固醇调控元件结合蛋白1(Sterol regulatory element-binding protein 1,SREBP1)通过调控脂肪生成相关的酶基因的转录,在机体脂类代谢调控中起着重要作用.本研究以21日龄的鸡胚肝组织的cDNA为模板,通过PCR分段克隆Srebp1全长基因的编码...固醇调控元件结合蛋白1(Sterol regulatory element-binding protein 1,SREBP1)通过调控脂肪生成相关的酶基因的转录,在机体脂类代谢调控中起着重要作用.本研究以21日龄的鸡胚肝组织的cDNA为模板,通过PCR分段克隆Srebp1全长基因的编码区片段,采用生物信息学分析其蛋白质功能结构域,将SREBP1功能结构域的编码片段克隆入原核表达载体pColdⅢ中,在大肠杆菌BL21(DE3)进行该功能片段的诱导表达.结果表明利用该基因内的KpnⅠ和NotⅠ两个限制性酶切位点,成功将鸡Srebp1基因上分别长700,1300,1500 bp 3个片段依次插入pcDNA3.1(+)质粒的HindⅢ和XhoⅠ酶切位点之间,获得全长Srebp1基因编码片段;在15℃和异丙基硫代半乳糖苷(Isopropylβ-D-Thiogalactoside,IPTG)的诱导条件下,pColdⅢ-g Srebp1-1125重组表达质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达出重组蛋白gSREBP1-1125;SDS-PAGE电泳结果显示,重组蛋白gSREBP1-1125部分呈可溶性表达,但主要以包涵体存在.镍离子一步亲和层析法从菌体的裂解上清中获得了高纯度的重组蛋白;结合镍离子亲和层析,对重组蛋白进行固-液两相法复性,成功从包涵体中纯化得到高纯度的可溶性gSREBP1-1125功能多肽.鸡Srebp1真核表达载体和功能片段重组蛋白的获得为进一步研究其结构、功能以及抗体的制备奠定了基础.展开更多
提出一种物联网智能家居系统,该系统网关设计以嵌入式高性能四核处理器ARM Cortex-A9为核心,Linux实时平台操作系统提供良好的人机界面.采用CC2530射频收发芯片及ZigBee无线组网技术,结合上位机嵌入式集成开发环境IAR EW ARM,设计通过...提出一种物联网智能家居系统,该系统网关设计以嵌入式高性能四核处理器ARM Cortex-A9为核心,Linux实时平台操作系统提供良好的人机界面.采用CC2530射频收发芯片及ZigBee无线组网技术,结合上位机嵌入式集成开发环境IAR EW ARM,设计通过无线通信技术进行室内环境的数据检测、安防监测和家居家电智能控制,实现了家居控制的智能化统筹管理,充分展现了互联网时代物联网智能家居的优越性.展开更多
文摘固醇调控元件结合蛋白1(Sterol regulatory element-binding protein 1,SREBP1)通过调控脂肪生成相关的酶基因的转录,在机体脂类代谢调控中起着重要作用.本研究以21日龄的鸡胚肝组织的cDNA为模板,通过PCR分段克隆Srebp1全长基因的编码区片段,采用生物信息学分析其蛋白质功能结构域,将SREBP1功能结构域的编码片段克隆入原核表达载体pColdⅢ中,在大肠杆菌BL21(DE3)进行该功能片段的诱导表达.结果表明利用该基因内的KpnⅠ和NotⅠ两个限制性酶切位点,成功将鸡Srebp1基因上分别长700,1300,1500 bp 3个片段依次插入pcDNA3.1(+)质粒的HindⅢ和XhoⅠ酶切位点之间,获得全长Srebp1基因编码片段;在15℃和异丙基硫代半乳糖苷(Isopropylβ-D-Thiogalactoside,IPTG)的诱导条件下,pColdⅢ-g Srebp1-1125重组表达质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达出重组蛋白gSREBP1-1125;SDS-PAGE电泳结果显示,重组蛋白gSREBP1-1125部分呈可溶性表达,但主要以包涵体存在.镍离子一步亲和层析法从菌体的裂解上清中获得了高纯度的重组蛋白;结合镍离子亲和层析,对重组蛋白进行固-液两相法复性,成功从包涵体中纯化得到高纯度的可溶性gSREBP1-1125功能多肽.鸡Srebp1真核表达载体和功能片段重组蛋白的获得为进一步研究其结构、功能以及抗体的制备奠定了基础.
文摘提出一种物联网智能家居系统,该系统网关设计以嵌入式高性能四核处理器ARM Cortex-A9为核心,Linux实时平台操作系统提供良好的人机界面.采用CC2530射频收发芯片及ZigBee无线组网技术,结合上位机嵌入式集成开发环境IAR EW ARM,设计通过无线通信技术进行室内环境的数据检测、安防监测和家居家电智能控制,实现了家居控制的智能化统筹管理,充分展现了互联网时代物联网智能家居的优越性.
