AB SCIEX TripleTOF 5600在蛋白质组学研究中的应用

AB SCIEX公司最新发布了全新的高分辨液相色谱质谱联用系统,TripleTOF 5600。这一新产品是在享有盛名的API5500三重四极杆系统和QSTAR Elite(QqTOF)系统这两个技术平台的基础上开发出来的。这一全新的TripleTOF 5600高分辨液相色谱质谱联用系统能够对复杂的蛋白质组学样品进行高通量分析,并能同时提供高质量的定性和定量结果。为了评估这款仪器的性能,我们设计了基于纳升液相色谱和TripleTOF 5600联用系统的一系列实验。首先,我们应用这一拥有高分辨率、高灵敏度和高质量准确度的系统对酵母细胞裂解物的胰酶消化产物进行了分析。实验中采用了每秒最多采集50幅串联质谱谱图的信息相关采集模式,单次LC-MS/MS实验就鉴定了10,179条独特肽段和1174种蛋白(at 1%global false discovery rate)。而实际达到了平均每秒34幅串联谱图的采集速度是在单次实验获得如此优异的鉴定结果的决定性因素。此外,我们也对一组含有五种已知蛋白以及部分重同位素标记肽段的样品进行了分析,以检验TripleTOF 5600的定量能力。实验中这五种蛋白质都获得了很高的序列覆盖率,其中进样量仅有100amol的Peroxiredoxin 1蛋白的序列覆盖率也高达53%。而测试中得到肽段的平均质量偏差仅为1.7 ppm,展示了TripleTOF 5600的高质量准确度和稳定性。我们还获得了高度准确的定量结果,充分证明了TripleTOF5600能够提供三重四极杆系统级别的定量结果。

AB SCIEX TripleTOF 5600在蛋白质组学研究中的应用

AB SCIEX公司最新发布全新的高分辨液相色谱质谱联用系统——TripleTOF5600是在享有盛名的API 5500三重四极杆系统和QSTAR Elite(QqTOF)系统这两个技术平台的基础上开发出来的。TripleTOF 5600高分辨液相色谱质谱联用系统能够对复杂的蛋白质组学样品进行高通量分析,并能同时提供高质量的定性和定量结果。为评估这款仪器的性能,设计基于纳升液相色谱和TripleTOF 5600联用系统的一系列实验。首先,应用这一拥有高分辨率、高灵敏度和高质量准确度的系统对酵母细胞裂解物的胰酶消化产物进行分析。实验中采用每秒最多采集50幅串联质谱谱图的信息相关采集模式,单次LC-MS/MS实验就鉴定10179条独特肽段和1174种蛋白(at 1%global false discoveryrate)。而实际达到平均每秒34幅串联谱图的采集速度是在单次实验获得如此优异的鉴定结果的决定性因素。此外,也对一组含有5种已知蛋白以及部分重同位素标记肽段的样品进行分析,以检验TripleTOF 5600的定量能力。实验中这5种蛋白质都获得很高的序列覆盖率,其中进样量仅有100amol的Peroxiredoxin 1蛋白的序列覆盖率也高达53%。而测试中得到肽段的平均质量偏差仅为1.7 ppm,展示TripleTOF 5600的高质量准确度和稳定性。此外还获得高度准确的定量结果,充分证明TripleTOF 5600能够提供三重四极杆系统级别的定量结果。

AB SCIEX黄曲霉毒素整体解决方案——全面解决黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2和M_1的检测

日前,在液体乳产品中发现黄曲霉毒素M1超标,引发公众广泛关注。ABSCIEX公司一直致力于为客户提供全方位的解决方案,在事件爆发的第一时间建立并向客户提供测定黄曲霉毒素的整体解决方案。黄曲霉毒素检测常见的方法为经免疫亲和柱净化后，采用HPLC（高效液相色谱法）、TLC（薄层层析法）、LC-MS／MS（液质联用）及ELISA（酶联免疫）法检测。

高分辨质谱对化妆品中非法添加标准外糖皮质激素的快速筛查及应用

在依据GB/T 24800.2-2009使用串联四级杆质谱仪对甲基泼尼松龙醋酸酯的测定过程中,发现与标准中甲基泼尼松龙醋酸酯同分异构的疑似糖皮质激素。在没有标准品的情况下,采用Q-TOF液质联用系统对该疑似物进行了快速筛查,基于自建谱库和Chem Spider数据库进行匹配后确证了该疑似物为强效糖皮质激素地索奈德,谱库匹配度为99.7%。

高效液相色谱-串联质谱法测定食品接触材料及制品中33种初级芳香胺的迁移量

建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定食品接触材料及制品中33种初级芳香胺的迁移量。根据食品特性以及食品与食品接触材料的接触特点,不同基质样品分别采用20%乙醇、50%乙醇和3%乙酸溶液作为食品模拟浸泡液进行迁移实验。迁移溶液以甲醇和0.05%甲酸水溶液为流动相,经五氟苯基色谱柱梯度洗脱,在电喷雾正离子模式下以动态多反应监测模式检测,外标法定量。33种初级芳香胺在20%乙醇、50%乙醇和3%乙酸(氨水调至pH 7.0)迁移溶液中的绝对基质效应分别为86.1%~97.3%、88.7%~104.0%和62.7%~81.3%,在各自线性范围内的线性关系良好(r>0.99),检出限和定量限分别为0.02~1.04μg/kg和0.07~3.26μg/kg。本方法的迁移实验针对性强、灵敏可靠,可实现食品接触材料及制品中初级芳香胺迁移量的准确测定。

超高效液相色谱-差分离子淌度质谱法测定化妆品中10种卡因类禁用组分

建立了化妆品中10种卡因类禁用组分的超高效液相色谱-差分离子淌度质谱测定方法。以正十二醇为萃取剂、四氢呋喃为分散剂在水中自组装形成超分子溶剂,并结合涡旋辅助对化妆品试样进行分散液液微萃取。考察了超分子溶剂的组成、用量及涡旋时间等参数对萃取效率的影响,以及差分离子淌度质谱对同分异构体的分离效果。结果表明,试样在4 mL正十二醇-四氢呋喃超分子溶剂中涡旋振荡3 min即可完成高效萃取,且可有效去除基质干扰,降低基质效应。差分离子淌度质谱在优化的载气、分离电压、补偿电压等条件下可将色谱难以分离的同分异构体(苯佐卡因和三卡因)实现淌度分离,解决了两种同分异构体由于色谱无法分离而不能准确定性和定量分析的问题。10种卡因类组分在各自浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99,方法检出限为0.2～8.0μg/kg,方法定量限为0.4～20.0μg/kg。在低、中、高3个添加水平下的平均回收率为70.7%～94.7%,相对标准偏差为1.2%～12.7%(n=6)。本方法步骤简便、快速高效,适用于化妆品中10种卡因类禁用组分的同时分析测定。

超高效液相色谱-四极杆-飞行时间高分辨质谱用于乳液类化妆品中9种抗过敏违禁药物的筛查和定量分析

建立了超高效液相色谱-四极杆-飞行时间高分辨质谱(UPLC-Q-TOF-HRMS)快速筛查和定量检测乳液类化妆品中9种抗过敏违禁药物的方法。乳液样品经乙腈涡旋和超声提取,采用PRiME HLB固相萃取小柱净化,以0.1%甲酸水-乙腈为流动相在XBridge C18色谱柱上进行梯度洗脱和分离,采用电喷雾电离源,在正离子模式下采用全景式数据非依赖性扫描模式(SWATH)进行数据采集,结合保留时间、母离子精确质量数、同位素峰及二级子离子碎片进行快速定性筛查,采用特征子离子碎片的峰面积进行外标法定量。实验比较了不同仪器条件和前处理条件对乳液类样品中9种抗过敏物质测定的影响,并对比了不同级别离子定量对基质效应的影响。结果表明,较其他净化柱而言,PRiME HLB固相萃取小柱具有更好的净化效果,能降低杂质对目标峰的干扰,同时保证目标物的回收;在优化的条件下,9种抗过敏药物在5~100μg/L质量浓度范围内线性良好,相关系数(r2)均大于0.99;9种目标物的定量限在0.05~0.10 mg/kg之间;在3个添加水平(0.10、0.20和0.60 mg/kg)下,其回收率在65.3%~107%之间,相对标准偏差(RSD,n=6)均小于20%;基质效应实验结果表明,采用二级子离子定量能够降低基质效应,提高定量准确度。与文献方法相比,该法操作简便,前处理耗时更短,其高精度质量数和二级指纹图谱比对技术能保证检测结果的准确度和灵敏度,可实现乳液类化妆品中抗过敏违禁药物的快速筛查和准确定量。

液相色谱-质谱/质谱法测定茶叶中灭螨醌和羟基灭螨醌残留量的分析方法

建立液相色谱-质谱/质谱法测定茶叶中灭螨醌和羟基灭螨醌的分析方法。参照《出口食品中灭螨醌和羟基灭螨醌残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法》(SN/T 4066—2014)前处理,采用正离子源模式和多反应监测模式进行检测,外标法定量。结果表明,灭螨醌和羟基灭螨醌在2~50 ng·mL^(-1)线性良好,相关系数为0.99995和1.00000,灭螨醌的定量限为4μg·kg^(-1),羟基灭螨醌的定量限为2μg·kg^(-1)。当加标质量浓度为2.5~40.0μg·kg^(-1)时,回收率为81.6%~97.4%,相对标准偏差为1.92%~2.39%(n=6)。该方法满足茶叶中灭螨醌和羟基灭螨醌残留量测定的要求。