腺病毒携带EGFP基因经完整圆窗膜转导豚鼠耳蜗的实验研究

目的研究腺病毒携带目的基因经完整圆窗膜途径耳蜗转导的可行性及安全性,为内耳基因治疗提供实验基础和理论依据。方法20只白色红目豚鼠,术前及术后分别行听性脑干反应(ABR)检查。实验组(12只)以重组腺病毒携带的增强型绿色荧光蛋白基因(enhanced green fluorescent protein,EGFP),对照组(8只)以人工外淋巴液注入豚鼠圆窗龛内。分别于术后5天、14天取双侧耳蜗标本做基底膜铺片,耳蜗冰冻切片观察。结果于圆窗龛内注入腺病毒携带目的基因的转导方法对听力无明显影响。转染耳蜗及对侧耳蜗内目的基因呈广泛表达。5天组表达产物最高,14天组逐渐降低。对照组耳蜗未见EPFP表达。结论于圆窗龛内注入腺病毒携带目的基因转导的方法对耳蜗无明显毒害作用,且能够将目的基因成功转导至双侧耳蜗组织并广泛表达。

新型雌激素受体ERα36在张氏肝细胞和人肝癌细胞中的表达比较分析

研究新型雌激素受体ERα36在人肝细胞和肝癌细胞系中的差异表达具有重要的意义.以张氏肝(Chang Liv-er)、Caveolin-1基因沉默细胞株CAV7、人肝癌细胞系SMMC-7721和HepG2为实验材料,通过免疫印迹杂交法观察了不同细胞内ERα36蛋白的表达情况,并与典型雌激素受体亚型ERα66蛋白的表达进行了比较.结果发现:(1)几种细胞中均有ERα36蛋白的表达;(2)与张氏肝细胞相比,Caveolin-1基因沉默时ERα36表达明显增加(P<0.01);(3)ERα36在SMMC-7721中表达水平较低,而在HepG2细胞中表达水平较高,与ERα66和Caveolin-1的表达水平相关.提示新型雌激素受体ERα36可能参与Caveolin-1介导的雌激素信号转导,而在肝细胞的恶性增殖过程中发挥一定的作用.

Math1基因内耳导入后噪声性聋豚鼠听功能改变观察

目的观察Math1基因内耳导入对噪声性聋豚鼠听功能的影响,探讨Math1基因过表达对噪声损伤耳蜗的生物学效应,为内耳基因治疗提供实验基础和理论依据。方法经脉冲噪声致聋的豚鼠45只(各频率ABR阈值均≥95dB SPL),雌雄不限,实验开始时体重250～300g。随机分为3组:Ad-Math1-EGFP组(30只);Ad-EGFP组(5只);空白组(10只)。各组豚鼠在基因转导后4周、8周分别测试双耳ABR。测试完毕后处死动物,观察听泡及耳蜗无炎性病变者记录听阈结果。结果Math1导入后4周,导入耳各频率ABR阈值低于对照耳(右耳),也低于Ad-EGFP组及空白组,平均达到85dB SPL。Math1导入后8周,导入耳各频率ABR阈值低于对照耳(右耳),也低于Ad-EGFP组及空白组,与4周时比较,进一步好转,平均达到75dB SPL。结论Math1基因内耳导入可使噪声导致全聋的豚鼠听功能部分恢复,为噪声性聋的治疗打开了新的思路和手段。

中国绝经前女性群体中钙敏受体基因内多态性位点A986S与骨密度和骨大小的关联研究(英文)

目的在中国绝经前女性群体中研究钙敏受体基因内多态性位点986Ala/Ser(A986S)与骨密度和骨大小的关联.方法样本为来自上海市区的285例20.0～41.9岁绝经前汉族女性.用双能X射线骨密度仪测量腰椎和髋部骨密度和骨大小.用限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)分析钙敏受体基因外显子7内的多态性位点986Ala/Ser(A986S)的多态性.有酶切位点基因片段表示为A,无酶切位点表示为S,基因型为AA、AS、SS.结果在中国女性群体中,AS基因型个体很少而缺少SS基因型个体.AA和AS基因型个体间骨密度和骨大小不存在显著性差异.结论钙受体在钙的代谢中有显著的作用,该基因与骨表型间的关系需要进一步利用有意义的遗传标记来进行研究.

4株AmpC启动子和衰减子突变大肠埃希菌的分析研究

目的 研究启动子和衰减子突变与大肠埃希菌高产AmpC酶的关系。 方法 用琼脂稀释法、双纸片法、三相试验、等电聚焦电泳 (IEF)和聚合酶链反应 (PCR)检测其耐药机制 ,并对其AmpC的启动子和衰减子直接进行基因序列分析。衰减子的发夹状二级结构用DNASIS软件分析。结果 琼脂稀释法、双纸片法、三相试验、IEF和PCR证明这 4株菌都产染色体AmpC酶 ,基因序列分析提示它们在启动子和衰减子上都有不同程度的突变 ,同时还观察到其中一株菌的衰减子的G C发夹状二级结构由于突变导致△G 7.6kcal/mol的变化。

绍兴市74位≥100岁老年人听功能调查分析

目的：对绍兴市74位≥100岁老年人听力功能调查，展示和探讨这一群体的听觉流行病学和功能评估。方法自2011年12月至2012年6月普查绍兴市户籍满100周岁老人，入选符合老年性耳聋和无听力损失者行全面体检和听功能检查评估，共68人。评估包括纯音听阈、中耳声导抗和畸变产物耳声发射检测。结果纯音测听显示所有百岁老人均有不同程度的听力损失。〉90%在〈2000Hz的频率上呈现出中-重度听力损失（41-80分贝），在4000-8000Hz的中高频率上有极重度听力损失（≥81分贝）。耳声发射的检查被用于检测内耳中主要负责声音感知的毛细胞群的整体功能状态，在大部分≥100岁老人中未能检测出耳声发射信号。结论此调查揭示了≥100岁老人群体的听功能存在着广泛和明显的下降，有不同程度听力损失，需早期制定相关干预措施。

骨质疏松症的遗传学研究及其基因定位的方法和现状

低创伤性骨折是老年人特别是老年妇女中一个主要的公众健康问题[1-4 ].骨质疏松症是一种具有脆性骨且易发生低创伤性骨折的疾病.在美国,由骨质疏松症引发的骨折每年超过130万例[5],超过40%的绝经后妇女平均至少要遭受一次骨质疏松性骨折[1,4].仅在美国每年由骨质疏松症引起的直接花费估计约为140亿美元[5].骨质量(Bone mass)是一个可测定骨折危险的主要因子[6-8 ].世界卫生组织(WHO)将骨质疏松症在数量上定义为[9]:骨密度或骨质含量值低于年轻成年人平均值2.5个标准差.骨质量是由多个遗传因素和环境因素共同决定的复杂性状[10-12],并且很大程度上受遗传因素决定,其遗传率大于50%[11-17 ].进行骨遗传学研究对于全面地了解引起骨质量变化的主要决定因素是很重要的.

模糊圆:关于简单闭合曲线的理论研究(英文)

介绍和讨论了一个新概念模糊圆．如果一个二维平面上的简单闭合曲线趋近于一个圆，就可以求出它的模糊圆．一个模糊圆由一条简单闭合曲线和该曲线的圆度函数共同给出．对于一条给定的简单闭合曲线，可以求出它的一个模糊圆序列，并证明该序列收敛于一个圆的关键是求一条特定曲线的圆度函数．

c-Maf基因在小鼠耳蜗内外毛细胞中的表达及意义

目的研究c-Maf基因在小鼠耳蜗内、外毛细胞中的表达、分布特点及意义。方法 1)根据形态上的差异分离收集成年小鼠内、外毛细胞,利用Microarray基因芯片技术分别检测内、外毛细胞c-Maf基因RNA水平的表达;2)全耳蜗基底膜铺片,免疫组织化学染色后激光共聚焦显微镜观察c-Maf蛋白在不同发育阶段小鼠耳蜗内、外毛细胞中的分布特点及表达,并使用软件Image Pro Plus进行c-Maf蛋白定量分析。结果 1)耳蜗内、外毛细胞c-Maf基因RNA水平相近;2)c-Maf蛋白主要表达于成年小鼠的耳蜗内外毛细胞胞质,在内毛细胞的核下区表达强于核上区,且在内、外毛细胞的表达强度相近;3)c-Maf蛋白在小鼠出生后0天、7天、12天及成年小鼠耳蜗内、外毛细胞稳定表达。结论 c-Maf蛋白从出生开始在小鼠耳蜗内、外毛细胞上稳定表达,且在成年小鼠内毛细胞的核下区表达较强,表明其可能在毛细胞生长发育以及功能维持中发挥重要的作用。

高产头孢菌素酶大肠杆菌临床株的AmpC启动子突变

目的 研究高产AmpC头孢菌素酶的大肠埃希菌的基因突变。方法 报道 6株高产AmpC头孢菌素酶的大肠埃希菌。对其中具有不同头孢西丁MIC的 4株菌进行了基因序列分析。结果 在启动子 32位置上 ,有 3株菌 (大肠埃希菌 6 82 ,12 2 ,999)的T→A ;菌株 2 38在 14和 13之间插入G和T两个碱基。在菌株 6 82 ,12 2 ,2 38的衰减子上有 4～ 5个碱基发生突变 ,尤其在 +2 2位置上的C→T ,+32和 +37位置上的G→A。

补钙结果可能不宜泛化

Bolland等研究表明，给健康的绝经后妇女补钙，血管事件的危险性有所增加，特别是心肌梗死事件。我们最近完成了一项类似研究，采用主要的骨骼终点。我们根据自己的资料对Bolland等报道的主要的不良事件提出质疑。