COVID-19患者使用G-CSF的安全性

2019新冠病毒病(COVID-19)被定义为由SARS-CoV-2感染引起的疾病,短时间内就造成了全球大流行,其关键免疫病理特征包括淋巴细胞减少、中性粒细胞增多以及细胞因子风暴和肺等实质器官的免疫损伤等。COVID-19的临床表现因人而异,但最常见、最严重的症状一般是呼吸系统疾病相关的表现,肺是病毒的主要靶器官。COVID-19的一个显著特征是促炎细胞因子(包括GCSF)升高,而G-CSF可能会引发过度炎症反应,也许会使部分患者病情加重,故COVID-19是否要应用G-CSF治疗,目前颇有争议,还需要临床医生根据每个病人的具体情况评估使用G-CSF的有效性和安全性。

丁酸钠预处理通过减轻血脑屏障损伤改善大鼠肠缺血再灌注诱导的认知障碍

目的:探究丁酸钠对大鼠肠缺血/再灌注后血脑屏障和认知功能的影响及其可能存在的机制。方法:将SD大鼠随机分为4组,每组12只,(1)假手术组(Sham组);(2)肠缺血/再灌注组(II/R组);(3)肠缺血/再灌注+丁酸钠组(NaB组):造模前1周NaB 500 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃;(4)肠缺血/再灌注+丁酸钠+ITSA-1组(ITSA-1组):造模前1周NaB 500 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃+前5 d、3 d、1 d ITSA-10.5 mg/kg腹腔注射。HE染色评估肠黏膜损伤;Morris水迷宫测试评估大鼠认知功能;透射电镜观察血脑屏障微结构改变;ELISA检测脑组织炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α和紧密连接蛋白Claudin5、ZO-1及基质金属蛋白酶-9(matrix me-talloproteinase-9,MMP-9)含量;Western Blot检测紧密连接蛋白Claudin5、ZO-1及亲环蛋白A(cy-clophilin A,CypA)、MMP-9水平。结果:与Sham组相比,II/R组大鼠Chiu's肠黏膜损伤评分较高(P<0.001);游泳路程增加(P<0.05),非平台象限占比增加(P<0.001),潜伏期延长(P<0.05);透射电镜下血脑屏障微结构改变;脑组织炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α增加(P<0.001),CypA、MMP-9表达增加(P<0.01),紧密连接蛋白Claudin5、ZO-1表达减少(P<0.01,P<0.001);与II/R组相比,NaB组神经炎症、血脑屏障损伤减轻,认知功能改善;ITSA-1组上述损伤与II/R组相似。结论:丁酸钠可通过减轻血脑屏障损伤改善大鼠II/R诱导的神经认知功能障碍,其机制可能与抑制CypA/MMP-9通路有关。

磷酸二酯酶4抑制剂作为特发性肺纤维化药物治疗的可能性

特发性肺纤维化(IPF)是一种进行性、不可逆和典型的慢性纤维化肺病,近年来,对IPF的病理生理学认识、临床诊断和治疗有了显著进展。但至目前为止,仍然没有治愈IPF的方法。第二信使环磷酸腺苷(cAMP)在IPF的发展过程中抑制成纤维细胞增殖或向肌成纤维细胞分化。磷酸二酯酶4(phosphodiesterase 4,PDE4)是肺成纤维细胞中主要的cAMP降解酶,在纤维化的进展中上调,PDE4抑制剂在IPF模型中具有体内和体外抗纤维化作用。此外,PDE4广泛参与炎症过程,炎症过程在IPF的发病机制中也很活跃。因此,抑制PDE4是一种潜在的治疗IPF的方法。本文综述了IPF的发病机制和PDE4抑制剂在治疗IPF中的生理功能。

维生素D通过线粒体/自噬途径影响糖尿病神经病变机制的研究

维生素D主要功能是调节钙稳态及骨代谢,但近年来也被证实可参与线粒体代谢及细胞自噬,进一步影响骨骼肌细胞、肝细胞、神经细胞等。本文主要探讨维生素D通过改善线粒体功能、调节自噬影响糖尿病神经病变,为维生素D的临床应用提供理论基础。

雷公藤多苷治疗糖尿病肾脏病的临床疗效及抗炎抗纤维化分析

目的:分析雷公藤多苷(multi-glycosides of tripterygium wilfordii hookf,GTW)治疗糖尿病肾脏病(diabetic kidney disease,DKD)临床病例资料,探讨GTW治疗DKD的有效性和安全性。方法:回顾性分析2019年6月至2022年10月皖南医学院弋矶山医院门诊进行GTW治疗的51例DKD患者的随访及治疗情况,分析治疗6个月后,GTW服药前后实验室疗效指标变化以及药物不良反应情况。结果:经治疗6个月后,患者白蛋白为(40.72±4.87)g/L,与治疗前(35.86±7.90)g/L相比明显升高(P<0.05)。治疗前尿白蛋白与肌酐比值(urea albumin creatinine ratio,UACR)为(2145±253)mg/g,治疗后为(1263±238)mg/g,治疗后有明显下降(P<0.05);尿常规尿蛋白半定量重度(3+、4+)患者总人数较前下降,治疗前后差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗6个月后患者空腹血糖(fasting blood-glucose,FPG)及糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)分别为(8.42±3.31)mmol/L、(7.41±1.48)%,与基线FPG(7.20±1.95)mmol/L、HbA1c(6.63±1.00)%相比下降(P<0.05);治疗过程中,患者肾小球滤过率(glomerular filtration rate,eGFR)≥3a期血肌酐(Scr)倍增人数为1人(3.80%),UACR倍增人数为2人(7.70%),eGFR≤3b期分别为0人和1人(4.00%),两组差异无统计学意义(P>0.05);3例(5.90%)出现肝功能异常、1例(2.00%)出现白细胞减少,给予护肝、升白药物治疗后情况好转。其他血糖、血脂、血压等指标治疗后与治疗前相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:DKD患者采用GTW治疗能够显著减少尿蛋白,提高白蛋白,改善患者肾功能,值得临床推广运用。

Ciltacabtagene autoleucel——治疗复发难治性多发性骨髓瘤的靶向BCMA CAR-T细胞新型疗法

2022年2月28日,美国食品和药物管理局(FDA)批准Ciltacabtagene autoleucel(Cilta-cel)上市,用于治疗成人复发难治性多发性骨髓瘤(relapsed or refractory multiple myeloma,RRMM)。Cilta-cel是中国首个获FDA批准的细胞治疗产品,亦是全球第二款获批靶向B细胞成熟抗原(B-cell maturation antigen,BCMA)的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)-T细胞免疫疗法。最新研究发现,RRMM患者接受Cilta-cel治疗后,总缓解率(overall remission rate,ORR)高达97%,12个月无进展生存率为77%;常见毒性作用包括中性粒细胞减少、血小板减少、贫血、细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome,CRS)及神经毒性等。本文将对Cilta-cel的作用机制、适应症、药代动力学、临床研究及不良反应等作一综述。

疏肝健脾方调控TLR4/MyD88/NLRP3信号轴抑制肝纤维化小鼠细胞焦亡的机制研究

目的:基于TLR4/MyD88/NLRP3信号轴探究疏肝健脾方对肝纤维化小鼠的治疗作用及机制。方法:采用四氯化碳(CCl_(4))与橄榄油混合液背部皮下注射的方法,复制化学性肝纤维化小鼠模型。造模首日,灌胃给予疏肝健脾方,每天1次,连续12周;HE、Masson和天狼猩红染色观察小鼠肝组织病理学损伤程度,透射电镜观察肝组织超微结构的变化及焦亡小体情况;RT-qPCR、Western blot和免疫组织化学染色检测肝组织中α-SMA、CollagenⅠ、Caspase-1、IL-1β、IL-18以及TLR4/MyD88/NLRP3信号轴表达的变化情况。结果:病理分析显示模型组小鼠肝脏肝小叶结构模糊,肝细胞索排列紊乱,胶原沉积增加,焦亡小体数量明显增加,肝组织中α-SMA、CollagenⅠ、Caspase-1、IL-1β、IL-18以及TLR4、MyD88和NLRP3的mRNA和蛋白表达水平相较于正常组肝脏均显著升高。与模型组相比,疏肝健脾方给药后可改善肝脏病理组织学损伤程度,抑制细胞焦亡,显著下调α-SMA、CollagenⅠ、Caspase-1、IL-1β、IL-18以及TLR4、MyD88和NLRP3 mRNA与蛋白表达水平。结论:疏肝健脾方抗肝纤维化作用可能与调控TLR4/MyD88/NLRP3信号轴,减少细胞焦亡,抑制肝星状细胞活化有关。

骨髓间充质干细胞通过抑制铁死亡改善大鼠重症急性胰腺炎相关肺损伤

目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺组织内细胞铁死亡的抑制作用及其潜在机制。方法:选择3周龄SD雄性大鼠提取、培养BMSCs。将30只6周龄SD雄性大鼠随机分为5组:假手术组(Sham)、胰腺炎组(SAP)、PBS对照组(SAP+PBS)、干细胞治疗组(SAP+BMSCs)、干细胞联合Nrf2阻断剂ML385治疗组(SAP+BMSCs+ML385),每组6只。使用牛磺胆酸钠(NaT)构建大鼠SAP模型。于造模前2 h,SAP+BMSCs+ML385组腹腔注射ML385(5 mg/kg);于造模后6 h,SAP+BMSCs组和SAP+BMSCs+ML385组尾静脉注射BMSCs(1×10^(7)/只),SAP+PBS组尾静脉注射等量的磷酸盐缓冲液(PBS)。3 d后处死大鼠,取胰腺、肺组织和血清。H&E染色观察组织损伤情况。检测血清中淀粉酶、脂肪酶活性和炎症因子水平,肺组织中铁含量、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)活性。检测肺组织铁响应元件结合蛋白2(IREB2)、铁蛋白重链1(FTH1)、长链脂酰CoA合成酶4(ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)等铁死亡相关蛋白表达,以及PI3K/AKT/Nrf2通路相关蛋白表达。结果:NaT诱导后大鼠血清淀粉酶、脂肪酶活性、促炎因子水平和病理评分明显升高(P<0.05)。BMSCs移植能够明显减轻上述指标(P<0.05)。相比SAP组,BMSCs治疗组肺组织铁、MDA水平降低,GSH活性升高,IREB2、ACSL4蛋白表达降低,FTH1、GPX4及SLC7A11蛋白表达升高(P<0.05);ML385能够部分抵消BMSCs移植产生的抗脂质过氧化作用(P<0.05)。BMSCs移植上调了肺组织PI3K、p-AKT总蛋白和Nrf2核蛋白的表达(P<0.05)。结论:BMSCs移植能够有效减轻SAP相关肺损伤的全身炎症反应和局部组织损伤,抑制肺组织铁沉积和脂质过氧化,其抗脂质过氧化作用可能与PI3K/AKT/Nrf2通路有关。

国产小分子化学创新药临床药物相互作用研究现状

为了提高疗效或减少毒副作用,临床上常采用两种或两种以上药物联合的用药策略,这往往带来因联合而改变某一药物体内过程或疗效的新的用药问题。本文综述了我国自2000年1月至2021年3月批准上市自主研制的44种小分子化学创新药开展临床药物相互作用的研究现状。其中,创新药物作为代谢酶底物的临床药物相互作用试验占据主导地位(11/44),且以CYP3A4酶底物研究为主(7/11),结果表明创新药物多为CYP3A4的中等及以下敏感程度的底物,未发现高敏感底物。其次是基于协同增效或降低副作用而联合用药的药物相互作用试验,主要集中于肿瘤、糖尿病、病毒感染等领域,这些研究中也未表现出具有临床意义的药动学相互作用。以创新药物作为代谢酶调节剂开展的临床药物相互作用试验比例为7/44;基于转运体的药物相互作用临床试验报道较少,该方面研究主要以体外试验为主。随着药物体内外代谢/转运机制的深入研究,特别是放射性同位素标记药物的临床试验的开展以及计算机模拟的辅助,我国药物相互作用研究的整体水平也在逐步提高,这将为保障用药安全提供坚实的科学基础。

组蛋白去乙酰化酶3在心血管疾病中的研究进展

组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs)是表观遗传的一种修饰酶,其与染色质结构和基因转录调控密切相关。HDAC3属于第Ⅰ类组蛋白去乙酰化酶,研究报道HDAC3在心脏发育过程中起着关键的作用,最新研究发现HDAC3在心血管疾病中发挥着重要的调控作用。本文主要围绕Ⅰ类组蛋白去乙酰化酶家族中的HDAC3,综述其定位和酶活性与先天性心脏病、冠心病、心肌疾病、心力衰竭、心律失常的关系,为心血管疾病临床治疗提供新的药物靶点。

急性等容血液稀释自体血回输对老年骨科手术患者脑电双谱指数与肌松效应的影响

目的:观察急性等容血液稀释(ANH)自体血回输对老年骨科手术患者脑电双谱指数与肌松效应的影响,探究含有麻醉药成分的自体血回输对术后麻醉苏醒质量及安全性的影响。方法:择期骨科手术患者40例,年龄65~75岁,体质量55~80 kg,ASAⅠ~Ⅱ级,预计术中出血量≥600 mL。患者随机分为2组(n=20):A组为进行ANH组,在麻醉诱导平稳后实施ANH,血细胞比容(Hct)目标值28%~30%;B组为对照组,即术中常规补液,不进行ANH。于术毕回输自体血时(T_(1))、回输10 min(T_(2))、20 min(T_(3))、30 min(T_(4))、40 min(T_(5))、50 min(T_(6))、60 min(T_(7))各时点观测两组患者脑电双频指数(BIS)、四个成串刺激(TOF值)及丙泊酚、顺式阿曲库铵的血浆药物浓度变化;观察并记录术前(T 0)及T_(7)时点血气变化,观察患者拔除气管导管的时间以及苏醒质量。结果:A组BIS值在术后T_(6)、T_(7)时点明显低于B组(P<0.05),A组TOF值在T_(5)、T_(6)、T_(7)时点明显低于B组(P<0.05);A组与B组术后丙泊酚、顺式阿曲库铵的血药浓度组间比较差异无显著性(P>0.05);A组在术后T_(7)时点乳酸(Lac)值明显高于B组(P<0.05);A组拔除气管导管的时间明显长于B组(P<0.05);A组Aldrete评分明显低于B组(P<0.05)。结论:ANH后术毕自体血回输可增加血浆中麻醉药物浓度,加深患者的麻醉深度,增强肌松效应,使老年患者呼吸功能恢复和拔管时间延迟。

化痰降气胶囊含药血清调控Nrf2/HDAC2改善16HBE细胞糖皮质激素抵抗

目的:探讨化痰降气胶囊含药血清(HTJQ)对香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract, CSE)刺激下的人支气管上皮细胞(16HBE)糖皮质激素(glucocorticoid, GC)抵抗的影响。方法:16HBE细胞经HTJQ处理后,CCK-8法测定不同浓度HTJQ对16HBE细胞活力的影响。HTJQ预先处理16HBE细胞,然后依次用地塞米松(DEX)和脂多糖(LPS)培养24 h,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定HTJQ对16HBE细胞糖皮质激素抵抗的影响。Western blot法分别测定HTJQ、萝卜硫素(SFN)和谷胱甘肽(GSH)对CSE刺激下16HBE细胞NF-E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)的表达;ELISA分别测定HTJQ、SFN和GSH对16HBE细胞白细胞介素-8(IL-8)的影响。结果:HTJQ在1 h、2 h、4 h下均促进16HBE细胞增殖;ELISA和Western blot结果显示,CSE导致16HBE细胞GC抵抗(P<0.01),Nrf2、HO-1、HDAC2的表达降低(P<0.01);HTJQ显著降低IL-8,改善16HBE细胞GC敏感性(P<0.01),并上调Nrf2、HO-1、HDAC2的表达(P<0.01)。此外HTJQ显著上调16HBE细胞内GSH水平(P<0.01)。Nrf2激动剂SFN和GSH均显著改善16HBE细胞的糖皮质激素敏感性(P<0.01),上调Nrf2、HO-1、HDAC2的表达(P<0.01)。结论:HTJQ胶囊通过上调Nrf2/HDAC2蛋白表达和细胞内GSH水平,从而改善16HBE细胞GC抵抗。

皖南蝮蛇毒抑瘤组分-Ⅰ逆转原代胃癌相关成纤维细胞促癌作用

目的:探讨皖南蝮蛇毒抑瘤组分-Ⅰ(agkistrodon halys venom antitumor component-Ⅰ,AHVAC-Ⅰ)抑制胃癌细胞迁移的生物学活性。方法:组织块培养法和胰酶消化法分离培养人原代胃癌相关成纤维细胞(GCAFs);CCK8实验根据半数抑制浓度(IC 50)确定AHVAC-Ⅰ实验浓度;收集AHVAC-Ⅰ作用GCAFs后的上清液(GCAFs-CM^(AHVAC-Ⅰ)),划痕实验法和Transwell检测GCAFs-CM^(AHVAC-Ⅰ)抑制胃癌细胞株MKN-28迁移的能力;用ELISA、RT-PCR检测AHVAC-Ⅰ作用后GCAFs分泌产生的趋化因子CXCL12。结果:AHVAC-Ⅰ可显著抑制人原代GCAFs分泌的CXCL12(P<0.05),AHVAC-Ⅰ作用后生成的GCAFs-CM^(AHVAC-Ⅰ)明显抑制了胃癌细胞MKN-28的迁移能力(P<0.05)。结论:AHVAC-Ⅰ能够通过抑制GCAFs分泌生成的CXCL12抑制胃癌细胞MKN-28的迁移能力,逆转胃癌肿瘤微环境中的GCAFs的促进胃癌细胞转移的作用。

碳酸酐酶1沉默对肺癌A549细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响

目的:探讨沉默碳酸酐酶1(CA1)对人肺癌A549细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。方法:采用脂质体转染法将CA1特异性siRNA(si-CA1组)及阴性对照(si-NC组)转染肺癌A549细胞,同时以转染空脂质体的A549细胞为空白对照组(Blank组)。采用实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测CA1 mRNA和蛋白表达水平,细胞计数试剂盒法(CCK-8)、流式细胞术、Transwell实验分别检测A549细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力。结果:qPCR和Western blot检测结果显示,转入CA1 siRNA的A549细胞中CA1 mRNA和蛋白的表达水平均明显下调(P<0.05);CCK-8实验结果显示,沉默CA1后si-CA1组A549细胞在24、48和72 h时光密度(OD)值明显低于si-NC组(P<0.05);流式细胞术结果发现,si-CA1组A549细胞凋亡率明显高于si-NC组(P<0.05);Transwell实验结果显示,si-CA1组侵袭和迁移细胞数均明显少于si-NC组(P<0.05)。与Blank组相比,si-NC组以上各指标差异均不显著(P>0.05)。结论:沉默CA1能够抑制肺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移,并促进细胞凋亡。

血小板源性生长因子/蛋白激酶B通路在压力超负荷诱导的心室重构中的作用及机制研究

目的:分析血小板源性生长因子(PDGF)/蛋白激酶B(AKT)通路在压力超负荷诱导的心室重构中的作用及机制。方法:选取C57BL/6雌性小鼠55只,建立主动脉弓缩窄模型,成功建模45只,小鼠随机数字表法分为假手术组、DMSO组和实验组,假手术组小鼠开胸后逐层缝合,不进行主动脉缩窄术(TAC),开胸24 h后给予PBS溶液200μL加DMSO 50μL,DMSO组TAC术后24 h给予PBS溶液200μL加DMSO 50μL,实验组TAC术后24 h给予PBS溶液200μL加抑制剂AG129650μL,观察小鼠心功能及心肌组织病理形态。慢病毒感染建立PDGF基因不同表达人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞鉴定和培养,依据细胞不同处理方式分为对照组、PDGF组、shRNA组和PDGF+IMA组,检测p-AKT及t-AKT蛋白在HUVEC细胞内表达情况。结果:DMSO组小鼠左室收缩末期容积(LVESV)、左室舒张末期容积(LVEDV)、左室收缩末期内径(LVESD)及左室舒张末期内径(LVEDD)较假手术组升高,左室射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS)较假手术组降低。实验组LVESV、LVEDV、LVESD及LVEDD较DMSO组降低,EF、FS较DMSO组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。假手术组小鼠心肌组织整齐排列,间隙正常;DMSO组小鼠形态不规整,炎性细胞浸润,细胞间隙变大,胞核深染。实验组小鼠膨大或坏死细胞减少,间隙变小,炎性浸润降低。DMSO组小鼠心肌细胞横截面积较假手术组升高,实验组小鼠心肌细胞横截面积较DMSO组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。PDGF+IMA组细胞内p-AKT及t-AKT蛋白表达较PDGF组及shRNA组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PDGF可加速压力超负荷诱导心室重构,促进形成心肌组织纤维化,而抑制PDGF/AKT通路可改善心肌细胞肥大。

基于STOPPFrail标准的衰弱老年患者潜在不合理用药的横断面研究

目的:分析衰弱老年患者临床用药的现状,评价衰弱老年人潜在不合理用药(PIMs)情况,为衰弱老年人合理用药、进一步处方精简提供依据。方法:设计衰弱老年患者临床情况调查表,内容涵盖患者的基本情况及用药情况。使用查尔森合并症指数判断患者的疾病负担及状态,确定衰弱老年患者合并用药数量。依据STOPPFrail工具确定衰弱老年患者PIMs的发生率,并与McLeod标准判定的PIMs做比较,分析两者敏感性,并确定PIMs的风险因素。结果:最终纳入患者169例,平均年龄(83.49±6.73)岁,女性占比为42.6%。住院天数平均为19 d,四分位间距[IQR(12,33)]。平均入院24 h合并用药数量为(9.01±4.12)种,出院带药合并用药数为(11.27±4.57)种,其中:入院24 h合并用药中,PIMs检出率为41.42%。超过60%的患者在出院带药中至少使用了一种PIM,而7.69%的患者的PIMs数量≥3种。白三烯受体拮抗剂、质子泵抑制剂、降脂药物和糖尿病口服药物是主要的PIMs。STOPPfrail标准较McLeod标准PIMs检出率在入院24 h合并用药与出院合并用药中敏感度显著增加(t=6.78,P=0.00<0.01;t=10.10,P=0.00<0.01)。完全执行STOPPFrail的建议将有近七分之一的长期药物被停用。结论:衰弱老年患者疾病负担较高,多重用药普遍,潜在不合理用药发生率较高,有待进一步关注并提高用药安全性。STOPPFrail标准敏感性较高,并简洁、易于使用。借助STOPPFrail工具筛查衰弱老年患者合并用药情况预计可以减轻衰弱老年患者的用药负担。

SNI小鼠中调控ROS对疼痛和脊髓Pink1蛋白的影响及机制研究

目的:观察C57/BL6小鼠坐骨神经分支选择性损伤(spared nerve injury,SNI)后降低氧化应激反应对机械痛和脊髓中Pink1的表达影响,并探讨神经性疼痛中氧化应激对Pink1的可能的作用机制。方法:取60只小鼠,随机分为对照组(Control)、假手术组(Sham)、手术组(SNI)、SNI+Saline、SNI+苯亚甲基叔丁基氮氧化物(phenyl-N-tert-butylnitrone,PBN)5组。Control组不作任何处理,Sham组切开皮肤,分离出坐骨神经三支分支后缝合皮肤;SNI组游离并保留腓肠神经分支,结扎并切断胫神经;分别于14 d之后进行机械痛阈值检测。测定行为学后SNI组分别注射生理盐水(0.9%NaCl)和PBN。进行行为学测定,并分别检测氧化应激(GSH、SOD)水平;Western blot法检测腰段脊髓蛋白水平Pink1的表达变化。结果:SNI组与Control和Sham组相比,机械痛阈值显著降低,差异具有统计学意义(P<0.001);SNI组腰段脊髓ROS水平升高(P<0.05),注射PBN后ROS水平降低(P<0.001);SNI小鼠中Pink1在蛋白水平表达增多(P<0.001),降低ROS后脊髓中Pink1在蛋白水平表达降低(P<0.01)。结论:神经病理痛中降低线粒体内ROS水平则会改善小鼠神经性疼痛,靶向减少ROS的产生和改善Pink1有助于神经病理痛的治疗。

α-突触核蛋白激活NLRP3炎性小体介导神经细胞焦亡的发生

目的:研究α-突触核蛋白(α-synuclein)对于神经细胞焦亡发生的影响和机制。方法:以小鼠海马神经元细胞HT22细胞株为对象,体外培养后用α-synuclein干预细胞,以CCK-8法检测细胞活力,确定IC 50 值。设置对照组(Con组)后,采用TUNEL染色法检测细胞焦亡水平,免疫荧光法观察Gasdermin-D-N(GSDMD-N)的表达,Western blot法检测细胞中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、细胞凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、Gasdermin-D(GSDMD)、GSDMD-N、Caspase-1的表达水平,酶联免疫吸附法检测培养基中IL-18、IL-1β的表达水平。采用Caspase-1抑制剂预处理HT22后,同样使用IC 50 值的α-synuclein干预细胞,同时设置α-synuclein组(单纯α-synuclein干预)和α-synuclein+ML132组,检测细胞焦亡的水平。结果:α-synuclein的IC 50 值为50 nmol/L。α-synuclein干预后细胞焦亡数目显著增高,TUNEL染色显示阳性细胞数目多于Con组,免疫荧光染色结果显示细胞中GSDMD-N的表达水平上调,细胞中NLRP3、ASC、GSDMD-N、Caspase-1的表达水平显著高于Con组,而GSDMD水平下调,同时细胞培养基中IL-18、IL-1β的水平上调。Caspase-1抑制剂处理后,50 nmol/L的α-synuclein干预后,细胞焦亡水平显著低于α-synuclein组,同时免疫荧光染色结果显示GSDMD-N的水平下调,细胞中NLRP3、ASC、GSDMD-N、Caspase-1的表达水平显著低于α-synuclein组,而GSDMD水平上调,培养基中IL-18和IL-1β的水平下调。结论:α-synuclein可以通过激活NLRP3炎性小体活化继发神经细胞焦亡的发生,在帕金森病的发生发展中具有一定的作用。

血嗜酸性粒细胞水平影响慢性阻塞性肺疾病急性加重患者使用全身糖皮质激素的药物利用评价

目的:分析不同外周血嗜酸性粒细胞水平的慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)患者全身糖皮质激素的应用情况,以指导临床合理用药。方法:采用回顾性研究方法,以慢性阻塞性肺疾病全球创议(GOLD)最新发布的AECOPD管理推荐为评价标准,根据外周血嗜酸性粒细胞百分比水平(EOS)分成两组,EOS≥2. 0%为EOS观察组,EOS <2. 0%为EOS对照组,采用SPSS 19. 0统计分析软件进行数据处理,比较两组的全身糖皮质激素的使用比例及住院天数的差异,以及两组治疗前后第1秒用力呼气容积(FEV1)的差异。结果:纳入本研究的AECOPD患者共550人次,其中EOS≥2. 0%的患者有193人次,占35. 10%,EOS <2. 0%的患者有357人次,占64. 90%。使用全身糖皮质激素有164人次,占29. 82%,使用吸入糖皮质激素有386人次,占70. 18%。使用全身性糖皮质激素的164人次中EOS观察组有45人次,占27. 44%; EOS对照组119人次,占72. 56%。EOS观察组的平均住院天数更短,与EOS对照组比较,两组间差异有显著性,P=0. 04。EOS观察组在使用全身糖皮质激素后FEV1有改善,与治疗前比较差异有显著性,P=0. 04。结论:以最新AECOPD管理推荐为评价标准,在治疗AECOPD时,全身糖皮质激素存在使用过度和使用不足的现象;临床药师在指导临床用药和进行药物利用评价时,尽量采用国际上专业内认同的最新推荐意见,与临床医生共同推动合理用药。