在大鼠发育过程中β1,4半乳糖基转移酶的组织分布及其变化的研究

用HPLC纯化了荧光标记的底物（Gnβ1-2Ma1-6（Gnβ1-2Mα1-3）Mβ1-4Goβ1-4Gn-PA）用β-1，4-半乳糖基转移酶的荧光标记底物的HPLC测定方法，测定了在发育过程中大鼠肝，肾，脑中的酶活性的变化，结果表明，（1）在正常成年大鼠中，各组织酶活性具有组织特异性，（2）不同的发育期，其酶活性不同。胎鼠（孕20d，以下同）时最高，以后就渐渐下降，各组织酶活力变化幅度是不一致的，这些变化的生理意义有待子进一步研究．

针对点突变癌基因T24－ras转录物的核酶性质研究

通过改变核酶体外反应的各种条件，对针对点突变癌基因Ｔ２４－ｒａｓ转录物的核酶Ｒ８的性质进行了系统研究，结果表明：Ｒ８切割底物反应的最适ｐＨ值约为８．２，最适温度为５０℃，反应必须有镁离子参加，生理环境中常见的阴离子对反应没有影响，一些变性剂能够促进反应的进行，Ｒ８切割底物的反应为二级反应。

苦瓜凝集素的制备及部分性质研究

苦瓜凝集素的制备及部分性质研究王海仁，孙晓阳，王庆华，徐誉泰，田少敏（山东大学生物系，济南２５０１００）１９７２年，Ｔｏｍｉｔａ~［１］等人首先报道了从苦瓜中分离到具有凝集Ｏ型人红细胞，并为Ｄ－半乳糖抑制的苦瓜凝集素（ＭｏｍｏｒｄｉｃａＣｈａｒａｎｔ?..

用PT－PCR法从U937细胞系克隆CD44H的cDNA

用ＰＴ－ＰＣＲ法从Ｕ９３７细胞系克隆ＣＤ４４Ｈ的ｃＤＮＡ罗振革，高杰英，孔祥英，苏新，朱锡华（军事医学科学院微生物流行病研究所，北京１００８５０）（第三军医大学免疫教研室，重庆６３００３８）ＣＤ４４是分布于多种细胞表面的糖蛋白分子，属粘附分子的成员，...

泛醌结合蛋白（QPs）重组活性必需羧基的定量研究

用Ｃ１４（ＤＣＣＤ）参入法确定了在泛醌结合蛋白ＱＰｓ中有四个对重组活性必需的羧基，它们全部定位在２４０００亚基上。

牛胰多肽（BPP）二级结构的红外光谱和圆二色谱分析

牛胰多肽（ｂｏｖｉｎｅｐａｎｃｒｅａｔｉｃｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ，ＢＰＰ）是胰脏分泌的一种含有３６个氨基酸的多肽［１］，ＢＰＰ能预防和治疗由胆酸盐诱发的大鼠急性胰腺炎，具有细胞保护作用。本文用傅里叶变换红外光谱（ＦＴ－ＩＲ）和圆二色谱（ＣＤ），对ＢＰＰ在水溶液中的二级结构进行了研究。两种方法的分析结果互相补充，进一步确定了ＢＰＰ在溶液状态的二级结构。本研究为进一步探讨ＢＰＰ抑制膜融合的机理打下了基础。

神经生长因子的发光免疫分析法

介绍了一种灵敏的神经生长因子化学发光免疫测定方法。小鼠神经生长因子（ｍＮＧＦ）的抗体ＩｇＧ用亲和层析纯化并用吖啶酯标记。该法可用于大鼠组织中ＮＧＦ含量的测定。方法的灵敏度为１０ｐｇ／ｍＬＮＧＦ；批内批间变异系数分别为８．７％及１３．２％；回收率平均为１０３％。ｍＮＧＦ抗体对人的ＮＧＦ也有极强的交叉反应，故本方法也可能用于病人血清或脑脊液中ＮＧＦ含量的测定。

用遗传工程的方法构建一个分泌型高表达的枯草杆菌碱性蛋白酶E(Subtilisin E)的枯草杆菌质粒-宿主系统

将克隆了枯草杆菌蛋白酶E基因aprE的枯草杆菌质粒pPZW101和一个组成型強启动子Psk连接构建成质粒pPZW102,转入碱性和中性蛋白酶缺失枯草杆菌DB104并进行表达。此质粒-宿主系统具有Subtilisin E高表达和外分泌的特点。

大熊猫子宫钙调素的分离纯化和性质的研究

以大熊猫子宫为材料分离纯化了钙调素(Calmodulin,CaM),经SDS-PAGE,PAGE和等电聚焦电泳鉴定,表现均一。分子量为18800道尔顿,等电点为3.6。该蛋白质分子的N-末端为封闭的。大熊猫子宫钙调素具有其它来源钙调素所特有的一些性质。对环核苷酸磷酸二酯酶有明显的激活作用,还发现对超氧化物歧化酶也有一定的激活作用。电泳行为受Ca^(2+)影响而出现特征性电泳改变,在含有Ca^(2+)的SDS凝胶电泳中,电泳速度比EGTA存在对略快,在PAGE中,有Ca^(2+)比无Ca^(2+)对电泳速度略慢。大熊猫子宫钙调素的氨基酸组成中,Phe/Tyr为8:2,可观察到钙调素特征性紫外吸收光谱。

底物结合性洋姜菊粉酶的动力学性质研究

随着高果糖浆工业的发展,固定化葡糖异构酶的质量和成本逐渐成为影响产品商业化的突出问题。至今,国内外均从某些微生物中提取菊粉酶(Inulinase E、C、3.2.1.7),再去作用菊目植物中含有的菊粉,以此生产果糖。我们设想。

用亲和层析技术分离纯化天冬氨酸酶

亲和层析技术做为现代生化实验室常用的提纯方法,具有专一性强,活力损失小,分离步骤少等优点。天冬氨酸酶是重要的酶制剂,以往见报的分离纯化工艺步骤繁琐,活力损失大。本文报道的新工艺是用聚乙二醇(PEG)/磷酸钾双水相抽提;DEAE-sophadex A-50柱层析除PEG和部分杂蛋白;环氧氯丙烷活化载体,底物作配基的亲和层析技术获得了电泳纯的天冬氨酸酶。

马兜铃酸与钙调素相互作用的荧光光谱分析——一种非钙离子依赖性钙调素拮抗剂的研究

本文报道我室近来发现的一种天然钙调素(Calmodulin,CaM)拮抗剂马兜铃酸(Aristolochic acid,ATA)的研究。利用丹磺酰标记的CaM(D-CaM)对马兜铃酸的研究表明,马兜铃酸是一种非钙离子依赖性钙调素拮抗剂,实验测得马兜铃酸与D-CaM结合的解离常数,有Ca^(2+)和无Ca^(2+)情况下分别为70μmol/L、77μmol/L。两种状况下马兜铃酸对D-CaM荧光强度的抑制分别为40％、41％。暗示马兜铃酸主要作用于CaM上Ca^(2+)诱导的疏水区之外。三氟啦嗪(TFP)引起的D-CaM荧光增强可被马兜铃酸明显降低,而TFP在达到马兜铃酸浓度的15倍以上仍未能逆转马兜铃酸对D-CaM荧光强度的降低作用,这为马兜铃酸主要作用于CaM上Ca^(2+)诱导的疏水区以外提供了又一佐证。

红曲霉葡萄糖淀粉酶N-连接糖链的初步研究

在加强了的碱性条件下对红曲霉葡萄糖淀粉酶进行β-消除反应,分离未发生消除的级分。对反应前后的样品进行糖组成及甲基化分析,证实了红曲霉葡萄糖淀粉酶上确有对β-消除有抵抗的含GlcNAc的糖链存在。

CWE纯系小鼠脑组织发育过程中细胞癌基因及其表达研究

本文以Ha-ras.c-fos、c-myc、v-erbB、mos五种癌基因片段为分子探针,应用斑点杂交技术,对CWE纯系小鼠脑组织发育的四个时期(胚胎期、新生期、性成熟期、体成熟期)的RNA进行分子杂交分析。发现:在实验各期中这几种癌基因的表达有较明显的变化。Ha-ras、c-fos、c-myc基因的表达在胚胎期和新生期脑组织中较高;v-erbB基因的表达在性成熟期脑组织中较高;mos基因在实验各期均无表达。DNA斑点杂交结果:小鼠脑组织发育各期均未观察到癌基因扩增现象。Southern杂交结果:CWE小鼠发育的各期均显示:5.4kb、3.4kb、1.8kb、1.0kb四条c-fos基因区带;7.4kb、4.5kb、3.4kb三条c-myc基因区带。结果表明:不同细胞癌基因在小鼠胚胎发育和胚后发育中有不同的表达。

靶向敏感免疫脂质体的制备及其性能的初步研究

靶向敏感免疫脂质体(TSIL)是利用脂质体的良好载药性能和抗体特别是单抗的特异寻靶能力,并将二者结合起来达到定向释放药物的一种脂质体。目前在国际上研究较多,但国内尚未见报道。我们在参照国外文献的基础上,利用羊抗兔IgG作为抗体,并将其与棕榈酸偶联,然后将棕榈酰抗体掺入到二油酰磷脂酰乙醇胺DOPE中。

转TK基因的人结肠癌细胞对多种原药敏感性的研究

构建了含有单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（HSV-TK）的重组逆转录病毒载体LTKSN．经PA317细胞包装后，感染人结肠癌细胞株LoVo．用G418筛选到稳定表达HSV-TK基因的细胞克隆LoVo／LTKSN．LoVo／LTKSN与野生型LoVo细胞相比，生长曲线无明显差异，细胞形态亦无改变．细胞毒试验证明LoVo／LTKSN对GCV的敏感性很高，半杀伤浓度IC50为0.5μmol/L，比野生型细胞提高了4000倍以上．三种不同的原药GCV，ACV和BVDU对LoLo／LTKSN具有效果不等的杀伤作用．BVDU和GCV联合作用效果更好．旁杀伤效果十分明显，低浓度GCV就可以将合10%LoVo／LTKSN的混合细胞中的大部分肿瘤细胞杀死．

内切葡聚糖苷水解酶的分离纯化和内源荧光性质

利用离子交换和分子筛层析技术从拟康氏木霉Ｓ－３８固态发酵液中提纯了两个内切葡聚糖苷酶组分．测定了一个组分的内源荧光性质，结果表明：该酶分子的内源荧光几乎都来自色氨酸．Ｎ－溴代琥珀酰亚胺（ＮＢＳ）修饰导致了酶活力的完全丧失，但是酶荧光残留了２５％，抑制剂纤维二糖与酶结合可使部分酶荧光得到保护，同时这种结合也可以保护一定的色氨酸荧光不被外来淬灭剂淬灭．

人乳腺癌cAMP结合蛋白

建立了测定人乳腺癌胞浆ｃＡＭＰ结合蛋白（ｃＡＭＰｂ．ｐ．）方法。综合研究了其温度、保温时间、配体浓度、稳定性等条件。ｃＡＭＰｂ．ｐ．的Ｋ_Ｄ值为２．９０×１０^（－８）ｍｏｌ／Ｌ．并测定了６０例雌激素受体（ＥＲ）Ｆｕ性乳腺癌标本的ｃＡＭＰｂ．ｐ．含量。此组病人术后均接受系统的内分泌治疗，ＥＲ／ｃＡＭＰｂｐ，比值范围为７．７～３６２×１０^（－３），ＥＲ／ｃＡＭＰｂ．ｐ．比值≥４０×１０^（－３）的五年生存率明显高于比值＜４０×１０^（－３）组，（ｐ＜０．００５）．表明测定ＥＲ／ｃＡＭＰｂ．ｐ．比值对预测患者内分泌治疗疗效，优于单独测定ＥＲ．

黄精凝集素Ⅱ分子稳定性与生物学活性研究

黄精凝集素Ⅱ分子稳定性与生物学活性研究鲍锦库，曾仲奎，周红（四川大学生物系，成都，６１００６４）本文在黄精凝集素Ⅱ纯化及性质研究的基础上，应用多种变性条件，研究其分子特性，同时对分子的巯基和色氨酸进行修饰，研究该凝集素分子保持其生物学活性与这些基团的...

恶性疟原虫杂合多肽抗原融合基因的克隆和表达

合成了５对寡核苷酸片段，分别连接在两种恶性疟原虫杂合多肽（４５肽和５８肽）抗原基因片段（ＨＰＦＧＡ和ＨＰＦＧＢ）的头部和尾部，将这两种片段分别与霍乱毒素Ｂ亚单位（ＣＴ－Ｂ）基因末端融合。两种杂合多肽抗原分别含有数个红内期和红外期有代表性的、并能被Ｔ或Ｂ淋巴细胞识别的保护性抗原表位，ＣＴ－Ｂ基因前端具有促使分泌的信号肽序列。将这两种融合基因的不同重组质粒分别转化大肠杆菌，对转化菌的培养上清检测表明融合蛋白被分泌性表达，既具有恶性疟原虫和ＣＴ－Ｂ抗原性，又保持了ＣＴ－Ｂ与其受体神经节苷脂ＣＭ１结合的生物学活性。