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HLA-A2型人外周血MAGE-A10特异性T细胞的体外激发及功能检测
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作者 史泓浏 Petra Baumgaertner 陈忠平 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2008年第21期1647-1650,1673,共5页
目的:探讨体外激发HLA-A2型人外周血单个核细胞(PBMC)中的MAG-E-A10(254-262)特异性T淋巴细胞及其功能检测方法。方法:分别采用肽段MAGE-A-10(254-262)直接刺激PBMC的Bulk Culture法和自体DC负载肽段MAGE-A10(254-262)刺激CD3+CD8+法,均... 目的:探讨体外激发HLA-A2型人外周血单个核细胞(PBMC)中的MAG-E-A10(254-262)特异性T淋巴细胞及其功能检测方法。方法:分别采用肽段MAGE-A-10(254-262)直接刺激PBMC的Bulk Culture法和自体DC负载肽段MAGE-A10(254-262)刺激CD3+CD8+法,均经3次刺激进行体外扩增tetramer-MAGE-A10(254-262)阳性T细胞。以人流感病毒肽段flu-matrix(58-66)为阳性对照。Intracellular staining法检测其针对MAGE-A10(254-262)的穿孔素、颗粒酶B的分泌能力。结果:HLA-A2型PBMC用BuckCulture或DC负载肽段刺激CD3+CD8+法培养,激发的tetramer-flu阳性T细胞率均>10%,DC法激发的tetramer-flu阳性T细胞率显著高于Buck Culture,t=9.79,P<0.01。Bulk Culture法得到的阳性T细胞率分别为0.01%和0.02%,DC法则分别是0.05%和0.12%。Sorting得到的tetram-er-MAGE-A10(254-262)阳性T细胞,效靶比为10∶1时其特异性杀伤为46%,细胞针对MAGE-A10(254-262)分泌穿孔素、颗粒酶B的百分率分别为39%和87%。结论:从捐献的人血细胞中用自体DC负载肽段刺激CD3+CD8+法激发tetramer阳性T细胞的效率优于Bulk Culture法。 展开更多
关键词 抗原特异性 T细胞 MAGE-A10(254-262)四聚体 功能试验
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