转基因鼠晶状体特异性表达的制瘤素对眼发育的影响

目的 研究晶状体特异性表达的制瘤素 (oncostatin M ,OSM)对眼发育的影响。 方法 将去除部分序列的小鼠 OSM c DNA [6 6 1碱基对 (base pair,bp) ]连接到αA-晶状体蛋白 (αA- crystallin)启动子上 ,然后用显微注射的方法将其导入单细胞胚胎内 ,建立转基因鼠。常规组织学及免疫组织化学方法对转基因鼠进行特性鉴定 ,末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿嘧啶末端标记 (terminal deoxynucleotidyltransferase- mediated d UTP nick- end labelling,TUNEL )试验检测细胞凋亡 ,原位杂交检测 caspase- 3m RNA的表达 ,兔抗活化的 caspase- 3抗体检测活化的 caspase- 3蛋白质。 结果 胚胎期 14 .5、17.5 d,转基因蛋白 OSM特异性表达于晶状体纤维细胞内 ,从胚胎期 17.5 d开始 ,转基因鼠视网膜开始发生变性 ,出生时 ,5 0 %以上的视网膜细胞丢失。TUNEL试验显示转基因鼠视网膜细胞凋亡。转基因鼠视网膜细胞中caspase- 3被激活。 结论 晶状体特异性的 OSM表达激活 caspase- 3,导致了眼的异常发育、细胞凋亡及广泛的视网膜变性。