福建省龙岩市411例肺结核患者对利福平和异烟肼耐药状况的研究

目的回顾性分析福建省龙岩市411例肺结核患者对利福平和异烟肼的耐药状况,为当地结核病防治工作提供科学依据。方法收集2016年5月12日至2019年8月17日福建省龙岩市第二医院门诊及收住入院并确诊为肺结核的411例患者,其中初治患者312例,复治患者99例。作者对两组患者411株结核分枝杆菌临床分离株采用基因芯片技术进行利福平与异烟肼耐药性及其相关耐药基因突变位点的检测。采用Excel 2003和SPSS 20.0软件进行数据的整理和统计学分析,计数资料的比较采用χ^2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果411例肺结核患者中,初治患者利福平和异烟肼任一位点突变率[9.3%(29/312)]明显低于复治任一位点突变率[54.5%(54/99)](χ^2=95.483,P<0.05);初治患者同时耐利福平和异烟肼的耐药率(简称“耐两药率”)[2.9%(9/312)]明显低于复治耐两药率[33.3%(33/99)](χ^2=75.944,P<0.05)。利福平和异烟肼任一位点突变率为20.2%(83/411),其中利福平耐药基因ropB的突变率为5.4%(22/411),20例为单一位点突变,2例为双位点突变,以531(C→T)突变频率最高[40.9%(9/22)];异烟肼耐药基因katG和inhA的突变率为4.6%(19/411),其中13例为katG基因突变,6例为inhA基因突变,以315(G→C)突变频率最高[63.2%(12/19)];耐两药率为10.2%(42/411),其中40例为双位点突变,1例为三位点突变,1例是四位点突变,以531(C→T)315(G→C)突变频率最高[47.6%(20/42)]。结论龙岩市肺结核耐药患者以耐两药为主,复治患者耐两药的情况较初治患者严重,防治形势严峻。

福建省龙岩市333份分枝杆菌菌种鉴定结果回顾性分析

目的了解龙岩市分枝杆菌感染的阳性率及分枝杆菌菌种分布情况,为龙岩市结核病及非结核分枝杆菌病的防治及流行病学研究提供科学依据。方法采用DNA微阵列芯片法检测来该院就诊的756例疑似结核病患者的标本,并进行临床上常见的17种分枝杆菌的检测,计算分枝杆菌感染的阳性率及分枝杆菌菌种的分布特点。结果756份标本中分枝杆菌阳性333份(44.05%),其中结核分枝杆菌复合群阳性290份(87.09%),非结核分枝杆菌阳性43份(12.91%),非结核分枝杆菌种群分布达10种,以胞内分枝杆菌(25.58%)、鸟分枝杆菌(20.93%)、龟或脓肿分枝杆菌(18.60%)菌种为主,有7种非结核分枝杆菌未被检出。结论龙岩市分枝杆菌菌种分布广泛,分枝杆菌感染以结核分枝杆菌为主,非结核分枝杆菌感染以胞内分枝杆菌、鸟分枝杆菌、龟或脓肿分枝杆菌为主。分枝杆菌菌种鉴定对结核病及非结核分枝杆菌病的诊断及治疗有较好的指导意义。

血清乙型肝炎病毒表面抗原水平与血清乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸载量在不同阶段乙型肝炎病毒感染肝衰竭患者中的表达

目的分析血清乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)水平与血清乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)载量在不同阶段乙型肝炎病毒(HBV)感染肝衰竭患者中的表达意义。方法回顾性选取龙岩市第二医院于2020年9月至2021年9月收治的64例HBV感染肝衰竭患者作为研究对象,按照病情阶段分为慢性肝衰竭(CLF)组35例和慢加急性肝衰竭(ACLF)组29例,两组均通过电化学发光法和荧光定量法(Q-PCR)检测血清中HBsAg和HBV-DNA水平,并比较两组的因子表达情况。结果ACLF组中的HBsAg与HBV-DNA水平以及CD4+、CD8+均高于CLF组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论临床可通过分析患者血清中的HBsAg与HBV-DNA水平的表达情况,掌握不同病程阶段HBV感染患者的病情进展情况,为病症的预防和干预治疗提供参考依据。

交叉引物恒温扩增技术快速检测结核分枝杆菌复合群和非结核分枝杆菌系统的建立

目的:建立一种快速检测结核分枝杆菌复合群(MTBC)和非结核分枝杆菌(NTM)的分子交叉引物恒温扩增技术(CPA)检测系统。方法:针对分枝杆菌高度保守的16S rRNA基因序列设计6套CPA引物和3个探针。以含16S rRNA基因序列质粒(浓度为1000拷贝/μl)为阳性模板,筛选确立最佳引物探针组合,并对建立的最佳反应体系进行敏感度、特异度和包容性分析。收集福建省龙岩市第二医院2022年2月8日至2023年3月14日具有肺结核症状或体征的125例疑似肺结核患者的标本,采用分枝杆菌核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)和建立的CPA法对收集到的标本进行检测,并对两种方法间的检测结果一致性进行统计分析,采用Kappa值评估。Kappa值≥0.75,说明一致性好。结果:筛选出MTBC/NTM-16S-6引物和MTBC/NTM-16S-LR-FAM-3为分枝杆菌检测系统最佳引物探针组合,检测体系最低检测限为100拷贝/μl,检测时间为40 min,能检出MTBC和临床常见NTM,且与常见呼吸道细菌无交叉反应。与实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测方法相比,阳性预测值为95.65%(66/69),阴性预测值为85.71%(48/56),符合率为91.20%(114/125),Kappa值为0.82。结论:成功建立了一种基于CPA技术的快速检测MTBC和NTM的检测系统,能够为基层医院结核病疫情防控提供一种新的检测方法。

RASSF1A基因甲基化和SCC联合检测在非小细胞肺癌转移监测中的应用

目的探讨Ras相关结构域蛋白家族1A(ras association domain family 1A,RASSF1A)基因甲基化和鳞状上皮细胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCC)联合检测对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者术后转移评价的价值。方法选择2014年1月至2015年6月在龙岩市第二医院就诊的57例NSCLC患者,测定患者术前血浆RASSF1A基因甲基化、血清SCC水平,同时检测患者术后肿瘤组织RASSF1A基因甲基化水平。出院后随访12个月,根据随访结果分为转移组和非转移组,分析两组血浆及组织RASSF1A基因甲基化阳性率、术前血清SCC水平与术后转移的关系。结果发生转移的患者术前血清SCC水平、术后组织和术前血浆RASSF1A甲基化阳性率均高于未发生转移的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。根据肿瘤组织RASSF1A基因甲基化、术前血清SCC水平对NSCLC患者术后转移判定的ROC曲线,NSCLC患者肿瘤组织RASSF1A基因甲基化、术前血清SCC水平符合预测NSCLC术后转移的条件。将SCC水平4.05 ng/m L、RASSF1A甲基化阳性作为危险分层界值,绘制Kaplan-Meier生存曲线显示,高危组与低危组两组术后转移比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 NSCLC患者肿瘤组织RASSF1A基因甲基化、术前血清SCC水平越高,发生术后转移的风险越高,检测NSCLC患者肿瘤组织RASSF1A基因甲基化、术前血清SCC水平对NSCLC患者危险分层及术后转移评估具有一定的临床价值。

574例珠蛋白生成障碍性贫血阳性患者基因突变类型的回顾性分析

目的了解福建龙岩地区珠蛋白生成障碍性贫血(简称地贫)基因型及构成比。方法收集2014年7月至2016年12月来该院进行地贫基因检测的患者1115例,采用跨越断裂点聚合酶链反应(Gap-PCR)法检测—^(SEA)、-α^(3.7)和-α^(4.2)3种常见的缺失型α地贫基因,聚合酶链反应结合反向点杂交(PCR-RDB)法检测WS、QS和CS 3种非缺失型α地贫基因及17种常见的β地贫基因。结果 1115例患者中有574例确诊为地贫,阳性率为51.48%。其中α地贫362例,占63.07%,12种基因型;β地贫201例,占35.02%,11种基因型;αβ复合型地贫11例,占1.91%,7种基因型。α地贫以—^(SEA)/αα为主(73.76%);β地贫以β^(654)/β为主(47.26%);αβ复合型地贫以—α^(3.7)/αα与β^(654)/β复合型最为常见(27.28%)。结论了解福建龙岩地区地贫基因型及分布可以为该地区地贫的遗传咨询和制订地贫预防措施提供科学依据。

家族血栓与抗凝血酶Ⅲ rs2227589突变研究

目的对1 例家族性血栓患者及其家系成员进行AT 基因突变检测。方法采用发色底物法检测先证者及其家系成员血浆AT 活性,采用PCR 法对先证者及其家系成员AT 基因的7 个外显子及其侧翼内含子序列进行扩增,PCR 产物纯化后直接测序检测基因突变。结果全基因组测序显示,包括先证者在内共计8 位个体存在SERPINC1rs2227589 位点基因突变。其中,除先证者以外,确诊的反复VTE 成员(Ⅱ-1、Ⅲ-1)均是SERPINC1 rs2227589 位点突变携带者。结论考虑SERPINC1 rs2227589 位点是该家族血栓高发的易感因素。

福建省闽西地区乙肝病毒基因分型与临床指标的相关性分析

目的探讨福建省闽西地区乙肝病毒基因分型与临床指标的相关性。方法挑选2019年2月—2020年2月于本院就诊的300例HBV感染者的血清标本数据资料进行整合分析,数据分析结果归入本次研究数据库。统计整合研究区组与HBV基因型检测的关联性数据进行数据分析。结果福建省闽西地区300例感染者基因分布是:B型151(50.33%)例,C型87(29.00%)例,非B非C型62(20.67%)例。福建省闽西地区C型与B型HBV-DNA定量检测结果差异有统计学意义t=2.517,P<0.012。C型HBV-DNA定量检测均值高于B型。C型乙型肝炎表面抗原定量值高于B型肝炎,χ^(2)=6.014,P<0.014。福建省闽西地区C型患者乙型肝炎E抗原定量测定值高于B型感染者,t=157.052,P<0.001。C型肝炎E抗原阳性率高于B型肝炎,χ^(2)=23.985,P<0.001。结论乙型肝炎病毒的分子流行病学特征,确定传播关系,具有重要意义。