miR-592靶向调控PRDM5影响肾细胞癌侵袭转移及自噬的机制研究

目的探究miR-592靶向调控PR结构域锌指蛋白5(PR domain zinc finger protein 5,PRDM5)影响肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)侵袭转移及自噬的机制。方法RT-qPCR、蛋白质印迹检测RCC组织和细胞中miR-592、PRDM5 mRNA和蛋白水平。A498、786-O细胞分为anti-miR-NC组、anti-miR-592组、anti-miR-592+si-NC组、anti-miR-592+si-PRDM5组。RNA免疫共沉淀(RIP)检测miR-592和PRDM5的结合;CCK-8、Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力;透射电镜观察自噬小体形成;蛋白质印迹检测细胞PRDM5、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、Beclin1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ/Ⅰ水平。建立移植瘤裸鼠模型,分析敲低miR-592表达对移植瘤生长的影响。结果RCC组织和细胞中PRDM5 mRNA和蛋白水平降低,miR-592水平增加(P<0.05)。敲低miR-592表达后,细胞A_(450 nm)、迁移和侵袭细胞数、MMP-2、MMP-9水平降低,自噬小体数量、Beclin1、LC3Ⅱ/Ⅰ水平增加(P<0.05)。敲低PRDM5表达能部分逆转敲低miR-592对细胞增殖、侵袭及自噬的影响(P<0.05)。敲低miR-592表达能够抑制裸鼠移植瘤生长(P<0.05)。结论miR-592通过靶向抑制PRDM5表达,促进RCC细胞增殖、侵袭转移能力,并抑制自噬能力。

贯叶连翘提取物对自身免疫性心肌炎大鼠心肌损伤的保护作用及心肌胶原代谢的影响

目的探究贯叶连翘提取物(Hypericum perforatum extract,HPE)对实验性自身免疫性心肌炎(experimental autoimmune myocarditis,EAM)大鼠心肌损伤的保护作用及心肌胶原代谢的影响。方法6周龄Lewis大鼠采用猪心肌肌球蛋白乳浊液后足垫皮下注射建立EAM模型,将EAM模型大鼠随机分为模型组和HPE低、中、高剂量组各10只,各组大鼠采用灌胃给药方式每次对应给予生理盐水及20、50、100 mg/kg HPE灌胃,每天2次,共28 d,另设空白对照组按照同疗程给予生理盐水。观察大鼠临床表现,测定心脏重量(HW)、体重(BW),计算BW/HW;HE染色后光学显微镜下观察大鼠心脏病理学变化;经超声心动图检测心脏参数左室舒张末内径(left ventricular end-diastolic diameter,LVEDD)、左室收缩末内径(left ventricular end-systolic diameter,LVESD)、左室短轴缩短率(left ventricular fraction shortening,LVFS)、左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF);检测大鼠血清心肌损伤指标[肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、心肌钙蛋白T(cTnT)]、胶原代谢指标(Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白)水平,蛋白质印迹测定心肌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子(TGF-β1)蛋白水平。结果对比空白对照组,EAM模型大鼠LVEDD、LVESD、HW/BW、CK-MB、cTnT、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白、TNF-α和TGF-β1蛋白水平均升高,LVFS、LVEF水平均降低,心肌组织病理学评分增加,差异有统计学意义(P<0.05);HPE给药后,HPE低、中、高剂量组LVEDD、LVESD、HW/BW、CK-MB、cTnT、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白、TNF-α和TGF-β1蛋白水平均降低,心肌组织病理学评分减少,LVFS、LVEF水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论中药贯叶连翘提取物能改善EAM模型大鼠心肌损伤,可能与其抑制心肌组织炎症反应、减少胶原蛋白沉积有关。

tRNA衍生的小RNA在肿瘤中的研究进展

tRNA衍生的小RNA(transfer RNA-derived small RNA,tsRNA)是一种在人体组织中稳定表达的新型非编码RNA。目前已知两种tsRNA亚型:tRNA半分子和tRNA衍生片段。高通量测序技术的发展和应用为肿瘤中tsRNA的失调提供了越来越多的证据。tsRNA在肿瘤组织中的异常表达已经被发现与肿瘤的增殖、侵袭和进展有关。这些新发现的tsRNA有很大的潜力作为新的生物标志物和肿瘤治疗的靶点。综述就tsRNA在肿瘤中的最新研究进展进行论述并讨论其潜在临床价值。

急性呼吸窘迫综合征患者血清Eotaxin-1、S1PR1的表达及其与预后的关系

目的探讨急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)患者血清嗜酸性粒细胞趋化因子-1(eosinophil chemotactic factor 1,Eotaxin-1)、内皮细胞表面鞘氨醇-1-磷酸受体1(sphingosin-1-phosphate receptor 1,S1PR1)表达及其与预后的关系。方法选取2019年2月至2022年2月南京脑科医院收治的ARDS患者140例,按照氧合指数(PaO_(2)/FiO_(2))不同分为轻度组(201~300 mmHg)(n=43)、中度组(101~200 mmHg)(n=40)和重度组(≤100 mmHg)(n=57);另选取同时期体检的50例健康者作为对照组。根据患者28 d预后情况将患者分为存活组95例与死亡组45例。利用APACHE-Ⅱ对ARDS患者进行评分。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组人群血清Eotaxin-1、S1PR1水平;采用Pearson相关性分析ARDS患者血清Eotaxin-1和S1PR1水平与APACHE-Ⅱ评分、肺损伤评分及PaO_(2)/FiO_(2)间的相关性;使用ROC曲线分析Eotaxin-1、S1PR1对ARDS患者预后不良的预测价值;采用logistic回归分析影响ARDS患者预后不良的危险因素。结果与对照组比较,ARDS组血清Eotaxin-1水平升高,S1PR1水平降低(P<0.05),与轻度组比较,中度组、重度组ARDS患者血清Eotaxin-1水平显著升高(P<0.05),血清S1PR1水平显著降低;与中度组比较,重度组ARDS患者血清Eotaxin-1水平显著升高,血清S1PR1水平显著降低(P<0.05);死亡组患者血清Eotaxin-1水平显著高于存活组,血清S1PR1水平显著低于存活组(P<0.05);经Pearson法分析血清Eotaxin-1与APACHE-Ⅱ评分、肺损伤评分呈正相关,与PaO_(2)/FiO_(2)呈负相关(P<0.05),S1PR1水平与APACHE-Ⅱ评分、肺损伤评分呈负相关,与PaO_(2)/FiO_(2)呈正相关(P<0.05);ROC分析显示,Eotaxin-1预测ARDS患者预后不良的曲线下面积(AUC)为0.867,截断值为104.348 pg/mL,敏感性为87.9%,特异性为82.0%;S1PR1预测ARDS患者预后不良AUC为0.849,截断值为71.099 pg/mL,敏感性为89.3%,特异性为80.0%;logistic回归分析表明,高Eotaxin-1水平、低S1PR1水平是影响ARDS患者预后不良的危险因素(P<0.05)。结论ARDS患者血清Eotaxin-1升高、S1PR1水平下降与病情严重程度、不良预后有关,有望作为ARDS患者病情评估和预后评估的辅助指标。

c-Ski调控p38信号通路在TGF-β1介导人冠状动脉内皮细胞内皮间充质转化中的作用研究

目的探索c-Ski蛋白在人冠状动脉内皮细胞内皮间充质转化过程中的表达特征及其调控p38信号通路的机制,为心肌纤维化提供新的预防和治疗的靶点。方法以人冠状动脉内皮细胞(human coronary artery endothelial cells,HCAECs)为研究对象,采用转化生长因子β1(transforming growth factor-beta1,TGF-β1)诱导构建内皮细胞间充质转化模型,利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,Q-PCR)、蛋白免疫印迹法检测c-Ski和内皮间充质转化相关标志物的表达。结果Q-PCR和Western印迹实验结果显示,c-Ski表达水平随着TGF-β1诱导浓度的增高而显著降低(P<0.05)。过表达c-Ski后,TGF-β1诱导的vimentin、α-SMA的表达降低,CD31的表达升高,表明TGF-β1诱导的HCAECs细胞内皮间充质转化被抑制。p38选择性抑制剂SB203580处理后,HCAECs细胞内皮间充质转化程度进一步加深;c-Ski过表达后,p38通路被激活;p38选择性抑制剂SB203580可一定程度回复c-Ski过表达对TGF-β1诱导的HCAECs细胞内皮间充质转化的抑制作用(P<0.05)。结论c-Ski可通过调控p38信号通路抑制TGF-β1介导人冠状动脉内皮细胞内皮间充质转化。

罗哌卡因对STZ诱导的糖尿病大鼠胰岛素抵抗和肝肾损伤的保护作用

目的研究罗哌卡因对链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)和肝肾损伤的保护作用.方法以Sprague-Dawley(SD)大鼠为实验对象,分为对照组、模型组、罗哌卡因处理组(低0.5 mg/kg,中1 mg/kg,高2 mg/kg).测定血糖和空腹血清胰岛素水平;HE染色观察肝肾组织病理损伤;通过检测肝脏损伤指标和肾脏损伤指标评估肝脏损伤和肾脏损伤;Western印迹检测凋亡蛋白Caspase-3和Bax/Bcl-2的表达;ELISA检测外周血中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)和IL-4的含量.结果模型组大鼠体内血糖和胰岛素水平显著升高,体重和肥胖指数增加.模型大鼠肝肾脏组织出现较严重的病理损伤,且肝肾功能受损,炎性因子水平升高并促进肝肾组织凋亡.然而,罗哌卡因处理逆转了大鼠体内IR并缓解了肝肾脏损伤.结论罗哌卡因对STZ诱导的DM大鼠胰岛素抵抗和肝肾损伤的保护作用.

FOSL1通过ITGA6/PI3K/AKT途径参与儿童呼吸哮喘疾病

目的探究FOS样抗原1(FOS-like antigen 1,FOSL1)对哮喘中气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)增殖与迁移的作用及其分子机制。方法建立TGF-β1诱导的ASMCs模型,并采用CCK-8试剂盒检测细胞活力。使用qRT-PCR和Western印迹方法检测FOSL1及ITGA6的表达量。MTT法、Transwell试验、qRT-PCR和Western印迹方法被用于测定ASMCs细胞增殖、迁移及其过程中关键蛋白的表达量。结果TGF-β1诱导下,ASMCs细胞中的FOSL1表达量上升。沉默FOSL1后,ASMCs细胞的增殖及迁移能力降低,并且细胞增殖过程中关键蛋白细胞核增殖因子及细胞核增殖抗原,迁移过程中关键蛋白基质金属蛋白酶-2及基质金属蛋白酶-9的表达量均显著降低。沉默FOSL1降低ITGA6的表达量。过表达ITGA6及IGF-1/SC79(PI3K/AKT信号通路激活剂)可部分程度上缓解沉默FOSL1导致的ASMCs细胞增殖及迁移能力的降低。结论FOSL1可通过ITGA6/PI3K/AKT通路调节气道平滑肌细胞的增殖及迁移能力,进而影响儿童呼吸哮喘的疾病进程。

姜黄素协同二甲双胍抑制人宫颈癌细胞增殖及作用机制

目的探究姜黄素协同二甲双胍抑制人宫颈癌细胞增殖及作用的机制.方法体外培养人宫颈癌HeLa细胞,采用MTT法检测不同浓度的姜黄素及二甲双胍对HeLa细胞抑制率并绘制12、24及48 h细胞抑制率曲线;将各组HeLa细胞分为空白对照组、姜黄素组、二甲双胍组和联合组;姜黄素组使用25μmol/L的姜黄素处理,二甲双胍组使用1 mmol/L的二甲双胍处理,联合组使用25μmol/L的姜黄素+1 mmol/L的二甲双胍处理;采用克隆形成实验检测各组HeLa细胞的增殖情况;使用WB检测增殖相关蛋白Ki67和PCNA表达情况;使用流式细胞仪检测各组细胞不同细胞周期的细胞占比.结果MTT法检测发现在一定浓度范围内,姜黄素及二甲双胍对HeLa细胞抑制率呈浓度依赖性,姜黄素对宫颈癌细胞的半数致死浓度(IC50)为25.97μmol/L,二甲双胍对宫颈癌细胞的IC50为0.985 mmol/L;相比空白对照组,姜黄素组和二甲双胍组宫颈癌HeLa细胞克隆形成率、Ki67蛋白相对表达量、PCNA蛋白相对表达量和S期细胞比例显著降低(P<0.05),G0/G1期、G2/M期细胞比例和细胞凋亡率显著升高(P<0.05);相比姜黄素组和二甲双胍组,联合组宫颈癌HeLa细胞克隆形成率、Ki67蛋白相对表达量、PCNA蛋白相对表达量和S期细胞比例显著降低(P<0.05),G0/G1期、G2/M期细胞比例和细胞凋亡率显著升高(P<0.05).结论姜黄素协同二甲双胍可以抑制人宫颈癌细胞增殖,其作用机制可能与抑制增殖相关蛋白表达并将宫颈癌HeLa细胞阻滞于G0/G1期.

氧化槐果碱上调Nrf2/HO-1/NQO1通路及抑制NF-κB的活化缓解脑缺血再灌注大鼠氧化损伤和炎性反应

目的研究氧化槐果碱(oxysophocarpine,OSC)对脑缺血再灌注大鼠氧化损伤和炎性反应的缓解作用。方法采取线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型,造模后24 h后分别灌胃给药OCS 0.25、1、4 mg/kg,给药10 d后,比较各组大鼠的神经功能评分、脑组织形态结构、氧化应激指标、炎症指标、凋亡相关蛋白、Nrf2/HO-1/NQO1通路及NF-κB蛋白表达水平。结果OSC干预后,模型大鼠的神经功能评分、MDA、LDH、IL-6、IL-1β、Caspase-3、Bax表达水平、NF-κB表达水平均明显降低(P<0.05),而SOD、IL-10、IL-4、Bcl-2、Nrf2、HO-1、NQO1表达水平较显著升高(P<0.05)。结论OSC可能通过上调Nrf2/HO-1/NQO1通路和抑制NF-κB的活化缓解脑缺血再灌注引起氧化损伤和炎性反应。

异鼠李素调控卵巢癌细胞生长、凋亡和氧化应激反应的机制

目的研究异鼠李素(isorhamnetin,ISO)对人卵巢癌SKOV3细胞生长、凋亡及氧化应激的调控机制.方法用ISO对卵巢表面上皮细胞系进行浓度梯度试验,以不影响细胞活力的不同浓度ISO处理SKOV3细胞,检测各组细胞的细胞增殖活性、侵袭率、凋亡率及相关蛋白表达,并检测氧化应激通路蛋白酶相关表达情况.结果浓度梯度试验显示35μmol/L处理时HOSE细胞的增殖活性受到明显抑制(P<0.05);用不同剂量ISO处理SKOV3细胞后,细胞增殖活性、侵袭率、ROS、MDA水平显著降低,细胞凋亡率、SOD、Gpx显著升高(P<0.05);Ki67、PCNA、N-cadherin、Vimentin、Bcl-2、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达水平均随ISO浓度升高而降低(P<0.05),E-cadherin、Bax、Caspase-3、Caspase-9、Keap1均随ISO浓度升高而升高(P<0.05).结论ISO可能通过抑制Nrf2通路激活降低氧化应激来抑制卵巢癌细胞的增殖、侵袭并促使细胞凋亡.

携带小鼠β-珠蛋白基因的安全性慢病毒载体的优化研究

目的 对基因治疗β-地中海贫血 ( β-thalassemia, 简称β-地贫) 的安全性自删除慢病毒载体进行优化.方法 通过对比3种启动子预测软件的分析结果, 设计并构建包含3种不同长度的小鼠珠蛋白基因 (β-globin) 启动子的表达载体;在Cos7细胞水平上检验其报告基因及小鼠β-珠蛋白基因的表达效率.随后, 进行安全性慢病毒载体的构建及病毒包装, 并在细胞水平检验了其自删除效率及表达β-珠蛋白基因的效果.结果 长度为750 bp的小鼠β-globin启动子表达效果最佳, 且所构建的慢病毒载体Lenti-Mhbb经病毒包装, 在细胞水平可有效的进行功能性表达及自删除.结论 优化了基因治疗β-地贫的安全性自删除慢病毒载体.

连翘昔对ACLT诱导的骨关节炎大鼠模型软骨组织损伤和TGF-β活性的调节作用

目的以前交叉韧带切断术(anterior cruciate ligament transection, ACLT)诱导的骨关节炎(osteoarthritis,0A)大鼠为模型,研究连翘昔(forsythin )对软组织损伤和转化生长因子β( transforminggrowth factorβ, TGF-β)活性的影响、方法将20只SD雄性大鼠随机分成4组:健康对照组(Ctrl)、连翘昔单独加药组(Forsythin)、模型组(OA model)和模型加药组(OA + Forsythin),每组5只。膝前交叉韧带切断建立骨关节炎模型。按50mg/kg的剂量,腹腔注射连翘昔,1次/d,共4周。苏木伊红染色(hematoxylinand eosin, HE)观察软骨损伤;番红ο染色和马森三色染色(MASSON)观察软组织损伤和纤维增生情况蛋白质印迹检测基质金属蛋白酶13 (matrix metalloproteinase 13, MMP-13)、Ki67和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3 , Caspase-3)的表达。酶联免疫吸附法(enzymelinked immunosorbent assay, ELISA)检测炎性因子肿瘤坏死因子 a ( tumor necrosis factor α, TNF-α、IL-6、IL-10和诱导性一氧化氮舎酶(induced-Nitric oxide synthase, iNOS)的表达。蛋白质印迹检测TGF-β1、SMAD2和P-SMAD2的表达.结果模型组与对照组相比,软骨组织出现明显损伤,纤维增多;MMP-13和Caspase-3的表达显著上调,Ki67的表达显著下调;TNF-α、IL-6和iNOS的含量显著上升,11,-10的含量没有明显变化;TGF-β1表达显著上调,p-Smad2/Smad2比率明显上升。模型加药组与模型组相比,软骨组织损伤明显减轻,纤维化明显改善;MMP-13和Caspase-3的表达显著下调,Ki67的表达显著上调;TNF-α,IL-6和iNOS的含量显著降低,IL-10的含量没有明显变化;TGF-β1表达显著下调,p-Smad2/Smad2比率明显降低结论连翘昔缓解ACLT诱导的骨关节炎大鼠模型软骨组织损伤,调节TGF-β的活性。

Six1基因在乳腺癌组织表达及RNA干扰其表达对癌细胞增殖侵袭能力的影响

目的探讨Sixl基因在乳腺癌组织表达及RNA干扰其表达对癌细胞增殖侵袭能力的影响。方法通过RT-PCR及Western印迹分别检0n,4Sixl在乳腺癌组织的mRNA及蛋白表达；通过脂质体Lipofectami．neTM2000将Sixl的小干扰RNA（siRNA）（Sixl-siRNA组）转染人乳腺癌MDA-MB．231细胞，设置空白对照组和阴性对照组（NC组），转染48h后检测各组细胞中Sixl的蛋白表达；细胞计数试剂盒（CCK8）法检测细胞活力，Transwell小室检测细胞侵袭能力；Western印迹检测细胞增殖蛋白ki67、侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）及信号转导与转录因子3（STA33）和磷酸化的STAT3的蛋白表达。结果乳腺癌组织中Sixl的mRNA及蛋白表达均显著高于癌旁组织（P〈0．05）；转染Sixl的siRNA组细胞Sixl的蛋白表达显著低于空白对照组（P〈0．05）；与空白对照组比较，Sixl-siRNA组细胞活力及侵袭能力均显著低于空白对照组，ki67、MMP-2、MMP-9和p-STAT3蛋白表达均显著低于空白对照组（P〈0．05），3组间STAT3的蛋白表达无显著性差异（P〉0．05）。结论乳腺癌组织中Sixl高表达．抑制其表达可通过下调STAT3信号降低细胞的活力及侵袭能力。

唐氏综合征患儿线粒体基因组突变的分析

目的 研究唐氏综合征中线粒体DNA突变情况.方法 采用高通量测序和焦磷酸测序检测7个唐氏综合征（Down＇s syndrome,DS）家系中的患儿和母亲的线粒体基因组序列,分析线粒体基因组序列的变化情况.结果 ①DS患儿中检测到36个与其母亲中不同的线粒体DNA突变,其中14个位点是首次在唐氏综合征样本中发现;②36个线粒体DNA突变主要发生于D-Loop区和线粒体复合物Ⅰ中;③ 线粒体基因组13个编码基因中,有11个基因检测到线粒体DNA的突变;④ 焦磷酸测序对线粒体基因组杂合突变频率的检测结果和高通量测序结果吻合.结论 DS患儿中广泛存在线粒体DNA的突变,这些突变可能与唐氏综合征的线粒体功能异常相关.

青岛及周边地区A3、B3亚型的分子机制研究

目的 分析2014年1月～2016年4月青岛及周边地区血型血清学疑似A3或B3亚型样本的分子机制.方法 采用聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）直接测序的方法分析ABO基因增强子（-3 988 bp～-3 645 bp）、启动子（-149 bp～-2 bp）、外显子1～7及侧翼序列、以及第一内含子中转录因子GATA结合位点（～＋5.8 kb）序列,对于有突变的样本再进行单倍型测序确认.结果 2014年1月～2016年4月青岛及周边地区共发现28例血清学疑似A3、B3亚型样本,占同期亚型样本的10.9 %.通过基因序列分析共发现了4例A307、2例B301、1例B310和1例B311.未发现台湾人多见的B303和日本常见的启动子和调控区域突变亚型.结论 青岛及周边地区A3亚型分子机制变化小,B3变化较大,与台湾、日本差别明显,与上海、浙江等国内省市较接近.

实时荧光定量PCR检测腮腺沃辛瘤中Gadd45β表达

目的：从分子学水平检测腮腺沃辛瘤相对于瘤旁腮腺组织中生长抑制和DNA损伤修复基因45β（ Gadd45β） mRNA表达情况并探讨其在沃辛瘤的形成及发展中的意义。方法搜集30例腮腺沃辛瘤组织及瘤旁正常腮腺组织。提取总RNA，然后进行逆转录得到cDNA，再进行实时荧光定量PCR检测，测出CT值，通过2－△△CT的相对定量的方法对荧光定量PCR检测的CT值进行标准化，从而比较肿瘤组织及瘤旁正常腮腺组织中Gadd45βmRNA表达情况。结果 Gadd45β在正常腮腺组织及肿瘤组织中均有表达，分别为1．516±0．104和1．177±0．089， Gadd45β在沃辛瘤中表达明显下调（P＜0．05）。结论 Gadd45β表达下调可作为沃辛瘤发病机理一部分。

干扰和过表达自分泌运动因子受体对A172细胞侵袭力的影响

目的：在人胶质瘤A172细胞系中干扰和过表达自分泌运动因子受体（ autocrine motility factor re-ceptor， AMFR）后，研究AMFR对其侵袭力的影响。方法应用体外连接法将外源AMFR的DNA连接到带GFP的外源干扰（ shRNA）和过表达（ cDNA）腺病毒基因组HK293中，运用荧光定量PCR （ QPCR）法得出其扩增曲线检验二种病毒的滴度，然后运用RT-PCR和Western印迹法来检测二种病毒是否成功干扰和过表达，和只带GFP标签正常的A172（ con A172）相比较，用MTT的方法来检测A172细胞增殖能力，应用伤口愈合实验（ wound healing assay）检测A172的细胞迁移能力， Transwell实验来检测细胞侵袭能力，从而研究AMFR与胶质瘤细胞的迁移能力的相关性。结果成功干扰A172细胞系（ shRNAA172）和过表达细胞系（ cDNAA172）中的AMFR，和正常的A172细胞系比较， AMFR干扰的细胞增殖能力、迁移和侵袭能力降低，过表达的AMFR A172细胞增殖能力、迁移和侵袭能力增强。结论 AMFR的表达量与胶质瘤细胞迁移和侵袭能力呈正相关。

乙醇刺激HepG2细胞分泌VASN蛋白的生物学功能研究

目的：探究乙醇对HepG2细胞VASN蛋白表达与分泌水平的影响，及其对HUVEC细胞迁移的影响。方法乙醇刺激HepG2细胞，定量PCR （ qPCR）检测HepG2细胞VASN mRNA水平的变化， Western印迹检测HepG2细胞与细胞上清中VASN蛋白水平的变化。划痕愈合实验检测细胞共培养条件下，乙醇刺激的HepG2细胞培养上清对HUVEC细胞迁移的影响。结果 qPCR结果显示，乙醇可上调HepG2细胞VASN mRNA水平。 Western印迹结果显示，细胞VASN蛋白表达与分泌水平升高。划痕愈合实验结果表明乙醇刺激HepG2细胞VASN蛋白的分泌增加，可以促进HUVEC细胞的迁移。结论乙醇刺激导致HepG2细胞VASN蛋白表达水平和分泌水平升高，并可促进与其共培养的HUVEC细胞迁移。

神经酰胺对肿瘤细胞死亡和药物抗性的调控

神经酰胺是生物膜结构组分鞘磷脂的代谢前体，内源产生的神经酰胺受复杂的代谢途径调节。6种神经酰胺合成酶（ceramide synthasel-6，CerSl—6）分别优先合成不同脂肪酸链长度的二羟神经酰胺。研究发现，神经酰胺可通过调控肿瘤生长的直接靶位点而抑制肿瘤生长，并且上调从头合成神经酰胺途径的酶可逆转癌细胞的抗药性。因此，对神经酰胺等鞘脂类更深远的研究。有助于发现对抗各种癌症的新的治疗方法和预防策略。

c体外循环术后并发血管麻痹综合征的相关危险因素

目的分析体外循环术（cardiopulmonarybypass，CPB）后并发血管麻痹综合征（vasoplegicsyn-drome-VS）的相关危险因素。方法连续纳入CPB下行心脏手术后发生VS患者和未发生VS患者各32例和64例，分别记为VS组和非VS组。收集所有患者相关资料，通过组间单因素比较及多因素Logistic回归分析等方法获得CPB后并发VS的危险因素，采用受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve-ROC）检验危险因素对CPB后并发VS的预测价值。结果两组组间基线资料比较发现左室射血分数（left ventricular ejection fraction，LVEF）、术前ACEI类药物使用人数、心功能分级、术前利尿剂使用人数、CPB后2h血浆血管加压素水平、心脏直视手术人数及手术持续时间差异有统计学意义，此7项指标经多因素Logistic回归分析结果显示LVEF（OR=0．82，95％CI：0．77—0．89，P〈0．01）、CPB后2h血浆血管加压素水平（OR=0．84，95％CI：0．77-0．91，P〈0．01）、心功能分级（OR=1．21，95％CI：1．07-1．38，P〈0．01）以及术前使用ACEI类药物（OR=1．18，95％CI：1．12—1．25，P〈0．01）等4个因素与CPB后并发VS有显著相关性。通过ROC曲线检验上述4个危险因素联合预测CPB后并发VS的预测效能．计算ROC曲线下面积为0．778（P〈0．01，95％CI：0．725～0．821）。结论LVEF减少、CPB后2h血浆血管加压素水平降低、心功能分级较高及术前使用ACEI类药物是CPB后并发VS的独立危险因素，联合这4个危险因素可对CPB后并发VS进行预测。