7d组5组,每组8只。缺氧1,3,5,7d组大鼠分别吸入氮气与大气的混合气体(氮气的体积分数为0.95、氧气为0.05)1,3,5,7d建立急性缺氧模型,缺氧每天持续2h,其余时间同正常对照组一样置于常氧下。各组在缺氧完成后进行肺组织取材,进行常规苏木精-伊红染色观察肺组织的形态变化,免疫组织化学染色观察诱导型一氧化氮合酶的染色强度分析。结果:40只大鼠进入结果分析。①苏木精-伊红染色可见缺氧5,7d组肺气肿明显,平均肺泡面积大于正常对照组[(3543.15±150.64),(3724.32±324.67),(2789.12±110.45)μm2,t=9.8913,6.6797,P<0.01]。②随着缺氧时间的延长,诱导型一氧化氮合酶的表达范围逐渐扩大,且其表达的强度也逐渐增强,缺氧5,7d组所有肺组织和肺动脉均为强阳性表达。结论:①急性缺氧可导致大鼠肺组织发生病理改变。②急性缺氧时诱导型一氧化氮合酶在肺组织的表达增多,表达的范围和强度与缺氧时间正相关,与肺组织损伤程度正相关。③诱导型一氧化氮合酶可以作为缺氧程度和肺组织损伤程度的标志之一。

脑缺血及其再灌注后组织细胞的病理形态学研究

脑血管病是临床常见疾病之一,它与恶性肿瘤、心血管疾病同被视为死亡率最高的三大疾病。在脑血管疾病中,缺血性脑血管病又占多数,据国内文献报道,缺血与出血性脑血管病发生率之比为3.5:1; 国外有人统计缺血性脑卒中约占88％,出血性仅占12％。可见,研究和探讨缺血性脑血管病具有重要的意义。目前,对脑缺血及其再灌注损伤的实验研究多集中在病理生理学方面,而病理形态学方面的研究还不多见,下面本文就这一方面做如下介绍。

乳腺癌细胞培养上清液促进人脂肪间充质干细胞迁移和增殖的机制探讨

目的探讨MDA-MB-231乳腺癌细胞培养上清液对人脂肪间充质干细胞(hAdMSC)迁移、增殖和凋亡的影响及分子机制。方法将MDA-MB-231细胞上清液和不含胎牛血清的RPMI-1640培养基以1∶4的体积比混匀后培养的hAdMSC为MDA-MB-231上清液组。向MDA-MB-231上清液组添加10μmol/L Reparixin(CXCR1/2抑制剂)为CXCR1/2抑制剂组;向MDA-MB-231上清液组添加10 nmol/L GSK690693(Akt抑制剂)为Akt抑制剂组。无任何刺激进行培养的hAdMSC为对照组。细胞划痕实验检测各组hAdMSC的迁移能力,CCK-8实验检测各组hAdMSC增殖情况,Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞凋亡实验检测各组hAdMSC凋亡率,Western blot检测各组hAdMSC的mTOR/磷酸化mTOR(p-mTOR)和Akt/磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达。结果与对照组相比,MDA-MB-231上清液组hAdMSC的24 h和48 h细胞划痕闭合面积、细胞增殖水平以及p-Akt和p-mTOR蛋白相对表达量均增加,细胞凋亡率降低(P<0.05);与MDA-MB-231上清液组相比,Akt抑制剂组和CXCR1/2抑制剂组hAdMSC的48 h细胞划痕闭合面积、细胞增殖水平以及p-Akt和p-mTOR蛋白相对表达量均降低,细胞凋亡率均增加(P<0.05)。结论MDA-MB-231乳腺癌细胞培养上清液通过激活Akt-mTOR信号通路促进hAdMSC迁移和增殖,抑制hAdMSC凋亡,其中IL-8-CXCR1/2轴发挥关键作用。

一种新型具有纤溶活性的沙蚕金属蛋白酶的分离纯化及鉴定

通过硫酸铵分级盐析、DEAE-Sepharose FF阴离子交换色谱、CM-Sepharose FF阳离子交换色谱和Sephacryl S-100 HR凝胶过滤色谱,从沙蚕体内分离纯化出一种新型的具有纤溶活性的金属蛋白酶,命名为NVMP.采用SDS-PAGE和MALDI-TOF MS质谱检测,该酶是一种分子质量为28～32 kD的单链蛋白,等电聚焦电泳显示其等电点为8.0.NVMP酶活性被EGTA完全性抑制,表明其是一种典型的金属蛋白酶,最适温度为40℃,最适pH为6,Cu2+、Co2+和Zn2+可阻断其酶活性,而Ca2+和Mg2+可增强蛋白酶活性.经肽指纹图谱分析发现,NVMP是一种未知的新蛋白.NVMP可直接水解纤维蛋白,也可通过激活纤溶酶原转变成纤溶酶的方式,间接水解纤维蛋白.因此,NVMP对预防和治疗血栓性疾病具有一定的药用价值.

高糖环境下趋化因子8促进间充质干细胞旁分泌功能提高人脐静脉血管内皮细胞归巢

背景:趋化因子具有促进干细胞旁分泌血管活性因子,加速血管新生的重要作用。目的:观察高糖环境下,趋化因子8(CXCL-8)刺激的人骨髓间充质干细胞上清液对人脐静脉血管内皮细胞归巢的影响,并分析Sonic Hedgehog信号通路在CXCL-8刺激骨髓间充质干细胞的机制。方法:(1)细胞体外实验:在细胞高糖环境模型下,将质量浓度100μg/L趋化因子8刺激的间充质干细胞设为高糖CXCL-8组,预先以5μmol/L的shh抑制剂辛基马来酰亚胺处理45 min,再用质量浓度100μg/L CXCL-8刺激间充质干细胞者为高糖Shh抑制剂组,高糖环境下培养的间充质干细胞为高糖对照组。提取各组细胞上清液为条件培养基培养人脐静脉血管内皮细胞,其分组按条件培养基而定。使用CCK8细胞增殖实验、细胞划痕实验或Transwell细胞小室实验分别观察各条件培养基(CM)对人脐静脉血管内皮细胞增殖、凋亡、趋化等能力的影响;(2)动物体内实验:建立C57BL/6J小鼠糖尿病皮肤溃疡模型,分别以各组间充质干细胞条件培养基进行处理,验证CXCL-8刺激的间充质干细胞的条件培养基对人脐静脉血管内皮细胞归巢和溃疡愈合的影响。结果与结论:(1)体外实验结果:与高糖对照条件培养基相比,高糖CXCL-8组条件培养基能够促进人脐静脉血管内皮细胞增殖、降低人脐静脉血管内皮细胞凋亡率,并且细胞划痕面积闭合率、细胞迁移率均明显提高(P<0.01),高糖CXCL-8组条件培养基中血管内皮细胞生长因子、表皮生长因子水平明显提高(P<0.01);与高糖CXCL-8组相比,高糖Shh抑制剂组上述结果指标呈反向变化(P<0.01);(2)体内实验结果:与Shh抑制剂-CM组和间充质干细胞-CM组相比,CXCL-8-CM组糖尿病皮肤溃疡的愈合效果和绿色荧光蛋白标记的人脐静脉血管内皮细胞数均显著升高(P<0.01);(3)结果提示,在高糖环境下,CXCL-8能够通过Shh通路,刺激间充质干细胞旁分泌血管内皮细胞生长因子、表皮生长因子,提高了对脐静脉血管内皮细胞招募的能力。

锌对疼痛后学习记忆障碍小鼠海马神经元P53蛋白表达的影响

目的探讨锌对第5腰椎(L5)脊神经结扎横切所致神经病理性疼痛(NPP)模型的学习记忆功能障碍及海马组织中P53表达的影响。方法成年小鼠(C57/BL6)48只,随机分为3组(n=16),对照组(con),NPP组及高锌NPP组(Zn-NPP)。对照组仅暴露L5脊神经不结扎,NPP组施行L5脊神经左侧结扎横切(L L5-SNT)手术,Zn-NPP组施行左侧L5-SNT手术后饮用硫酸锌水溶液。3组术后第29天进行Morris水迷宫实验测量小鼠空间学习记忆能力,水迷宫实验结束后,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,采用免疫组织化学及免疫印迹法检测各组P53表达。结果 Morris水迷宫实验中,NPP组(21.03±12.08)m/s,Zn-NPP组(16.97±8.59)m/s及con组(8.74±3.61)m/s,隐藏平台潜伏期逐渐缩短(P<0.05),并穿过平台所在象限的时间及路径占总游泳时间和总路径的比例逐渐增加(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,con组(1.88%),Zn-NPP(16.12%)及NPP组(33.17%)凋亡率逐渐增多(P<0.05)。免疫组织化学结果显示,con组,Zn-NPP组及NPP组的P53阳性表达吸光度值在CA1区分别为27.42±7.08、37.52±10.58及53.31±9.26;CA3区分别为29.51±8.31、36.21±7.91及56.71±8.09。免疫印迹结果显示,con组,Zn-NPP组及NPP组的P53表达吸光度值分别为0.12±1.01、0.37±1.13和0.86±1.22,吸光度值逐渐增多(P<0.05)。结论锌可改善NPP后小鼠学习记忆能力。

Olig对少突胶质细胞介导脱髓鞘大鼠髓鞘再生的影响

目的探讨Olig在少突胶质细胞介导的脱髓鞘大鼠髓鞘再生中的作用。方法 40只健康Wistar大鼠,随机分成正常组、模型对照组、模型组、实验组,用形态学观察和免疫组织化学检测Olig1和Olig2的表达。结果正常组Olig1位于少突胶质细胞的胞质,模型组胞核表达明显增多,实验组Oligl又重新转移至胞质;正常组Olig2表达位于胞核,模型组中有少量表达于胞质。结论在Olig1和Olig2同时缺失时,导致全脑不能形成少突胶质细胞,严重影响髓鞘的再生。

鞘内注射M_ERK2-shRNA腺病毒对糖尿病神经痛小鼠的影响

目的探讨细胞外调节蛋白激酶2 (ERK2)在糖尿病神经病理性疼痛(DNP)小鼠模型中的作用机制。方法40只小鼠随机分4组:对照组,DNP组,siERK2-DNP组(鞘内注射M_ERK2-shRNA腺病毒),siRNA-DNP组(鞘内注射siRNA腺病毒)。模型制作成功后检测痛阈值;模型制作前、模型制作后2周、 4周及6周检测机械痛阈值;6周后取脊髓组织,利用Western blotting及免疫组织化学法检测脊髓后角ERK2及核因子κB (NFκB)的表达。结果与对照组比较,DNP组和siRNA-DNP组痛阈值显著降低, ERK2、NFκB的表达显著上调(P<0.05),siERK2-DNP组与对照组比较,痛阈值无显著变化, ERK2、NFκB的表达无显著差别(P>0.05)。结论下调ERK2可能是治疗糖尿病神经病理性疼痛的脊髓后角神经元损伤的方法之一。

上调锌指和含BTB域20表达对APPswe/PSE9转基因阿尔茨海默病小鼠学习记忆能力的影响

目的探讨上调锌指和含BTB域20(A20)表达对APPswe/PSE9转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠学习记忆影响及其对海马神经元凋亡的抑制作用。方法将APPswe/PSE9转基因小鼠40只分为4组,分别为对照组、AD组、干扰小RNA(siRNA)-AD组和A20-AD组。选择携带高表达A20的腺病毒为干扰药物,采用Morris水迷宫实验观察小鼠空间学习记忆能力,采用Westren blottong技术检测A20的表达,采用免疫组织化学法观察各种小鼠海马CA1区P53表达情况。结果与AD组比较,A20-AD组小鼠学习记忆功能有所改善,海马CA1区神经元凋亡率显著降低,海马CA1区P53表达显著降低。结论上调A20表达能提升APPswe/PSE9转基因小鼠学习记忆能力,可使APPswe/PSE9转基因小鼠海马CA1区P53表达降低。