猪瘟病毒福建野毒分离株FJ-1E2基因序列分析

应用RT-PCR技术对福建省某一猪场采集的疑似猪瘟样品进行猪瘟病毒E2基因扩增,并对其核苷酸序列进行分析。结果表明,猪瘟野毒与标准参考毒株及国内分离株的同源性为81%～98.1%;遗传进化树分析表明流行野毒与中国C株存在很大差异;预测的抗原表位表明该野毒株与中国C株相比发生了抗原漂移,该差异是否预示福建流行株正在向远离疫苗株的方向变异尚待进一步的研究。

日粮维生素E水平对肉鸡生长性能和免疫器官发育的影响

为了探讨日粮维生素E水平对肉鸡生长性能和免疫器官发育的影响,试验选取1日龄体重相近的健康AA肉鸡母鸡160羽,随机分为5组,每组4个重复,每个重复8羽。分别在玉米-豆粕型基础日粮中添加0、25、50、75和100 mg/kg维生素E,试验期为42 d。结果表明,日粮添加维生素E具有提高肉鸡生长性能的趋势,其中日粮添加50 mg/kg维生素E使22~42 d和0~42 d肉鸡平均日增重分别提高了4.23%和2.90%（P〉0.05）;添加75 mg/kg维生素E使22~42 d和0~42 d肉鸡平均日采食量分别降低了6.75%和6.92%（P〉0.05）,使0~21 d和0~42 d肉鸡料肉比分别降低了7.78%和7.04%（P〉0.05）;日粮添加维生素E对3周龄肉鸡免疫器官重和免疫器官指数无显著影响;添加25和100 mg/kg维生素E提高了6周龄肉鸡胸腺重（P〈0.05）和胸腺指数（P〉0.05）。肉鸡日粮中添加维生素E具有提高肉鸡生长性能趋势,可改善肉鸡胸腺发育水平。

焦米汤结合口服补液对初生仔猪细菌性腹泻的治疗效果

探讨了焦米汤结合口服补液对初生仔猪细菌性腹泻的治疗效果。结果表明,初次灌药后6 h,焦米汤结合口服补液组、焦米汤联合庆大霉素结合口服补液组的显效率、总有效率均显著高于庆大霉素结合口服补液组,无效率则显著低于庆大霉素结合口服补液组。初次灌药后12、18 h,焦米汤结合口服补液组及焦米汤联合庆大霉素结合口服补液组显效率、总有效率均显著高于庆大霉素结合口服补液组,无效率、复发率则显著低于庆大霉素结合口服补液组。初次灌药24 h后,焦米汤结合口服补液组与焦米汤联合庆大霉素结合口服补液组的显效率显著高于庆大霉素结合口服补液组,总有效率、无效率、复发率与庆大霉素结合口服补液组差异不显著。焦米汤结合口服补液对初生仔猪细菌性腹泻的治疗效果好。

《家畜行为学》课程教学改革与探索

根据《家畜行为学》课程特点,结合自身教学实践,从教学内容、教学方法和考试方式等方面进行改革,探讨《家畜行为学》课程教学改革的方式和方法,从而提高课堂教学质量和教学效果,培养学生的综合创新能力。

转manA基因小鼠F_1代表达效果的检测分析

将携带β-甘露聚糖酶基因manA的转基因FVB原代小鼠与野生型FVB小鼠进行繁殖得到F1代,通过PCR和Southern blot鉴定出F1代转基因小鼠。提取转基因小鼠腮腺、舌下腺、下颌下腺、心脏、肝脏等组织的总RNA,通过RT-PCR检测出manA在转基因小鼠的腮腺和舌下腺组织特异性表达。进行定量PCR验证出manA基因在302号家系小鼠的舌下腺中表达量最高,证明β-甘露聚糖酶基因manA在转基因小鼠的腮腺和舌下腺特异性表达成功。对转基因小鼠唾液进行收集测定β-甘露聚糖酶活性,在302号家系中检测到酶活性较高。通过代谢试验测定饲料中粗蛋白、粗纤维和粗脂肪的消化率,结果显示,与非转基因小鼠相比,302号家系转基因小鼠对饲料中粗蛋白、粗纤维的表观消化率无明显差异,而粗脂肪的消化率得到显著提高;304号家系转基因小鼠对饲料中粗蛋白、粗脂肪、粗纤维消化率方面均无明显差异。

调节猪Smad3表达的miRNA鉴定

生物信息学预测猪Smad3为miR-23a的靶基因,为了研究猪Smad3与miR-23a之间的调节关系,人工合成miR-23a双链序列及Smad3基因3′UTR中mR-23a的结合位点序列,分别与带荧光的慢病毒质粒pshRNAcopGFPLentivector及萤光素酶质粒pPGL3-control连接,构建重组质粒LV-shRNA-miR-23a和pPGL3-controlSmad3-3′UTR。将两重组质粒共转CHO细胞,以慢病毒空质粒与pPGL3-control-Smad3-3′UTR共转作为对照,48h后收集细胞裂解液检测荧光素酶活性变化,提取细胞总RNA实时荧光定量检测荧光素酶基因mRNA表达变化。结果显示,试验成功构建了重组质粒LV-shRNA-miR-23a和pPGL3-control-Smad3-3′UTR。miR-23a能够显著抑制荧光素酶基因mRNA表达(P<0.05),并能通过抑制Smad3结合位点序列抑制其上游荧光素酶的活性(P<0.05)。初步证明,猪Smad3与miR-23a有直接的靶向关系。

基于胞内劳森菌16S rDNA基因的TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用

参考GenBank发表的胞内劳森菌（Lawsonia intracellularis,L.intracellularis）基因组16SrDNA序列,设计1对特异性引物和1条TaqMan探针,以L.intracellularis疫苗核酸为模板,建立L.intracellularis TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。对该检测法制作了标准曲线,并进行了特异性、敏感性和重复性试验,并将其应用于猪增生性肠炎诊断。结果表明,所建立的TaqMan实时荧光定量方法特异性强,仅对含有L.intracellularis扩增出S型荧光曲线,而对大肠杆菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌、副猪嗜血杆菌等均无扩增;该方法在1.2×10^2-1.2×10^8 copies/μL有良好的线性关系,相关系数为0.972;最低检测浓度为10copies/μL,重复性良好。对79份临床样品检测表明,该方法灵敏度高于普通PCR方法,可用于猪增生性肠炎的临床诊断。