石英致MAPK／cyclinD1-CDK4信号转导通路的活化

目的 探讨石英诱导的人胚肺成纤维细胞（HELF）中丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）／细胞周期蛋白和细胞周期蛋白依赖激酶（cyclinD1-CDK4）信号转导通路的活化。方法 两种处理方式：（1）石英刺激细胞2h后，收获细胞；（2）石英长时间（2个月）作用于细胞，使细胞具有部分转化细胞的特征（S-HELF），检测信号蛋白因子和细胞周期的变化。分别采用Westernblot、免疫细胞化学和流式细胞术方法检测细胞内信号蛋白和细胞周期的改变。选用特异化学抑制剂或分子抑制剂抑制上游激酶，检测下游激酶的变化。结果 HELF暴露于石英粉尘2h后，可以导致MAPK家族中ERK1/2、p38和JNK1／2 3个亚家族的磷酸化水平升高。在SHELF中，只有细胞外调节蛋白激酶（ERK）和C4un氨基末端激酶[JNK1（p46）]较未处理的HELF磷酸化水平增高。而JNK2（p54）的磷酸化水平没有变化，p38的磷酸化水平反而下降。cyclinD1和CDK4蛋白在SHELF中较HELF中表达增多。抑制ERK和JNK活化或者抑制核转录因子活化蛋白1（AP-1）的活化后，S-HELF中cyclin D1和CDK4蛋白过表达得到控制。而抑制p38的活性不能改变cyclinD1和CDK4蛋白过表达。结论 石英刺激HELF2h后可诱导ERK、JNK和p38的活化，而SHELF中ERK、JNK活化，p38没有被活化。SHELF中，cyclinD1和CDK4蛋白质过表达与ERK、JNK和AP-1活化有关。