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piggyBac转座子调节pPiggyBac-Rb质粒的构建
被引量:
1
1
作者
潘雪珂
陈朝
+3 位作者
田思佳
Joseph M.Kaminski
余克明
庄菁
《中国组织工程研究》
CAS
CSCD
2012年第20期3755-3758,共4页
背景:外源性Rb基因的导入是抑制视网膜母细胞瘤细胞增殖的有效途径,piggyBac转座子介导的外源基因表达载体高效安全,在基因治疗方面具有广阔的应用前景。目的:探讨piggyBac转座子介导的外源性Rb基因的转染效率及其对视网膜母细胞瘤细胞...
背景:外源性Rb基因的导入是抑制视网膜母细胞瘤细胞增殖的有效途径,piggyBac转座子介导的外源基因表达载体高效安全,在基因治疗方面具有广阔的应用前景。目的:探讨piggyBac转座子介导的外源性Rb基因的转染效率及其对视网膜母细胞瘤细胞的抑制作用。方法:采用RT-PCR技术扩增Rb基因编码区Rb cDNA,定向插入到载体pPiggyBac,获得PiggyBac调节的Rb表达质粒pPiggyBac-Rb;通过单独转染或合并pPiggyBac-helper转染人视网膜母细胞瘤细胞SO-RB50。结果与结论:考马斯亮蓝染色证明piggyBac转座子系统的转染效率最高,荧光定量PCR以及免疫荧光实验证明其介导的目的基因Rb与宿主SO-RB50细胞基因组整合效率最高且可在细胞中长期稳定表达,MTT实验证明经其所介导的外源性Rb基因表达对细胞活性影响最为显著。结果提示piggyBac转座子有可能成为视网膜母细胞瘤基因治疗的安全有效载体。
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关键词
PIGGYBAC转座子
SO-RB50细胞
转染
RB基因
基因治疗
下载PDF
职称材料
题名
piggyBac转座子调节pPiggyBac-Rb质粒的构建
被引量:
1
1
作者
潘雪珂
陈朝
田思佳
Joseph M.Kaminski
余克明
庄菁
机构
中山大学中山眼科中心
manoa biosciences
出处
《中国组织工程研究》
CAS
CSCD
2012年第20期3755-3758,共4页
基金
国家自然科学基金面上项目(30970923)~~
文摘
背景:外源性Rb基因的导入是抑制视网膜母细胞瘤细胞增殖的有效途径,piggyBac转座子介导的外源基因表达载体高效安全,在基因治疗方面具有广阔的应用前景。目的:探讨piggyBac转座子介导的外源性Rb基因的转染效率及其对视网膜母细胞瘤细胞的抑制作用。方法:采用RT-PCR技术扩增Rb基因编码区Rb cDNA,定向插入到载体pPiggyBac,获得PiggyBac调节的Rb表达质粒pPiggyBac-Rb;通过单独转染或合并pPiggyBac-helper转染人视网膜母细胞瘤细胞SO-RB50。结果与结论:考马斯亮蓝染色证明piggyBac转座子系统的转染效率最高,荧光定量PCR以及免疫荧光实验证明其介导的目的基因Rb与宿主SO-RB50细胞基因组整合效率最高且可在细胞中长期稳定表达,MTT实验证明经其所介导的外源性Rb基因表达对细胞活性影响最为显著。结果提示piggyBac转座子有可能成为视网膜母细胞瘤基因治疗的安全有效载体。
关键词
PIGGYBAC转座子
SO-RB50细胞
转染
RB基因
基因治疗
分类号
R318 [医药卫生—生物医学工程]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
piggyBac转座子调节pPiggyBac-Rb质粒的构建
潘雪珂
陈朝
田思佳
Joseph M.Kaminski
余克明
庄菁
《中国组织工程研究》
CAS
CSCD
2012
1
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