ABTS法和DPPH法测定类胡萝卜素清除自由基能力的适用性

类胡萝卜素是一大类天然抗氧化剂,但目前对于其清除自由基活性的研究还不系统,所报道结果也不统一。本实验对常用的两种清除自由基活性的测定方法,DPPH和ABTS法,进行了类胡萝卜素适用性的研究。采用7种类胡萝卜素与槲皮素作为研究对象,分别考察了其清除DPPH和ABTS自由基的能力及其光谱学特征,并优化活性测定条件。结果表明,采用DPPH测定法时,部分有色类胡萝卜素由于其最大吸收峰在450~550 nm之间,与DPPH溶液最大吸收峰接近,会对实验结果产生干扰;而采用ABTS测定法时,最佳测定波长为734 nm,体系在180 min内保持稳定。7种类胡萝卜素在734 nm处吸光值随样品浓度的增加而降低,具有显著量效关系。经测定获得了7种类胡萝卜素与槲皮素清除ABTS自由基的半数抑制浓度(IC50)分别为β-胡萝卜素1251,番茄红素1280,虾青素141,槲皮素22.21,叶黄素386,玉米黄素476,藏红花素596,杜鹃红素42μg·mL^-1。清除ABTS自由基的能力由大到小排列为:槲皮素>杜鹃红素>虾青素>叶黄素>玉米黄素>藏红花素>β-胡萝卜素>番茄红素。ABTS清除实验避免了有色抗氧化剂本身的光谱干扰,相比DPPH自由基清除测定而言,更可靠、方便,更适合作为类胡萝卜素清除自由基性测定方法之一。