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DNA重组酶Cre介导载体间基因的重组转移
被引量:
3
1
作者
王文棋
盖颖
+2 位作者
陆海
李义
蒋湘宁
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2007年第11期1210-1215,共6页
DNA重组酶Cre可以识别LoxP位点,使含有LoxP位点的DNA分子发生重组:2个同向LoxP之间的DNA片段被删除,2个环状DNA分子被整合为一个大分子.基于Cre酶的这些作用特性,构建了一套载体间基因的重组转移体系,在Cre酶的作用下,gfp基因被从基因供...
DNA重组酶Cre可以识别LoxP位点,使含有LoxP位点的DNA分子发生重组:2个同向LoxP之间的DNA片段被删除,2个环状DNA分子被整合为一个大分子.基于Cre酶的这些作用特性,构建了一套载体间基因的重组转移体系,在Cre酶的作用下,gfp基因被从基因供体pTLG上切除下来,然后转移到基因受体pET-LoxP上,从而快速、简便地完成了gfp基因高效表达载体pET-gfp的构建.gfp基因在大肠杆菌BL21(DE3)中被诱导表达,使菌落产生了可视的绿色荧光.通过对荧光菌落的计数分析,比较了环状基因供体pTLG和线性基因供体pTLG对有效重组率的影响.使繁琐的传统载体构建变为简单的酶促反应,极大地简化了载体构建步骤,为Cre酶在基因克隆和亚克隆中的应用提供了很好的研究基础.
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关键词
DNA重组酶Cre
基因供体pTLG
基因受体pET-LoxP
GFP基因
绿色荧光菌落
下载PDF
职称材料
题名
DNA重组酶Cre介导载体间基因的重组转移
被引量:
3
1
作者
王文棋
盖颖
陆海
李义
蒋湘宁
机构
北京林业大学生命科学与生物技术学院
laboratory of transgene
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2007年第11期1210-1215,共6页
基金
国家自然科学基金项目(30271066
30571512)
+1 种基金
国家重点基础研究发展计划(973)资助项目(TG1999016005)
"948"项目(2006-4-C01-03)资助.~~
文摘
DNA重组酶Cre可以识别LoxP位点,使含有LoxP位点的DNA分子发生重组:2个同向LoxP之间的DNA片段被删除,2个环状DNA分子被整合为一个大分子.基于Cre酶的这些作用特性,构建了一套载体间基因的重组转移体系,在Cre酶的作用下,gfp基因被从基因供体pTLG上切除下来,然后转移到基因受体pET-LoxP上,从而快速、简便地完成了gfp基因高效表达载体pET-gfp的构建.gfp基因在大肠杆菌BL21(DE3)中被诱导表达,使菌落产生了可视的绿色荧光.通过对荧光菌落的计数分析,比较了环状基因供体pTLG和线性基因供体pTLG对有效重组率的影响.使繁琐的传统载体构建变为简单的酶促反应,极大地简化了载体构建步骤,为Cre酶在基因克隆和亚克隆中的应用提供了很好的研究基础.
关键词
DNA重组酶Cre
基因供体pTLG
基因受体pET-LoxP
GFP基因
绿色荧光菌落
Keywords
DNA recombinase Cre, gene-donor vector pTLG, gene-receiving vector pET-LoxP, gfp gene, green fluorescence colonies
分类号
Q783.2 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
DNA重组酶Cre介导载体间基因的重组转移
王文棋
盖颖
陆海
李义
蒋湘宁
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2007
3
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