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Stability of M13 Phage in Organic Solvents
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作者 Pouya Moghimian Vesna Srot +2 位作者 Benoit P. Pichon Sandra J. Facey Peter A. van Aken 《Journal of Biomaterials and Nanobiotechnology》 2016年第2期72-77,共6页
The effect of different types of organic solvents on the structural integrity of M13 phages has been directly visualized by transmission and scanning electron microscopy. The exposure of M13 phages to apolar hexane ha... The effect of different types of organic solvents on the structural integrity of M13 phages has been directly visualized by transmission and scanning electron microscopy. The exposure of M13 phages to apolar hexane had no effect on the structure of the phages for up to 8 h. In contrast, phages showed ~10-fold contraction into rod-like I-forms and to flattened spheroids with ~12 nm diameter upon exposure to polar organic solvents. We show that this finding can be beneficial for the macromolecular self-assembly and in broader aspects, to enhance the spatial arrangement of desired inorganic nanoparticles in the rapidly developing field of virotronics. 展开更多
关键词 M13 Phage Organic Solvent Structural Integrity SELF-ASSEMBLY Electron Microscopy
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催化吲哚生成靛蓝的细胞色素P450BM-3定向进化研究 被引量:14
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作者 李红梅 梅乐和 +1 位作者 URLACHER VLADA SCHMID ROLF D 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第7期630-635,共6页
以催化吲哚产生的靛蓝在630nm处具有特殊的吸收峰为高通量筛选指标,将来源于Bacillusmegaterium的细胞色素P450BM-3单加氧酶的基因序列用易错聚合酶链式反应进行定向进化,通过多轮突变,在原有的能产靛蓝的高活力突变酶的基础上成功获得... 以催化吲哚产生的靛蓝在630nm处具有特殊的吸收峰为高通量筛选指标,将来源于Bacillusmegaterium的细胞色素P450BM-3单加氧酶的基因序列用易错聚合酶链式反应进行定向进化,通过多轮突变,在原有的能产靛蓝的高活力突变酶的基础上成功获得了三个高于亲本酶的突变酶,突变酶的酶活分别是亲本酶的6.6倍(hml001),9.6倍(hml002)和5.3倍(hml003),并对突变酶的动力学参数进行了分析.突变酶DNA测序的结果表明,hml001含有一个有义氨基酸置换I39V,hml002含有三个有义氨基酸置换D168N,A225V,K440N,hml003含有一个有义氨基酸置换E435D,这些突变位点有些远离底物结合部位,有些位于底物结合部位. 展开更多
关键词 细胞色素P450BM-3 定向进化 靛蓝 易错聚合酶链式反应 催化活性
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定向进化细胞色素P450BM-3的研究 被引量:1
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作者 李红梅 yh +2 位作者 梅乐和 Vlada Urlacher Rolf D.Schmid 《生物加工过程》 CAS CSCD 2006年第1期27-29,34,共4页
以来自于巨大芽孢杆菌的细胞色素P450BM-3为研究对象,采用随机突变和饱和定点突变定向进化技术对P450BM-3进行改造,通过突变体催化靛蓝显色的特性采用活性琼脂平板分析和96微孔板相结合的高通量筛选成功获得了几个具有更高催化性能的突... 以来自于巨大芽孢杆菌的细胞色素P450BM-3为研究对象,采用随机突变和饱和定点突变定向进化技术对P450BM-3进行改造,通过突变体催化靛蓝显色的特性采用活性琼脂平板分析和96微孔板相结合的高通量筛选成功获得了几个具有更高催化性能的突变体。 展开更多
关键词 定向进化 细胞色素P450BM-3 靛蓝
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饱和突变定向进化细胞色素P450 BM-3
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作者 李红梅 梅乐和 +1 位作者 URLACHER V B SCHMID R D 《浙江大学学报(工学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1214-1218,共5页
为了进一步获得具有更高活力的细胞色素P450 BM-3(F87V/A74G/L188Q)突变酶,利用饱和突变技术对该突变酶的4个氨基酸位点D168、A225、K434、E435分别进行单一的随机突变,通过对其羟基化吲哚生成靛蓝的催化性能表征,发现P450 BM-3氨基酸... 为了进一步获得具有更高活力的细胞色素P450 BM-3(F87V/A74G/L188Q)突变酶,利用饱和突变技术对该突变酶的4个氨基酸位点D168、A225、K434、E435分别进行单一的随机突变,通过对其羟基化吲哚生成靛蓝的催化性能表征,发现P450 BM-3氨基酸残基的168、434和435位均位于蛋白功能区域,而225位则位于非功能区域,同时发现突变酶D168H具有更高的结合辅酶NADPH的能力,其消耗NADPH的能力几乎是亲本酶的8倍,但生成靛蓝的能力却只是亲本酶的3倍,说明该位点极有可能承担了将电子从黄素单核苷酸(FMN)氧化还原酶区域传递到亚铁血红素区域的任务,在P450 BM-3结构与功能的关系中扮演着重要的角色. 展开更多
关键词 细胞色素P450 BM-3 饱和突变 羟基化吲哚 靛蓝
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