miR-34c介导的辐射旁效应对心肌成纤维细胞的影响及黄芪甲苷的防护

目的:探讨miR-34c/Notch1介导的辐射旁效应对心肌成纤维细胞(CFs)的影响和黄芪甲苷的干预效应。方法:将miR-34c inhibitor和miR-34c inhibitor NC转染至CFs中分别构建(miR-34c-inhibitor)-CFs和(miR-34c-inhibitor NC)-CFs,用黄芪甲苷5.1μmol/L预先2 h处理CFs构建黄芪甲苷-CFs,以2 Gy X线照射,并与正常CFs共培养48 h建立辐射旁效应体系。试验分为:正常对照组、模型对照组、miR-34c-inhibitor NC组、miR-34c-inhibitor组、黄芪甲苷5.1μmol/L组;以qRT-PCR、Western blot、流式细胞术、CCK-8法、划痕实验法等检测分析旁效应CFs中miR-34c和Notch1分子的表达、CFs转分化和致纤维化能力的变化。结果:与照射前相比,照射后CFs中miR-34c表达逐渐上调,24 h时最高(P<0.01),而旁效应CFs中miR-34c的表达也随之上调,48 h达高峰(P<0.01)。与正常对照组相比,模型对照组旁效应CFs中miR-34c表达显著上调,Notch1蛋白表达显著下调,α-SMA表达和α-SMA阳性细胞比例显著增加,CFs增殖活性和迁移率显著升高、TGF-β1和ColⅠ蛋白及mRNA表达上调(P<0.01);与模型对照组相比,miR-34c-inhibitor组和黄芪甲苷5.1μmol/L组中旁效应细胞miR-34c和Notch1的差异表达被逆转,旁效应CFs的α-SMA表达、α-SMA阳性细胞比例和细胞增殖、迁移率均显著降低,TGF-β1和ColⅠ蛋白及mRNA表达显著下调(P<0.01)。结论:X线诱导CFs中miR-34c表达上调,并上调旁效应CFs的miR-34c,进而通过负性调控Notch1信号通路,促进旁效应CFs转分化,增强其致纤维化能力;而黄芪甲苷通过调控miR-34c/Notch1介导的辐射旁效应对CFs的转分化和促纤维化具有抑制效应,从而发挥防护放射性心脏纤维化损伤的作用。

中医药治疗绝经后冠心病的CiteSpace科学知识图谱分析

目的:基于CiteSpace分析中医药治疗绝经后冠心病的研究现状、研究热点和未来趋势,为该领域的深入研究提供参考。方法:以CNKI、Wanfang、VIP、SinoMed、PubMed和WoSCC数据库作为文献来源,查询建库至2021年12月31日与中医药治疗绝经后冠心病相关的中英文文献,通过CiteSpace分别对发文量、作者、机构、关键词等进行可视化分析。结果:共检索得到中文文献3479篇,根据纳排标准,最终纳入文献74篇;得到不重复英文文献7篇,由于文献数量过少,不适用于文献计量学分析,故本次暂不对英文文献进行可视化分析。中文发文量整体呈上下波动趋势,年度发文总量持续偏低。李淑琴、都军、武宇洲、王凤飞等是发文量较高的作者;国内诸多中医医院、中西医结合医院、中医药高校附属医院发文量较高,但研究数量少、合作欠紧密,山东省德州市人民医院是发文量最多的机构。共现频次前五的关键词包括冠心病、绝经、心绞痛、雌激素、绝经后,中介中心性>0.1的关键词包括冠心病、绝经后、雌二醇、绝经、雌激素。聚类分析得到8个主要聚类群:#0绝经,#1补肾,#2绝经后,#3胸痹,#4双向调节,#5老年,#6骨质疏松症,#7心肌酶。爆发词检测中突现强度最高的关键词为逍遥散。时间线图谱提示1996年~2007年国内高频出现的关键词是绝经后冠心病、补益肾气、紫河车、雌激素、等,2008年及以后主要关注中医疗法、疏肝解郁、补益肝肾、银杏叶、冠脉血流、血管弹性、药理、临床疗效、等。结论:中医药治疗绝经后冠心病的疗效和机制研究是近年的热点,肝肾是论治核心,补益肝肾、疏肝解郁、滋阴生津是主要治法,中医药具有调节雌激素水平和脂代谢及保护血管内皮等作用。

基于ATF6/GRP78/CHOP信号通路探讨龟鹿二仙胶对膝骨关节炎大鼠退变软骨细胞内质网稳态的影响

目的:探讨龟鹿二仙胶对毒胡萝卜素诱导的大鼠退变软骨细胞激活转录因子6(ATF6)/葡萄糖调节蛋白78(GRP78)/C/EBP同源蛋白(CHOP)信号通路的影响。方法:用大鼠膝关节提取软骨细胞进行体外培养。将软骨细胞分为空白对照组、模型对照组、10.8 g/kg 10%龟鹿二仙胶含药血清组、2μmol/L蛋白运输蛋白SX61抑制剂组。干预24 h后,以CCK-8法检测各组软骨细胞活性;免疫荧光染色检测蛋白运输蛋白SX61(SEC61)因子的表达情况;流式细胞术及TUNEL染色检测各组软骨细胞凋亡情况;Western blot及qPCR法检测软骨细胞ATF6/GRP78/CHOP、Ⅱ型胶原α1(COL2A1)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)蛋白及mRNA的表达。结果:与空白对照组相比,模型对照组软骨细胞活性显著下降(P<0.01),软骨细胞凋亡率及凋亡指数显著增高(P<0.01),SEC61荧光强度显著增强(P<0.01),GRP78、ATF6、CHOP、COL2A1、MMP-13蛋白及mRNA的表达明显上调(P<0.05);与模型对照组相比,10.8 g/kg 10%龟鹿二仙胶含药血清组及2μmol/L蛋白运输蛋白SX61抑制剂组软骨细胞活性显著提高(P<0.01),软骨细胞凋亡率及凋亡指数显著降低(P<0.01),SEC61荧光强度显著降低(P<0.01),GRP78、ATF6、CHOP、MMP-13蛋白及mRNA表达明显下调(P<0.05),COL2A1蛋白及mRNA表达上调(P<0.05);与10.8 g/kg 10%龟鹿二仙胶含药血清组相比,2μmol/L蛋白运输蛋白SX61抑制剂组软骨细胞活性显著提升(P<0.01),软骨细胞凋亡率及凋亡指数降低(P<0.05或P<0.01),SEC61蛋白荧光强度显著降低(P<0.01),GRP78、ATF6、CHOP、MMP-13蛋白及mRNA表达下调(P<0.05),COL2A1蛋白及mRNA表达上调(P<0.05)。结论:龟鹿二仙胶可通过ATF6/GRP78/CHOP信号通路抑制退变软骨细胞内质网应激(ERS)反应,调控细胞外基质(ECM)分解合成平衡,改善软骨细胞ER稳态,进而减少软骨细胞凋亡。

葵花盘的活性成分及药理作用研究进展

向日葵Helianthus annuus L.是我国主要的油料作物之一,种植面积居世界第六位。目前,对葵花籽的研究比较深入,而对葵花盘的研究才刚刚起步。葵花盘通常作为副产品而得不到有效利用,大部分被丢弃、焚烧或用于牲畜饲料,造成了资源的极大浪费并降低了其综合利用价值。随着科学技术的发展,研究发现葵花盘本身具有丰富的生物活性物质和广泛的药理作用。葵花盘富含挥发油类、黄酮类、绿原酸、果胶、粗蛋白等营养物质,可作为这些活性物质的提取原料。葵花盘具有抗氧化、抗肿瘤、抑菌、抗痛风等作用,因此具有十分广阔的应用前景。本文主要通过对葵花盘的生物活性成分、药理作用以及影响活性成分的主要因素等最新研究进行综述,旨在为葵花盘活性成分的深入研究与功能产品开发提供科学参考。

分子对接与体内验证联合探讨穿山龙复方对痛风模型大鼠TLR4/MyD88/NF-kB信号通路的影响

目的:探讨穿山龙复方对痛风性关节炎(GA)合并高尿酸血症(HUA)模型大鼠Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)(TLR4/MyD88/NF-κB)信号通路的影响。方法:先运用分子对接技术预测穿山龙复方中主要活性成分与TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关靶蛋白的分子间相互作用,再建立痛风性关节炎合并高尿酸血症大鼠复合模型进行体内实验验证。将48只雄性SD大鼠分为正常对照组、模型对照组、阳性对照秋水仙碱0.3 mg/kg组及穿山龙复方0.2、0.4、0.8 g/kg组。用尿酸钠、氧嗪酸钾和10%酵母饲料造模的同时,分别给予相应的药物灌胃。7 d后取材,测定踝关节肿胀度;HE染色观察踝关节病理学变化,血清白细胞介素-8(IL-8)、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;以Real-timePCR法测定大鼠踝关节中Tlr4、Myd88、Nfkb mRNA表达。结果:分子对接结果表明复方的主要活性成分与TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的靶蛋白均有良好的结合活性,其中薯蓣皂苷与TLR4结合活性最强。体内实验结果表明,与正常对照组相比,模型对照组大鼠血尿酸含量以及踝关节损伤程度均显著增加,血清IL-1、IL-8、TNF-α的含量显著升高(P<0.01),踝关节中Tlr4、Myd88、Nfkb mRNA表达显著上调(P<0.01);与模型对照组比较,穿山龙复方各剂量组和秋水仙碱组对GA&HUA复合模型大鼠血尿酸含量以及踝关节损伤程度显著减轻,血清中IL-1β、IL-8、TNF-α的含量显著降低(P<0.01),踝关节中Tlr4、Myd88、Nfkb mRNA表达显著下调(P<0.01)。结论:穿山龙复方可以通过调节TLR4/MyD88/NF-κB信号通路达到抗痛风性关节炎和高尿酸血症的作用。

基于DIA蛋白质组学技术联合PRM验证探讨去卵巢骨质疏松大鼠差异蛋白表达

目的:基于非数据依赖性采集(DIA)蛋白质组学联合平行反应监测(PRM)靶向质谱技术筛选去卵巢大鼠股骨组织的差异蛋白,寻找其中可能与骨质疏松(OP)发病相关的关键靶蛋白。方法:Wistar雌性大鼠16只,随机分为正常对照组和模型对照组各8只,模型对照组采用卵巢切除法建立骨质疏松症模型。12 w后双能X线骨密度仪测量大鼠全身骨密度(BDM);解剖分离股骨标本进行Micro-CT扫描和重建;对正常对照组和模型对照组大鼠股骨组织进行蛋白DIA定量分析,筛选差异蛋白并进行生物信息学分析,并采用PRM技术验证两组间差异蛋白。结果:造模12 w后,与正常对照组比较,模型对照组骨小梁数量(Tb.N)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、连接密度(Conn.D)均明显下降(P<0.05或P<0.01),骨小梁分离度(Tb.Sp)、结构模型指数(SMI)显著升高(P<0.01);Micro-CT三维重建可见骨小梁整体结构退变、体积减少、连接断裂;DIA检测鉴定出显著差异蛋白234个,其中上调蛋白162个,下调蛋白72个,KEGG通路富集显示这些差异蛋白主要参与粘着斑、RNA转运、TGF-β、等信号通路。对关键差异蛋白进行PRM建库分析,检测到27个候选蛋白,其中双特异性丝裂原活化蛋白激酶1(MAP2K1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、软骨寡聚基质蛋白(COMP)、等11个蛋白定量分析明显具有差异(P<0.05或P<0.01)。结论:OP大鼠股骨组织内有大量蛋白质差异表达,MAP2K1、GPX4、MAPK1、COMP等11个差异蛋白可能与骨质疏松发病密切相关。

基于网络药理学、分子对接技术与实验验证探讨定志小丸干预阿尔兹海默病的机制研究

目的:应用网络药理学联合分子对接技术探讨定志小丸干预阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease,AD)的作用机制。方法:通过TCMSP数据库及文献检索收集与查询定志小丸的组分化学成分信息;应用PubChem和SwissTargetPrediction数据库收集药物化学成分靶点、GeneCards数据库收集AD靶点;利用DAVID数据库对共有靶点进行基因本体(GO)功能及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;使用Cytoscape软件构建成分与靶点等相关网络图,以筛选主要成分与靶点进行分子对接研究。采用水迷宫实验、ELISA和Western blot法检测定志小丸干预APP/PS1小鼠的作用情况。结果:共整理得到定志小丸的52个成分及其对应的881个靶点,AD靶点9599个,二者共同靶点101个,富集分析发现共同靶点主要参与细胞活力、缺氧应答等生物过程,及PI3K/AKT信号通路、缺氧诱导因子-1(HIF-1)信号通路、肿瘤坏死因子(TNF)信号通路等。分子对接结果显示,人参的二十碳-11,14,17-三烯酸甲酯、石菖蒲的环阿屯醇、茯苓的麦角甾烷-7,22-二烯-3β-醇及远志的3,6’-二芥子酰基蔗糖等成分能与热激蛋白90家族α类别A成员1(Heat Shock Protein 90 Alpha Family Class A Member 1,HSP90AA1)、表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)、Janus激酶3(Janus kinase 3,JAK3)、丝裂原活化蛋白激酶8(Mitogen-Activated Protein Kinase 8,MAPK8)等靶点良好对接。试验结果发现定志小丸明显改善APP/PS1小鼠的学习记忆能力,降低4-羟基壬烯酸(4-HNE)、白介素-6(IL-6)、TNF-α含量,下调磷酸化Janus激酶3(p-JAK3)和HSP90的表达,明显增加超氧化物歧化酶(SOD)活力和上调磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸3-激酶催化亚单位α(PIK3CA)蛋白表达(P<0.05)。结论:定志小丸可能是通过二十碳-11,14,17-三烯酸甲酯、环阿屯醇、麦角甾烷-7,22-二烯-3β-醇和3,6’-二芥子酰基蔗糖等关键成分作用于HSP90、JAK3、PI3KCA等靶点改善神经元活力、氧化应激和减轻炎性反应,从而干预AD。

二仙汤含药血清外泌体经FN1促进成骨细胞骨形成

目的:探讨二仙汤含药血清外泌体蛋白的变化及其对成骨细胞骨形成的作用。方法:对二仙汤含药血清外泌体进行提取、鉴定。体外培养MC3T3-E1成骨细胞,分为正常对照组、空白血清外泌体2.5、5μg/mL组、二仙汤含药血清外泌体2.5、5、10μg/mL组。CCK8法检测成骨细胞增殖情况;碱性磷酸酶(ALP)染色法观察成骨细胞ALP;茜素红染色观察成骨细胞矿化结节;Western blot法检测细胞中骨形态发生蛋白2(BMP-2)蛋白表达。运用蛋白质组学技术对血清外泌体进行差异性蛋白分析。采用纤连蛋白(FN1)联合空白血清外泌体(3 nmol/L纤连蛋白+5μg/mL、12 nmol/L纤连蛋白+5μg/mL)处理成骨细胞,通过试剂盒检测成骨细胞ALP活力;Western blot法检测FN1对成骨细胞中BMP-2蛋白表达的影响。结果:与空白血清外泌体2.5μg/mL组相比,二仙汤含药血清外泌体组成骨细胞的增殖、ALP染色程度和茜素红染色程度明显升高(P<0.05或P<0.01),BMP-2的蛋白表达明显上调(P<0.05)。从血清外泌体中共鉴定到256个蛋白,其中96个蛋白属于ExoCarta外泌体蛋白质数据库。差异统计分析显示有29个蛋白表达有明显变化(P<0.05)。针对显著差异蛋白进行生物信息学分析,与差异蛋白质相关的分子功能、生物过程和信号通路主要涉及氧化还原、细胞外泌体、PI3K/AKT信号通路、补体和凝血级联反应等过程。显著差异性蛋白主要包括FN1、白蛋白(ALB)、血清对氧磷酶/芳基酯酶1(PON1)和簇蛋白(CLU)等。与空白血清外泌体5μg/mL组相比,纤连蛋白联合空白血清外泌体组(3 nmol/L纤连蛋白+5μg/mL、12 nmol/L纤连蛋白+5μg/mL)成骨细胞ALP活力显著升高(P<0.01),BMP-2的蛋白表达明显上调(P<0.05)。结论:二仙汤含药血清外泌体促进成骨细胞骨形成与血清外泌体中的蛋白变化有关,FN1在其中发挥重要作用。

基于PTEN/PI3K/AKT和线粒体凋亡信号通路探讨乳癖散结汤治疗乳腺增生大鼠作用机制

目的:研究乳癖散结汤对乳腺增生(MGH)大鼠的治疗作用及可能的作用机制。方法:MGH大鼠模型制作成功后,随机分为正常对照组、模型对照组、乳癖散结汤34、68 g/kg组、他莫昔芬0.004 g/kg组;大鼠分别灌胃给予相应的药物。给药8 w后,进行大鼠行为学观察、乳房直径和乳头高度测量,测定血浆中T淋巴细胞亚群(CD^(3+)、CD^(4+)、CD^(8+))、血清性激素[雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)、黄体生成激素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、泌乳激素(PRL)]含量,取乳腺进行乳腺组织细胞线粒体细胞色素C(Cyto C)释放、乳腺组织形态学分析,采用Real-time PCR检测乳腺组织中线粒体凋亡信号通路的mRNA表达情况;采用Western blotting检测乳腺组织中磷酸酯酶与张力蛋白同源物/磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PTEN/PI3K/AKT)和线粒体凋亡信号通路相关蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠行为学评分、乳房直径、乳头高度显著增加,乳腺导管上皮细胞增生层数和乳腺组织病理学评分增加,血浆中CD^(8+)T淋巴细胞亚群、血清E2、LH、FSH、PRL和乳腺组织中Cyto C含量及E2/P、E2/T比值升高,Pcna、Bcl2、Bclxl mRNA表达和Bcl-2/Bax、Bcl-xl/Bad比值升高,pro-Caspase-3、pro-Caspase-9蛋白表达上调,p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT比值显著升高(P<0.01);血浆中CD^(3+)、CD^(4+)T淋巴细胞亚群、P、T含量,乳腺组织中Cyto C含量及CD^(4+)/CD^(8+)比值显著降低,Bax、Bad、Apaf1 mRNA表达下调,PTEN、cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9和cleaved-PARP-1蛋白表达显著下调(P<0.01);用乳癖散结汤34、68 g/kg治疗后,上述指标被明显逆转(P<0.05或P<0.01)。结论:乳癖散结汤对MGH大鼠具有较好的治疗作用,其作用机制可能与其增强免疫功能、调节性激素及PTEN/PI3K/AKT信号通路,从而促进线粒体途径介导的细胞凋亡密切相关。

夏天无调控VEGF/VEGFR2通路改善VD大鼠学习记忆能力的机制研究

目的:基于VEGF/VEGFR2通路探讨夏天无改善血管性痴呆大鼠学习记忆的相关作用机制。方法:选取10 w~12 w龄清洁级健康雄性SD大鼠,采用改良双侧颈总动脉结扎(2-VO)法制备VD动物模型,随机分为:模型对照组、尼莫地平0.01 g/kg组及夏天无0.2、0.4、0.8 g/kg组,另设假手术对照组。连续灌胃40 d后,通过Morris水迷宫观察各组大鼠神经行为学差异,HE染色观察其病理改变,免疫组织化学法检测CD34、VEGF及VEGFR2的蛋白阳性表达变化。结果:与假手术对照组比较,模型对照组大鼠学习记忆能力明显降低,相关皮质及海马区内神经细胞均存在不同程度的病理损伤,VEGF及VEGFR2阳性表达增强,微血管密度增大(P<0.01);与模型对照组比较,各治疗组学习记忆能力均明显提高(P<0.05或P<0.01),神经细胞损伤得到不同程度改善,CD34、VEGF及VEGFR2阳性表达明显增强(P<0.05或P<0.01),微血管密度明显增大(P<0.05或P<0.01)。结论:夏天无一定程度上可改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力,其机制可能与增强脑组织内VEGF及VEGFR2蛋白表达,增大微血管密度,改善血液供应,从而增强对神经元的保护作用有关。

基于网络药理学分析土茯苓-石韦药对治疗衰老相关慢性肾脏病的作用机制

目的:采用网络药理学方法和实验验证,分析土茯苓-石韦药对治疗衰老相关慢性肾脏病(aging-related chronic kidney disease,ARCKD)的有效成分、潜在作用靶点及机制,为其临床应用提供理论基础。方法:借助中药系统药理学数据库及分析平台(TCMSP)筛选该药对的有效成分,使用TCMSP、STITCH和SWISS数据库获取该药对的潜在作用靶点,并利用UniProt数据库将靶点蛋白规范化。利用The Human Phenotype Ontology、DisGeNET和Therapeutic Target Database(TTD)数据库进行疾病靶点筛选后,与药物靶点交集获取ARCKD的潜在作用靶点。通过Cytoscape软件构建“药物-活性成分-靶点”网络,将潜在作用靶点导入STRING数据库再构建蛋白互相作用(PPI)网络,进行深入分析。通过DAVID平台进行基因本体(GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,并检测马兜铃酸(AAI)模型小鼠的肾功能和病理染色,检测马兜铃酸诱导的NRK-52E细胞肿瘤蛋白P53(TP53)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(P21)、α平滑肌激动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)的表达。结果:土茯苓-石韦药对治疗衰老相关慢性肾脏病的有效成分有17个,潜在作用靶点112个,PPI靶点筛选分析获得核心靶点6个,重要靶点27个,次要靶点36个,构成以TP53为中心的复杂作用网络。GO功能富集涉及532个条目,主要影响衰老、氧化还原、炎症应答、细胞增殖的正性调节等过程;KEGG通路富集获得137条,涉及P53、癌症、NF-κB和AMPK等相关通路。动物实验结果表明,与模型对照组相比,土茯苓-石韦药对及槲皮素能改善小鼠的血肌酐、尿素氮、尿酸、尿蛋白及病理损伤;细胞实验结果证实,该药对的共有活性成分(槲皮素)能改善马兜铃酸诱导的细胞衰老与损伤,下调P53、P21、α-SMA、Vimentin蛋白的表达。结论:土茯苓-石韦药对以TP53为核心的复杂网络调节发挥肾脏保护作用,槲皮素是其关键活性成分。该药对和槲皮素能改善AAI模型小鼠肾功能以及肾脏病理损伤,其中槲皮素可有效改善AAI诱导的细胞衰老与损伤,其机制可能与下调P53信号通路有密切关系。

基于AHP-灰色加权关联度分析法的中医无名方综合评价与筛选体系建立研究

目的:建立中医无名方综合评价与筛选体系,为民间方药的临床应用及研究提供参考。方法:构建以无名方综合评价为目标层,以“合理性”“实用性”“经济性”“安全性”“数据挖掘”为一级指标,涵盖20个二级指标的无名方评价指标体系。利用层次分析法(AHP)确定指标权重,运用灰色加权关联度分析法对40首治疗痛经的无名方进行综合评价并排序。结果:根据权重结果,一级指标的重要程度排序为“实用性”>“合理性”>“安全性”>“经济性”>“数据挖掘”,二级指标综合权重前两位分别是“主治”和“功效”。根据灰色加权关联度分析法结果,治疗痛经无名方综合排序第一的是方40,灰色加权关联度为0.95975,综合排序最后的是方20,灰色加权关联度为0.88221。结果与方剂实际的优劣情况及专家评价相符。结论:本文建立的无名方综合评价及筛选体系,将AHP层次分析法和灰色加权关联度分析法相结合,为方剂综合评价提供了一个科学简便有效的途径。

脾阳虚证实验研究及临床相关疾病关键问题分析

脾乃后天之本,元气之母,主司运化之职,是机体消化饮食、吸收输布水谷精微和代谢津液的枢纽。《金匮要略》有云:“四季脾旺不受邪”,脾运化有常则卫阳可护,护卫机体不受外邪之侵扰,故脾之健旺对人体基本生理功能的维持及抗御邪气起着至关重要的作用。近年来,学者以中医药理论为指导,结合现代科学技术与研究方法,对脾阳虚证的常见生化指标以及造模方法开展了较为广泛的研究。本文立足中医药理论,研究整理了脾阳虚证在“不运”、“不温”和“不御”层面的证候表现以及常见生化指标,分析总结了脾阳虚证的造模方法及存在问题,并探讨脾阳虚与多种慢性疾病发展过程中的关联,以期深入阐释脾阳虚证的中医学本质,同时为脾阳虚证的现代实验研究以及相关疾病的治疗提供参考。

清肺活瘀方治疗儿童难治性支原体肺炎的临床效果观察

目的:观察清肺活瘀方治疗儿童难治性支原体肺炎(RMPP)的临床疗效及安全性。方法:采用随机分组方法,将72例RMPP患儿分成对照组和治疗组各36例,对照组静脉滴注阿奇霉素[10 mg/(kg·d),首次用5 d,停4 d,再用3 d],治疗组在对照组的基础上予清肺活瘀方(8 mL/kg,分3次口服,1日3次),两组治疗观察疗程均为14 d,比较两组患儿治疗前后的发热及咳嗽消失时间、疾病总有效率、中医证候评分、安全性及血小板(PLT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、血浆凝血酶时间(TT)、D-二聚体(D-D)的变化情况。结果:治疗组在缩短发热和咳嗽时间上均优于对照组(P<0.05或P<0.01);两组中医证候总有效率和疾病总有效率比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗组两者显愈率高于对照组(P<0.05);与治疗前比较,两组发热、咳嗽、痰壅、气喘症状评分均显著降低(P<0.01),且治疗组咳嗽、痰壅症状评分低于对照组(P<0.05);与治疗前相比,两组D-D水平及治疗组PLT水平降低(P<0.05),两组APTT、TT、FIB及对照组PLT均无明显改善(P>0.05),治疗后,治疗组D-D、PLT水平低于对照组(P<0.05)。结论:清肺活瘀方对儿童难治性支原体肺炎具有一定疗效,且可在一定程度上改善RMPP患儿的高凝状态。

基于数据挖掘的高血压性眩晕医案辨证用药特点分析

目的:基于数据挖掘技术研究高血压性眩晕组方用药规律,归纳辨治特色,指导临床运用。方法:通过检索各数据库中医家医案文献,构建方药数据库,通过SPSS Modeler 18.0、SPSS Statistics 22.0、中医传承辅助系统平台(V2.5)对组方用药进行频次统计、关联规则、复杂网络、系统聚类、熵层次聚类新方及主成分因子分析。结果:253首处方涉及中药258味,涵盖7个病位证素和13个病性证素;挖掘出用药频次大于平均频次的药物61味,高频中药是天麻、钩藤、甘草、茯苓、白芍、牛膝,病位证素以肝、脾、肾为主,病性证素以阳亢、阴虚、痰、动风、血瘀、湿为主;当最小支持度为10%,最小置信度为75%,得到药对关联组合19项,当最小支持度为10%,最小置信度为90%,得到三项关联组合20项;复杂网络生成核心组方为天麻、钩藤、半夏、茯苓、牛膝、白术、石决明、甘草;系统聚类得到龙骨、牡蛎等16组药物聚类组合,熵层次聚类得到10个中药新处方,主成分因子分析共提取出22个公因子。结论:高血压性眩晕多属本虚标实之证,病机多见阴虚阳亢动风,治疗以滋阴平肝、熄风止眩为基本法则,随证搭配。

黄精GC-MS指纹图谱及体外抗病毒活性的谱效关系研究

目的:构建基于抗流感病毒活性的黄精的质量生物评价方法,筛选黄精潜在的抗流感病毒的活性物质。方法:采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法,建立10批黄精药材的指纹图谱;使用抗流感病毒神经氨酸酶(NA)效价试剂盒,检测黄精提取物对NA的体外抑制活性,并应用生物效价计算软件计算黄精药材的生物效价;通过SPSS软件得到指纹图谱特征峰的峰面积与生物效价值之间的相关性,从而筛选出与黄精药材的抗病毒活性的相关系数高的化合物。结果:建立28个共有峰的GC-MS指纹图谱;并得到黄精药材提取物对NA的抑制作用曲线,其效价范围为0.138 U/mg~0.649 U/mg,相关性结果表明,有13个化合物具有较高相关性。结论:建立了黄精的抗流感病毒的质量生物评价方法,使黄精的质量评价能够关联其功效;筛选出相关性高的化学成分,为揭示黄精抗病毒的药效物质,以及抗病毒药物的筛选提供依据。

单向在体肠灌流模型研究“丹参-红花药对”中主要活性成分肠转运特征

目的:探讨丹参-红花药对中主要活性成分的肠吸收特征。方法:采用大鼠在体单向肠灌流模型,以吸收速率常数(Ka)和表观吸收系数(Papp)为评价指标,研究丹酚酸B、羟基红花黄色素A两个主要成分在十二指肠、空肠、回肠和结肠不同肠段的吸收情况;在吸收最佳的肠段考察质量浓度、P-糖蛋白(P-gp)抑制剂盐酸维拉帕米、多药耐药蛋白相关蛋白2(MRP2)抑制剂丙磺舒和能量抑制剂2,4-二硝基苯酚对上述两个成分肠吸收的影响。结果:丹酚酸B和羟基红花黄色素A在各肠段均有吸收,且回肠的吸收最佳;在回肠段:丹酚酸B和羟基红花黄色素A的吸收在实验质量浓度范围内(2 mg/mL^6 mg/mL)具有浓度依赖性;和不含抑制剂的组比较,盐酸维拉帕米(100 mg/mL),丙磺舒(12 mg/mL, 24 mg/mL)和2,4-二硝基苯酚(20 mg/mL^60 mg/mL)对丹酚酸B和羟基红花黄色素A的Ka和Papp均有明显影响(P<0.05)。结论:在回肠段:在实验浓度范围内丹酚酸B和羟基红花黄色素A的吸收均有能量依赖性,吸收机制可能属于主动吸收;丹酚酸B和羟基红花黄色素A可能是P-糖蛋白和多药耐药蛋白相关蛋白2的底物。

免疫组库多样性在中医药治疗心脑血管疾病中的应用展望

心脑血管疾病严重威胁着当今人类的生命健康,尽管通过中西医结合的治疗手段,在心脑血管疾病的防治上取得了一定成效,但其依然具有很高的发病率,致残率,死亡率。动脉粥样硬化是心脑血管疾病的主要病因,而近年来的研究认为,动脉粥样硬化是一种慢性炎症,与机体的免疫状况大有关联,尤其是T淋巴细胞驱动的适应性免疫炎症反应与动脉粥样硬化的发生和斑块不稳定性有关。因此本文认为在当今大数据时代,免疫组库多样性测序也有望成为心脑血管患者治疗过程中的重要数据信息,可应用于心脑血管患者的早期诊断,风险分层,用药指导,预后评估,也有助于对中医药治疗心脑血管疾病的临床疗效进行更科学客观的评估。

性别差异对补骨脂素体内吸收和分布的影响

目的:研究补骨脂素(psoralen)在雌雄大鼠体内药代动力学和组织分布特征,探讨性别差异对补骨脂素体内吸收和分布的影响。方法:80 mg/kg剂量灌胃给予雌雄大鼠补骨脂素溶液后,于不同时间点采集血液和主要脏器(肝、肾、心、脾、肺),运用HPLC对生物样品中药物浓度进行测定,绘制药物浓度-时间曲线,DAS2.0计算药动学参数。结果:补骨脂素在大鼠体内血浆药代动力学和组织分布特征具有性别差异。血浆药代动力学结果中,补骨脂素在雌雄大鼠血浆中AUC0-t有显著差异(P<0.01),分别为(259.81±52.54)和(103.79±18.69)mg·h/L(P<0.01),Cmax分别为(21.78±2.85)和(9.32±1.43)mg/L,MRT0-t有明显差异(P<0.05),分别为(7.86±0.21)和(8.41±0.38)h。组织分布结果发现,补骨脂素在肝肾组织中暴露量远高于其他组织(P<0.01)。其中,补骨脂素在雌雄大鼠肝脏中AUC0-t有明显差异(P<0.05),分别为(323.73±18.19)和(288.35±33.55)mg·h/L,肾脏中AUC0-t有明显差异(P<0.01),分别为(291.58±21.19)和(258.40±13.15)mg·h/L。结论:性别差异会对补骨脂素的体内吸收和分布产生一定影响,其中雌性大鼠血浆和肝肾组织中分布含量高于雄性,提示在补骨脂素用药过程中应注意上述差异带来的影响。

中药注射剂联合FOLFOX4化疗方案治疗胃癌的贝叶斯网状meta分析

目的:采用贝叶斯网状Meta分析评价8种中药注射剂联合FOLFOX4治疗胃癌(Gastric Cancer,GC)的疗效。方法:检索Pubmed、EMbase、中国生物医学文献数据库(CBM)、维普、万方和中国知网等数据库的中药注射剂联合FOLFOX4治疗GC的随机对照试验(RCTs),按纳入与排除标准筛选,对纳入RCTs做质量评价,采用Stata14.0、WinBugs软件进行数据分析。结果:共纳入8种中药注射剂,24个RCTs共1844例胃癌患者。结果显示:以FOLFOX4化疗方案为共同干预措施,8种中药注射剂在化疗总有效率和患者生存质量、降低恶心呕吐和白细胞减少发生率均有优于单纯化疗的趋势,但仅有部分中药注射剂与单纯化疗方案的差异有统计学意义。不同中药注射剂之间的各项结局指标差异无统计学意义。概率排序显示,在提高化疗总有效率及减少恶心呕吐发生率方面,鸦胆子油乳注射液排第一位;在提高生存质量和白细胞减少发生率方面,复方苦参注射液和华蟾素注射液分别各排第一位。结论:相较于其他5种中药注射剂,鸦胆子油乳注射液、复方苦参注射液及华蟾素注射液成为最优选择的概率最大。