Ezrin蛋白在幽门螺杆菌感染的结节性胃炎中的研究进展

ERM蛋白家族(包括ezrin、radixin、moesin)在细胞形态、迁移和信号转导中发挥着至关重要的作用。Ezrin是ERM蛋白家族的成员之一,是幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)感染宿主所致细胞毒性的重要介质,通过ezrin磷酸化可以调节其与肌动蛋白细胞骨架的相互作用,进而对细胞形态产生显著影响。本文综述了ezrin蛋白在H.pylori感染引发的结节性胃炎中的重要性,探讨了ezrin蛋白的结构及其功能、信号通路及磷酸化与结节性胃炎的关系,为以ezrin蛋白作为潜在的治疗靶点对结节性胃炎的防治提供新思路。

放射治疗对宫颈癌DNA甲基转移酶表达的影响

目的:研究放射治疗对宫颈癌(cervical cancer,CIN)组织中DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DNMT)1、3A和3B表达的影响,探讨其在放射治疗耐受中的作用。方法:选用12例宫颈癌患者放射治疗前、中、后三个时期的组织,应用qPCR检测宫颈癌组织在放射治疗前期、中期和后期的DNMT1、DNMT3A和DNMT3B mRNA的表达变化。结果:宫颈癌放射治疗前、中、后三个时期DNMT1对β-actin mRNA的相对表达量分别是(0.1229±0.0217)、(0.5696±0.0217)和(0.1620±0.0352);放射治疗期间和放射治疗之前宫颈癌组织中DNMT1 mRNA的表达差异有统计学意义(P<0.05),放射治疗期间和放射治疗之后宫颈癌组织中DNMT1 mRNA的表达差异有统计学意义(P<0.05),放射治疗之前和放射治疗之后宫颈癌组织中DNMT1 mRNA的表达差异有统计学意义(P<0.05);DNMT3A对β-actin mRNA的相对表达量分别是(0.0012±0.0001)、(0.0021±0.0001)和(0.0014±0.0001),放射治疗期间和放射治疗之前宫颈癌组织中DNMT3A mRNA的表达差异有统计学意义(P<0.05),放射治疗期间和放射治疗之后宫颈癌组织中DNMT3A mRNA的表达差异有统计学意义(P<0.05),放射治疗之前和放射治疗之后宫颈癌组织中DNMT3A mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05);DNMT3B对β-actin mRNA的相对表达量分别是(0.6627±0.0348)、(0.8104±0.0845)和(0.2391±0.0470),放射治疗期间和放射治疗之前宫颈癌组织中DNMT3B mRNA的表达差异有统计学意义(P<0.05),放射治疗期间和放射治疗之后宫颈癌组织中DNMT3B mRNA的表达差异有统计学意义(P<0.05),放射治疗之前和放射治疗之后宫颈癌组织中DNMT3B mRNA的表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论:放射治疗使宫颈癌组织中DNMT1,DNMT3A和DNMT3B表达发生变化,其可能在放射耐受中起到了作用。

大鼠硬脑膜对颅骨成骨增强的影响

背景:硬脑膜与颅骨在结构和功能上联系密切,原代提取硬脑膜和颅骨细胞并将二者共培养的研究几乎没有,利用原代细胞探究硬脑膜对颅骨的影响具有创新性,有望为临床治疗提供理论依据。目的:原代提取大鼠硬脑膜和颅骨细胞,观察硬脑膜对颅骨增殖和分化能力的影响,初步了解Twist1在其中的作用。方法:利用酶解法与组织块法相结合的方法原代提取出生3 d内大鼠硬脑膜细胞和颅骨细胞,免疫荧光染色鉴定所提取细胞,茜素红染色鉴定与评估颅骨细胞及其矿化能力,real-time PCR检测硬脑膜细胞与颅骨细胞共培养后,颅骨细胞增殖与成骨相关基因表达及Twist1的表达。结果与结论:①形态学:所提取硬脑膜细胞形态特征与成纤维细胞一致,成骨细胞呈纺锤形。②细胞鉴定:免疫荧光染色显示,所提取硬脑膜细胞表达高水平的波形蛋白,颅骨细胞表达高水平的碱性磷酸酶;成骨诱导28 d颅骨细胞茜素红染色观察到明显的矿化结节。③real-time PCR检测显示,与对照组比较,共培养组PCNA、碱性磷酸酶、RUNX2 mRNA表达升高(P<0.01);Twist1 mRNA表达降低(P<0.01)。④结果表明,原代提取的颅骨细胞具有较强的矿化能力,硬脑膜是促进颅骨的生长发育与成骨分化的重要因素,且Twist1在该过程中发挥重要作用。

5-Aza-CdR通过Notch1通路对小鼠海马神经发生的影响

目的研究5-Aza-CdR对Notch1通路影响及神经再生的影响,并通过小鼠主动回避行为实验来探讨5-Aza-CdR对小鼠学习记忆能力的影响。方法将60只6~8周龄SPF级ICR雄性小鼠分为两组,通过侧脑室注射(i.c.v)给一组小鼠注射5-Aza-CdR,另一组注射BSA作为对照组。注射后24 h通过Real-time PCR和Western blot检测Notch1和HES1的mRNA和蛋白表达水平;通过激光共聚焦显微镜观察5-溴-2’-脱氧尿苷(BrdU)阳性细胞和海马DG中Notch1的表达;用MS-PCR检测Notch1甲基化变化;通过穿梭回避实验来评估小鼠的学习和记忆行为。结果注射5-Aza-CdR使海马Notch1通路活性增加并促进DG区神经细胞再生,降低Notch1启动子区甲基化水平,小鼠主动回避行为能力得到提升。结论5-Aza-CdR对小鼠主动回避行为的影响可能与Notch1通路影响海马神经再生有关。

幼龄大鼠颅骨缺损后硬脑膜相关促成骨基因的表达情况

目的:通过建立大鼠幼鼠颅骨缺损模型(2mm、5mm),探讨硬脑膜在颅骨缺损中促进骨修复的作用,并观察不同大小颅骨缺损中硬脑膜促成骨基因表达差异,为在临床治疗小儿颅骨缺损中补充理论基础。方法:选取60只10日龄SD大鼠随机分为3组,在顶骨中心制造颅骨缺损,分别是2mm缺损组、5mm缺损组、未缺损对照组(其中2mm缺损组、5mm缺损组为实验组),每组20只。对照组暴露颅骨后不做处理。将每组大鼠随机分为两部分,分别在术后1周、术后6周取材。采用Western-blot、RT-qPCR检测不同时期颅骨缺损处硬脑膜中骨形态蛋白2(Bmp2)、Runt相关转录因子2(Runx2)、成纤维细胞生长因子受体2(FGFR2)的蛋白表达情况及mRNA表达情况。结果:(1)术后1周时,实验组Bmp2、Runx2、FGFR2表达量均高于未缺损对照组,其中2mm颅骨缺损组的Bmp2、Runx2蛋白表达量显著高于5mm缺损组,FGFR2蛋白表达量低于5mm缺损组(P<0.05)。术后6周时,实验组中Bmp2和Runx2蛋白表达量均高于未缺损对照组,其中5mm缺损组Bmp2、Runx2表达量高于2mm缺损组(P<0.05);术后6周时,2mm缺损组的FGFR2蛋白表达量与对照组无明显差异(P>0.05),但5mm缺损组的FGFR2蛋白表达量高于未缺损对照组和2mm缺损组(P<0.05)。(2)Runx2、Bmp2、FGFR2 mRNA表达水平情况:表达趋势同Western blot结果表达趋势相似。结论:(1)颅骨缺损后,未成熟硬脑膜促成骨因子表达增加;(2)硬脑膜中不同促成骨因子在不同大小的颅骨缺损中表达量存在差异。

骨形态发生蛋白2在小儿颅骨缺损自行修复中的作用

颅脑外伤在小儿各类外伤中占据首位。去骨瓣减压术为神经外科常见减少颅内压的手术方式,颅骨缺失会导致患儿脑组织缺少颅骨保护,颅骨作为脑组织最直接的保护屏障,若缺损不及时修补会因体位、情绪和腹压等会导致脑组织在颅内发生移动,从而造成脑穿通性畸形、癫痫发作和脑变性萎缩等疾病。小儿有好动、依从性差、自我保护能力差等特点,更容易形成二次伤害。小儿处于生长发育期,缺乏颅骨的保护,颅脑容易受到二次伤害,还会影响患儿神经系统的正常发育,造成患儿智力低下,神经系统发育不完善等相关并发症,所以重建颅骨的完整对患儿的生长发育至关重要。未成熟硬脑膜对颅骨的发育和缺损修复有重要作用,2岁以下的儿童能够修复巨大的颅骨缺损,而成年人则缺乏这种内源性能力。幼龄动物骨缺损中骨形态发生蛋白2(BMP2)上调,表明BMP2在骨组织再生中具有重要作用。许多生物调节因子可调控BMP2的活性。该综述就BMP2在小儿颅骨缺损修复中的研究现状做总结。

长链非编码核糖核酸肺腺癌转移相关转录本1和核旁斑组装转录本1在低氧预适应小鼠海马神经保护中的作用研究

目的探索长链非编码核糖核酸(lncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)和核旁斑组装转录本1(NEAT1)在低氧预适应(HPC)小鼠海马细胞中的表达及其与神经保护的关系。方法(1)将36只雄性美国癌症研究所(ICR)小鼠按照随机数字表法完全随机分为3组:对照组、低氧组和低氧预处理组,每组12只。对照组小鼠不进行低氧暴露,低氧组小鼠低氧暴露1次,低氧预处理组小鼠低氧暴露4次。低氧处理结束后立即将所有小鼠脱颈椎处死并分离海马组织分组保存。(2)将HT22细胞培养于含10%胎牛血清和100 U/ml青霉素-链霉素的培养基,细胞汇合率大于90%时将其转移至24孔板中培养后分2批进行处理。通过转染试剂将6 pmol的乱序小干扰核糖核酸(siRNA)、MALAT1 siRNA(siMALAT1)、siNEAT1、siMALAT1+siNEAT1分别一一对应转染至第一批HT22细胞的阴性对照组、siMALAT1组、siNEAT1组、siMALAT1+siNEAT1组细胞中,空白组不做任何处理;然后在正常条件下(5%CO_(2)和95%空气)培养48 h;第二批HT22细胞中,利用转染试剂分别将6 pmol的乱序siRNA、乱序siRNA、siMALAT1、siMALAT1、siNEAT1、siNEAT1分别一一对应转染至阴性对照组、阴性对照+氧糖剥夺-再灌注(OGD/R)组、siMALAT1组、siMALAT1+OGD/R组、siNEAT1组、siNEAT1+OGD/R组的HT22细胞中,转染后48 h将阴性对照组、siMALAT1组、siNEAT1组HT22细胞在正常条件下(5%CO_(2)和95%空气)继续培养,将阴性对照+OGD/R组、siMALAT1+OGD/R组、siNEAT1+OGD/R组细胞进行OGD/R处理,即低氧条件下(1%O_(2)+5%CO_(2)+94%N_(2))暴露8 h,之后再进行正常条件下培养16 h。(3)通过实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)及蛋白免疫印迹法测定各组小鼠海马组织中MALAT1、NEAT1、N-甲基-D-天冬氨酸受体亚基2B(NR2B)信使核糖核酸(mRNA)、NR2B蛋白水平的相对表达量和各组HT22细胞转染处理后NR2B mRNA、NR2B蛋白水平的相对表达量及各组HT22细胞转染和OGD/R后的血影蛋白分解产物、活化半胱氨酸蛋白酶蛋白3的相对表达量,并计算各组HT22细胞存活率。结果(1)3组小鼠海马中MALAT1(F=43.92)、NEAT1(F=506.40)、NR2B mRNA(F=50.64)及NR2B蛋白(F=41.24)的相对表达量差异均有统计学意义(均P<0.05)。与对照组相比,低氧组MALAT1[(1.68±0.06)比(1.00±0.08)]、NR2B mRNA[(1.26±0.06)比(1.00±0.01)]及NR2B蛋白[(1.47±0.05)比(1.00±0.01)]的相对表达量均增加(均P<0.05),而NEAT1[(1.02±0.10)比(1.00±0.03)]的相对表达量组间差异无统计学意义(P>0.05),低氧预处理组中MALAT1[(1.12±0.13)比(1.00±0.08)]和NEAT1[(2.88±0.10)比(1.00±0.03)]的相对表达量增加;与低氧组比较,低氧预处理组NR2B mRNA[(0.54±0.07)比(1.26±0.06)]及NR2B蛋白[(1.17±0.07)比(1.47±0.05)]的相对表达量均降低(均P<0.05)。(2)5组HT22细胞转染后NR2B mRNA(F=36.92)及NR2B蛋白(F=56.98)的相对表达量差异均有统计学意义(均P<0.05)。与阴性对照组相比,siMALAT1组[NR2B mRNA:(2.04±0.08)比(0.94±0.04),NR2B蛋白:(1.72±0.13)比(0.93±0.02)]、siNEAT1组[NR2B mRNA:(2.15±0.13)比(0.94±0.04),NR2B蛋白:(1.87±0.46)比(0.93±0.02)]、siMALAT1+siNEAT1组[NR2B mRNA:(2.09±0.16)比(0.94±0.04),NR2B蛋白:(2.07±0.30)比(0.93±0.02)]的NR2B mRNA及NR2B蛋白的相对表达量均增加(均P<0.05)。(3)6组HT22细胞转染及OGD/R处理后血影蛋白分解产物(145/150 kDa蛋白;F=12.43)、血影蛋白分解产物(120 kDa蛋白;F=7.15)、活化的半胱氨酸蛋白酶蛋白3蛋白(F=6.61)的相对表达量差异均有统计学意义(均P<0.05)。与siMALAT1组比较,siMALAT1+OGD/R组的145/150 kDa[(1.42±0.48)比(0.85±0.34)]、120 kDa[(1.33±0.37)比(0.52±0.19)]的血影蛋白分解产物及活化的半胱氨酸蛋白酶蛋白3蛋白[(2.43±0.35)比(1.15±0.24)]相对表达量均增加(均P<0.05);与阴性对照+OGD/R组比较,siMALAT1+OGD/R组的145/150 kDa[(1.42±0.48)比(1.23±0.17)]、120 kDa[(1.33±0.37)比(0.80±0.21)]的血影蛋白分解产物及活化的半胱氨酸蛋白酶蛋白3蛋白[(2.43±0.35)比(1.46±0.39)]相对表达量均增加(均P<0.05);与siNEAT1组比较,siNEAT1+OGD/R组的145/150 kDa[(1.28±0.44)比(0.87±0.32)]、120 kDa[(0.81±0.36)比(0.63±0.16)]的血影蛋白分解产物及活化的半胱氨酸蛋白酶蛋白3蛋白[(1.51±0.45)比(1.01±0.27)]相对表达量均增加(均P<0.05)。(4)6组HT22细胞存活率差异有统计学意义(F=5.54,P<0.05)。与阴性对照组比较,siMALAT1组、siNEAT1组、siMALAT1+OGD/R组及siNEAT1+OGD/R组HT22细胞存活率均降低[(0.65±0.40)、(0.76±0.35)、(0.24±0.17)、(0.23±0.16)比(0.84±0.04),均P<0.05];与siMALAT1组比较,siMALAT1+OGD/R组细胞存活率降低[(0.24±0.17)比(0.65±0.40),P<0.05];与siNEAT1组比较,siNEAT1+OGD/R组细胞存活率降低[(0.23±0.16)比(0.76±0.35),P<0.05]。结论HPC增加了小鼠海马组织中MALAT1和NEAT1的表达,MALAT1和NEAT1可能通过影响NR2B的表达参与小鼠缺血缺氧后的神经保护作用。

再灌注治疗对急性心肌梗死患者血浆外泌体微小RNA差异表达的影响

目的观察冠状动脉再灌注治疗对急性心肌梗死(AMI)患者血浆外泌体微小RNA(miRNA,miR)差异表达的影响。方法选取2022年10月至11月于深圳市龙岗区第三人民医院确诊的3例老年男性AMI患者,进行冠状动脉再灌注治疗,留取患者入院时、术后2 h和术后24 h静脉血,应用miRNA测序技术筛选3例患者血浆外泌体中共同差异表达miRNA后,对其靶基因进行生信分析,利用定量聚合酶链反应验证其中差异表达的miR-499a-5p。结果与入院时比较,术后2 h血浆外泌体miRNA有418个上调和406个下调,术后24 h血浆外泌体miRNA有320个上调和225个下调(P<0.05);与术后2 h比较,术后24 h血浆外泌体miRNA有344个上调和350个下调(P<0.05)。Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes富集分析显示,差异表达的miRNA富集在磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B、缺氧诱导因子1和血管平滑肌收缩等通路。Gene Ontology富集分析显示,差异表达的miRNA靶基因分子功能方面主要富集于蛋白结合和DNA结合;细胞组分方面主要富集于细胞膜和细胞质;生物学过程方面主要富集于信号转导和DNA模板转录。术后2 h miR-499a-5p水平显著低于入院时[(0.577±0.020)vs(1.000±0.023),P<0.05],术后24 h miR-499a-5p水平显著低于术后2 h[(0.068±0.006)vs(0.577±0.020),P<0.05]。结论血浆外泌体miRNA可作为早期诊断老年AMI患者和预测冠状动脉再灌注治疗效果的生物标志物。

非编码RNA在缺血预适应神经保护中的研究进展

非编码RNA(non-coding RNA,ncRNAs)是一类低编码潜能但可以调节基因功能的RNA,其在生物体生长、发育、衰老过程中发挥功能,是基因表达的重要调节方式。缺血预适应(ischemia preconditioning,IPC)是指组织或器官预先接受短暂、重复的亚致死性缺血刺激后激活细胞内源性保护机制,从而明显提高器官甚至机体对后续致死性缺血/低氧损伤的耐受性。近年来研究发现ncRNAs可能在IPC介导的神经保护中发挥作用。综上,本文总结ncRNAs在IPC神经保护中作用的研究进展。

DNA甲基转移酶在结直肠癌发生发展中的作用研究

目的 探讨DNA甲基转移酶在结直肠癌发生发展过程中发挥的作用。方法 选取2021年9月至2022年6月包头医学院第二附属医院结直肠癌患者的结直肠癌组织及癌旁组织。通过Real-time PCR和Western Blot对癌组织及癌旁组织中DNMT1、DNMT3A及DNMT3B的m RNA和蛋白水平表达进行检测。结果 与癌旁组织相比,DNMT1、DNMT3A、DNMT3B在结直肠癌中m RNA表达水平及蛋白表达水平均显著上升,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 DNA甲基转移酶的过表达促进了结直肠癌发生发展。

丙酮酸钠对小鼠海马神经HT22细胞神经保护作用

目的研究丙酮酸钠(sodium pyruvate,SP)在低氧条件下对小鼠海马神经细胞HT22的神经保护作用。方法在低氧条件下,用MTS检测不同浓度SP孵育HT22细胞的活性变化;从形态学上,采用铁染色观察SP对HT22细胞的影响;应用溶酶体染色检测SP对HT22细胞的溶酶体变化;采用Western blot检测Bcl-2、Bax和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白的表达。结果5 mmol·L^(-1)的SP能提高HT22细胞活力以及减少HT22细胞损伤;SP提高Bcl-2的表达,降低Bax的表达,使LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增加。结论在低氧的条件下给予SP可能通过减少HT22细胞凋亡,激活自噬发挥神经保护作用,从而降低低氧损伤。

FAK-PI3K/AKT信号通路在新生大鼠颅盖骨生长发育过程中作用机制的研究

目的通过对不同时期的SD大鼠颅盖骨进行检测,探究大鼠颅盖骨的生长特点。方法选取同窝1、4、7、10、12周SD大鼠颅盖骨(每周3只),使用Real-time PCR和Western blot技术检测颅盖骨中局部粘着斑激酶(FAK)-磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路的表达情况,并通过相关性分析FAK-PI3K/AKT在颅盖骨生长发育过程中的作用情况。结果大鼠脑容积的增长与颅盖骨厚度的变化是同步增长;FAK的表达变化与大鼠各经线的变化呈正相关;FAK的表达变化与PI3K/AKT的表达变化呈正相关。结论FAK的表达变化与大鼠头颅的生长发育规律具有相关性,FAK通过激活PI3K/AKT信号通路在颅盖骨中发挥作用,FAK可能作为颅骨快速生长发育期的标志物,为临床上的颅骨缺损修复治疗中时机的选择提供基础理论依据。

幼羊硬脑膜mRNA表达差异及影响颅缝处细胞迁移的信号通路探究

目的探讨颅缝处硬脑膜相较于普通颅骨下硬脑膜的差异表达基因,以及骨缝处硬脑膜对于细胞迁移作用的机制,为临床颅骨缝早闭合补充理论基础。方法选取6只51日龄小尾寒羊,分别取其颅缝与非颅缝下方的硬脑膜,利用二代测序检测发育期小尾寒羊的不同部位硬脑膜细胞中mRNA表达差异,进行生物信息分析,并通过RT-PCR对测序结果中mRNA表达情况进行验证。结果通过对颅缝处硬脑膜与颅骨下方硬脑膜共有的差异表达上调基因生物信息分析发现,关于骨缝处硬脑膜相对于颅骨下方硬脑膜上调的研究主要集中于细胞迁移、血管束形成以及细胞外基质产生等方面,富集程度最高的细胞通路为PI3K-AKT细胞信号通路。相关基因验证发现,PI3K-AKT细胞信号通路表达量在颅缝处下方硬脑膜较普通颅骨下方硬脑膜升高,有统计学意义(P<0.05)。结论颅骨骨缝处硬脑膜相对于颅骨下方硬脑膜PI3K-AKT细胞信号通路表达量显著升高,可能与该通路所具有的增殖与迁移功能有关。

外泌体微RNA在缺血性卒中神经损伤及保护中的作用

外泌体是细胞经过一系列调控形成并可分泌到细胞外的膜性囊泡,其可以携带核酸、脂质和蛋白质进行细胞间的物质传递和信息交流。研究显示,外泌体微RNA(miRNAs)可参与脑正常的生理过程,也参与损伤修复等病理过程。缺血性卒中是世界范围内的严重致残、致死性疾病,卒中神经损伤或神经保护进程中涉及到众多分子变化,而外泌体中的miRNAs可能参与这些变化,成为缺血性卒中神经损伤或保护的生物标志物和潜在的治疗靶点。本研究通过对外泌体miRNAs在缺血性卒中神经损伤及保护中作用的综述,为缺血性卒中的诊断和潜在治疗提供新的方向。

Hif-1α和VEGF-C在结节性胃炎中的表达水平

目的探索Hif-1α和VEGF-C在结节性胃炎中的表达水平,及Hif-1α和VEGF-C通路在结节性胃炎发病机制中的作用。方法收集2021年8月至2022年8月于包头医学院第二附属医院内镜室行内镜检查的患者,由内镜下诊断、H.pylori呼气试验筛选出H.pylori(+)结节性胃炎患者及其对照组H.pylori(-)慢性非萎缩性胃炎、H.pylori(+)慢性非萎缩性胃炎患者,每组15例,共45例。采用qRT-PCR测定胃黏膜组织中Hif-1α和VEGF-C的表达变化,并分析其与结节性胃炎的关系。结果qRT-PCR显示Hif-1α相对表达量在结节性胃炎患者中升高,但差异无统计学意义(P>0.05);VEGF-C相对表达量在结节性胃炎患者中升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Hif-1α/VEGF-C通路可能不参与H.pylori(+)结节性胃炎的发病机制。

DNA甲基化在肺癌诊治中的研究进展

越来越多的研究表明,表观遗传学修饰在肿瘤的发生发展中占据着重要地位,DNA甲基化作为表观遗传学中的一种常见的表现形式,维持着细胞的正常功能、遗传印迹以及胚胎发育过程。甲基化状态的改变是引起肿瘤发生发展的重要因素,异常的DNA甲基化在肿瘤的发生发展中扮演了重要角色。肺癌是严重威胁人类生命健康的恶性肿瘤之一,随着分子生物学技术的进步,越来越多的研究发现肺癌的发生发展和DNA的异常甲基化密切相关。因此DNA甲基化是肺部肿瘤诊断和预后评估的潜在靶标。本文就DNA甲基化在肺癌诊断与治疗中的作用进行综述。

MC3T3-E1细胞成骨模型的应用及研究进展

骨形成与骨重建涉及各种细胞的协同作用。通过各种体外培养模型,在了解成骨过程的生物学方面取得了显著进展。当前,骨组织工程研究火热,但由于原代人成骨细胞十分有限,这些细胞模型越来越多地被应用。MC3T3-E1细胞是前骨细胞,该细胞在研究骨骼疾病和骨缺损的细胞治疗及组织工程方面具有较大潜力。本文全面回顾了MC3T3-E1细胞成骨模型的培养、鉴定及应用等方面内容。此外,还进一步讨论了该模型的优缺点并提出了几点展望。

MC3T3-E1细胞成骨模型的建立及局部黏着斑激酶表达的研究

目的:通过化学诱导手段建立MC3T3-E1细胞成骨模型,探讨局部黏着斑激酶(FAK)基因表达与成骨细胞形成的关系,了解FAK对成骨分化的影响。方法:观察MC3T3-E1细胞成骨诱导前后细胞形态,茜素红化学染色检测矿化情况,实时荧光定量PCR检测成骨标志物Runx2、ALP的表达,同时分析FAK在成骨过程中的表达情况。结果:MC3T3-E1细胞成骨诱导3 d后细胞呈长梭形或多角形;第21、28 d时,茜素红染色可见矿化结节;成骨标志物Runx2、ALP的表达呈持续升高的趋势,FAK的表达总体呈升高趋势,在第7 d时略有下降。结论:FAK的表达与成骨相关基因的表达趋势基本一致,提示FAK可能在MC3T3-E1细胞成骨过程中发挥一定作用。

MALAT1在低氧预适应小鼠神经保护作用中的研究

目的:研究低氧预适应通过改变MALAT1的表达从而对低氧损伤产生保护作用的相关分子机制。方法:将90只6~8周18~22 g雄性ICR小鼠随机分为3组,不做处理为C(Control)组,低氧处理为H(hypoxic)组,低氧预适应处理为HPC(hypoxic preconditioning)组,30只/组;通过qPCR检测小鼠海马脑区MALAT1在mRNA水平的表达变化;在HT22细胞中通过siRNA敲低MALAT1,再对HT22细胞进行H/R(hypoxia/reoxygenation)损伤,通过qPCR检测在HT22细胞中敲低MALAT1后MALAT1的mRNA水平的表达变化,再通过Western blot和活细胞工作站检测在HT22细胞中敲低MALAT1再进行H/R损伤后Cleaved caspase-3的表达变化和细胞的死亡率。结果:与C组比较,H组MALAT1表达升高(P<0.05),与H组比较HPC组的MALAT1表达有所恢复(P<0.05);与NC组比较,siMALAT1组MALAT1的mRNA表达水平下降(P<0.05)。与siMALAT1组和H/R组相比,siMALAT1+H/R组的Cleaved caspase-3的表达水平升高(P<0.05)。与H/R组比较,siMALAT1+H/R组的细胞死亡率升高(P<0.05)。结论:低氧预适应可通过改变MALAT1的表达降低低氧损伤的细胞凋亡,从而起到神经保护的作用。

NR2B亚基磷酸化在缺血/低氧神经保护中的作用

N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体在神经系统功能中起着关键作用。NR2B亚基是NMDA受体的调节亚单位,在低氧/缺血神经保护中有重要作用。NR2B磷酸化是调节NMDA受体功能的重要机制,通过磷酸化的变化在缺血/低氧神经保护中发挥重要作用。本文综述了NMDA受体NR2B亚基的结构、功能、磷酸化、信号通路与缺血/低氧神经保护的关系,为以NR2B亚基为靶点进行低氧/缺血脑疾病的防治工作提供思路。