两种基因重组免疫毒素导向治疗乳腺癌的细胞毒活性研究

目的:探讨HELβ1-PE33、HELβ1-PE38KDEL两种基因重组免疫毒素对乳腺癌细胞的细胞毒活性。方法:构建亚克隆质粒pHELβ1-PE33;诱导生成、纯化HELβ1-PE33蛋白,并用凝胶电泳法检测其与HELβ1-PE38KDEL蛋白纯度;采用MTT法、软琼脂集落形成法检测这两种蛋白对乳腺癌细胞增殖的影响,比较两种蛋白在不同的乳腺癌细胞系中的细胞毒活性。结果:纯化后的两种蛋白均有导向作用,其纯度均超过98%。在免疫毒素敏感乳腺癌细胞内,MTT实验表明HELβ1-PE38KDEL对DY36T2、MDA-MB-453、47T1LZ1、BT474M1、SKBR3的IC50分别为(0.25±0.02)ng/ml、(0.35±0.05)ng/ml、(0.02±0.02)ng/ml、(0.02±0.02)ng/ml、(20.3±0.01)ng/ml,而HELβ1-PE33的IC50分别为(5.90±0.05)ng/ml、(3.91±0.11)ng/ml、(0.09±0.02)ng/ml、(0.06±0.05)ng/ml、(125.00±0.12)ng/ml、(10.80±0.01)ng/ml,两者的细胞毒活性在统计学上有显著意义(P<0.01);软琼脂集落形成实验表明HELβ1-PE38KDEL对MDA-MB-453、BT474M1的IC50分别为(0.05±0.01)、(0.005±0.000)ng/ml,而HELβ1-PE33对上述两种细胞的IC50则为(5.00±0.02)ng/ml和(0.05±0.01)ng/ml,二者的细胞毒活性在统计学上有显著意义(P<0.01)。HELβ1-PE33和HELβ1-PE38KDEL对乳癌细胞抑制作用的时间效?

免疫毒素与顺铂协同杀伤肿瘤细胞机制的探讨

背景与目的:免疫毒素HELβ-PE38KDEL(HeregulinEGFlikedomainβ1-PsedomonasAeurginosa38KDEL,本文简称ITH)已经被证实是一种具有特异性杀伤erbB2、3、4阳性乳腺癌细胞的新的生物学制剂,然而它与化疗药物的联合作用效果目前尚未有报道。本文探讨ITH与化疗药物顺铂(DDP)的协同抗肿瘤作用。方法:采用AnnexinV结合实验和Westernblot检测乳腺癌细胞MDA-MB-453、2LMP和胃癌细胞N87分别在ITH和DDP单独及联合用药前后的细胞凋亡变化。结果:在高表达erbB-2、3、4的MDA-MB-453和N87中,联合用药组和单药组相比,凋亡细胞成倍增加(P<0.01);而在低表达erbB-2、3、4的2LMP,联合用药组和单药组相比,凋亡细胞无明显增加(P>0.05)。MDA-MB-453和N87细胞在联合用药组中PARP、caspase-3降解增加,bcl-2、mp53过度表达受抑制;而2LMP细胞中PARP、caspase-3降解无增加,bcl-2、mp53过度表达未受抑制。结论:ITH和DDP联合后可促进高表达erbB-2、3、4的乳腺癌细胞凋亡,这可能是两者协同作用的机制之一。

基因重组毒素HELβ1-PE38KDEL与顺铂杀伤乳腺癌细胞系的协同作用

目的 :研究HELβ1 PE38KDEL与常规化疗药物顺铂杀伤乳腺癌细胞系的协同作用。 方法 :采用细胞增殖、软琼脂集落形成等实验 ,测定HELβ1 PE38KDEL和顺铂对高表达erbB2、3、4的乳腺癌细胞MDA MB 4 5 3,胃癌细胞N87的协同作用 ,并以低表达erbB2、3、4的乳腺癌细胞 2LMP为对照。结果 :HELβ1 PE38KDEL和顺铂联用对MDA MB 4 5 3和N87具有协同杀伤作用 (CI <1)。对 2LMP无协同作用 (CI >1)。结论 :对高表达erbB 2、3、4的乳腺癌细胞 ,基因重组毒素HELβ1 PE38KDEL与顺铂联用具有协同杀伤作用。