山羊草属S基因组与小麦属B／G基因组RAPD标记和特异DNA片段克隆及研究

本研究利用132个随机引物，对山羊草属和小麦属11个种的DNA进行扩增。对其中特异RAPD扩增产物进行克隆，然后用其做探针与小麦族23个种属DNA的RAPD扩增产物进行Southern杂交。共得到24个特异克隆：其中小麦族共有特异克隆1个，山羊草属和小麦属共有特异克隆2个，S基因组特异克隆2类7个，B／G基因组特异克隆2类6个，S基因组与B／G基因组共有的特异克隆8个。24个特异克隆中有22个测定了序列，其中15个为Fasta数据库里显示未见报导的序列。用这24个特异DNA克隆制成的探针与相应的23个材料经HindⅢ酶切消化的总DNA进行Southern杂交，发现其中7个可做为基因组特异探针。通过对24个特异DNA克隆分析研究表明：①S基因组是由两个基本不同的类型构成的，即拟斯卑尔脱山羊草为一个类型，其余4个S组山羊草为另一类型；因此建议前者基因型符号仍保留为“S”，而其余4个种之间无明显不同，故应把基因组符号统一为“S^1”②S基因组是小麦B／G基因组的供体，而拟斯卑尔脱山羊草可能是最主要的供体，但并不排除其余S基因组的种参与了B／G基因组形成的可能；研究还表明B基因组与S基因组还是有很大区别的，并已找到了B基因组的特异标记。

拟斯卑尔脱山羊草（Ae．speltoides Tausch）遗传多样性的RAPD分析

用95个引物，在拟斯卑尔脱山羊草15份材料中扩增出416条带，其中无多态性的带为83条，占总数的20％，有多态性的带为333条，占总数的80％。可以看出，拟斯卑尔脱山羊草种内遗传多样性十分丰富。RAPD分析表明，供试的15份材料可以分成4个类群，每个类群内的材料之间差异较明显，而4个类群间差异不是太大，因此拟斯卑尔脱山羊草是由类群内不太一致、类群间差异不十分明显的4个类群构成。类群内差异明显，支持遗传多样性丰富，说明拟斯卑尔脱山羊草是一个古老物种的观点；而类群间差异又不太大，表示该物种在长期进化中，没有分化成新的类型，说明该物种较稳定。本研究结果从分子水平上支持拟斯卑尔脱山羊草是一个比较古老且比较稳定的物种的论断。