烧伤小鼠IFIT1表达的初步观察

目的 观察烧伤小鼠干扰素诱导表达蛋白IFIT1的表达变化，初步探究其表达变化的原因。方法 实验小鼠致TBSA 15％Ⅱ度烧伤，1d及7d后处死，取肝、肺及脾组织。脂多糖掺入小鼠腹腔巨噬细胞株RAW264．7的培养基中，至终浓度0．1～1．0μg/ml，作用6h。提取组织及细胞RNA，进行半定量逆转录-聚合酶链式反应，提取组织及细胞裂解上清，进行免疫印迹检测。结果 小鼠肝、肺、脾组织IFIT1的转录在烧伤后1d升高，伤后7d恢复至伤前水平；肝、肺、脾IFIT1的蛋白水平在伤后1d一致升高，伤后7d仍能检出升高。体外实验，细菌脂多糖显著激活RAW264．7细胞的IFIT1转录及蛋白表达。结论 烧伤小鼠伤后早期IFIT1表达迅速升高，此变化与同期的内毒素血症引起的细胞应激有关。

干扰素诱导蛋白IFIT1的克隆与原核可溶性表达

目的研究干扰素诱导蛋白IFIT1的原核可溶性表达。方法通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)获得IFIT1编码序列,克隆入原核表达载体,电穿孔转化大肠杆菌,筛选阳性克隆,诱导细菌表达,蛋白凝胶电泳观察。结果构建的原核表达平台实现了较丰富的麦芽糖结合蛋白融合IFIT1(MBP-IFIT1)可溶性表达。结论 MBP-IFIT1的原核可溶性表达为后续IFIT1蛋白结合分析及免疫分析提供了材料及方法学基础。