美国眼科学会干眼临床实践指南解读(2023)

2024年2月美国眼科学会发布了2023版的干眼临床实践指南,与2018版相比,该指南主要新增了三种获得美国食品药品监督管理局批准的干眼治疗药物(全氟己基辛烷、伐尼克兰和血制品)的使用推荐以及其他药物使用间期的临床证据,详细阐述了干眼与角膜屈光手术和白内障手术的相互影响,干眼的定义、诊断和检测方法、分类分级以及治疗等。本文将对该指南进行全面解读。

不同光谱组成的人工照明对视网膜色素上皮细胞的影响

目的探讨不同光谱组成的人工照明对视网膜色素上皮(RPE)细胞的影响。方法将体外培养的ARPE⁃19细胞随机分组:无光照对照组、非全光谱照明组(细分为300 lx、600 lx两个亚组)、全光谱照明组(细分为100 lx、300 lx、600 lx、900 lx四个亚组),无光照对照组细胞避光培养,其他组细胞采用相应光谱和光照强度干预。将分组光照24 h、48 h、72 h后的ARPE⁃19细胞置于倒置荧光显微镜下观察细胞形态变化;CCK⁃8法检测细胞活力;线粒体膜电位法检测线粒体功能。结果光学显微镜下可见,光照72 h后,各组细胞密度明显增大,细胞大小不一,细胞多边形不典型;全光谱照明组细胞较非全光谱照明组细胞形态规整,异形细胞数少。光照24 h后,与无光照对照组相比,非全光谱照明300 lx组,全光谱照明300 lx、600 lx、900 lx组细胞活力均降低(均为P<0.05)。全光谱照明900 lx组细胞活力高于非全光谱照明300 lx组(P<0.05)。光照48 h后,各组细胞活力较光照24 h时提高;全光谱照明100 lx、300 lx组细胞活力低于非全光谱照明600 lx组(均为P<0.05)。光照72 h后,非全光谱照明300 lx、600 lx组,全光谱照明100 lx、300 lx组细胞活力低于无光照对照组(均为P<0.05);全光谱照明300 lx、600 lx、900 lx组细胞活力高于非全光谱照明300 lx、600 lx组(均为P<0.05)。光照24 h后,非全光谱照明600 lx组ARPE⁃19细胞线粒体膜电位相对荧光强度低于无光照对照组(P<0.05);全光谱照明100 lx、600 lx、900 lx组ARPE⁃19细胞线粒体膜电位相对荧光强度高于非全光谱照明600 lx组(均为P<0.05)。光照48 h后,除全光谱照明100 lx组外,其余各光照组ARPE⁃19细胞线粒体膜电位相对荧光强度均低于对照组(均为P<0.05);全光谱照明100 lx、600 lx、900 lx组ARPE⁃19细胞线粒体膜电位相对荧光强度高于非全光谱照明300 lx组(均为P<0.05)。光照72 h后,非全光谱照明300 lx、600 lx组,全光谱照明300 lx组ARPE⁃19细胞线粒体膜电位相对荧光强度均低于对照组(均为P<0.05);全光谱照明600 lx组ARPE⁃19细胞线粒体膜电位相对荧光强度高于非全光谱照明300 lx组(P<0.05);全光谱照明100 lx、600 lx、900 lx组ARPE⁃19细胞线粒体膜电位相对荧光强度高于非全光谱照明600 lx组(均为P<0.05)。结论全光谱照明相对于非全光谱照明对ARPE⁃19细胞损伤更小。

姜黄素在抑制紫外线B诱导的人视网膜色素上皮细胞DNA氧化损伤和凋亡中的作用

目的 探讨姜黄素在紫外线B(UVB)诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞DNA氧化损伤和凋亡中的作用机制。方法 将人视网膜色素上皮细胞株(ARPE-19)随机分为空白对照组、二甲基亚砜(DMSO)组、姜黄素组、UVB照射组、UVB+DMSO组和UVB+姜黄素组。CCK-8实验检测姜黄素对UVB照射前后ARPE-19细胞活力的影响;免疫荧光检测DNA氧化损伤标志蛋白磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)的定位;Western blot检测γH2AX、凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2基因(BCL-2)和BCL-2相关X蛋白(BAX)]的表达变化;使用X-rosamine衍生物(Mito-Tracker Red CMXRos)和异硫氰酸荧光素(FITC)标记的钙离子依赖的磷脂结核蛋白Annexin V(Annexin V-FITC)来检测UVB诱导的ARPE-19细胞线粒体膜电位变化和细胞凋亡情况。结果 与空白对照组相比,DMSO组DMSO处理24 h后的ARPE-19细胞活力无明显改变(P>0.05)。与DMSO组相比,姜黄素组采用15μmol·L^(-1)姜黄素处理24 h后ARPE-19细胞活力轻度升高(P<0.05),表明15μmol·L^(-1)姜黄素对ARPE-19细胞无毒性作用,后续实验采用该浓度处理细胞。与空白对照组相比,UVB照射组ARPE-19细胞活力降低,γH2AX和BAX蛋白表达水平升高,BCL-2蛋白表达水平降低,线粒体膜电位降低,细胞凋亡增加(均为P<0.05)。与UVB照射组相比,UVB+DMSO组ARPE-19细胞活力,γH2AX、BAX以及BCL-2蛋白表达水平均无明显变化(均为P>0.05),线粒体膜电位和细胞凋亡均无明显改变(均为P>0.05)。与UVB+DMSO组相比,UVB+姜黄素组ARPE-19细胞活力升高,γH2AX和BAX蛋白表达水平降低,BCL-2蛋白表达水平升高,线粒体膜电位升高,细胞凋亡减少(均为P<0.05)。结论 姜黄素能减轻UVB诱导的RPE细胞DNA氧化损伤和凋亡,有望为姜黄素在年龄相关性黄斑变性中的作用机制研究提供新的思路。

聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)负载汉防己甲素纳米微球治疗干眼的效果评价

目的探索一种旨在阻断干眼形成通路且具有抗炎、缓释和良好生物相容性等特性的纳米药物。方法采用薄膜分散-水化超声法制备汉防己甲素(Tet)和聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)的纳米微球(Tet-ATS@PLGA)并检测其室温(25℃)下稳定性、包封率、载药量等性质。分组实验:正常组(未行干预的正常兔眼);制备成功的干眼模型兔随机分为控制组(未行任何干预)、ATS组(人工泪液干预)、Tet-ATS组(人工泪液及Tet干预)、Tet-ATS@PLGA组(Tet-ATS@PLGA干预)。流式细胞术检测各组干预24 h后炎症化兔角膜上皮细胞凋亡率;干预14 d后,观察并记录兔角膜上皮细胞着染情况、泪膜破裂时间(BUT)、眼表泪液分泌(Schirmer试纸检测)情况;HE染色观察兔角膜上皮细胞厚度、球结膜杯状细胞形态和数量;提取兔角膜蛋白行ELISA实验检测血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素(IL)-1β、前列腺素E2(PGE2)和肿瘤坏死因子(TNF)-α等炎症因子表达情况。采用独立样本t检验进行组间比较。结果Tet-ATS@PLGA纳米药物的包封率和载药量分别为77.43%和30.26%,室温下性质稳定,在眼表温度(33℃)下易释放。与其他组比较,Tet-ATS@PLGA组BUT最大,泪液分泌量最大,角膜上皮厚度恢复接近正常,球结膜杯状细胞数量恢复最多,24 h后炎症化兔角膜上皮细胞细胞凋亡率最高,VEGF、IL-1β、TNF-α和PGE2表达水平最低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论Tet-ATS@PLGA纳米药物可有效作用于炎症化兔角膜上皮细胞,促进炎症细胞凋亡,并进一步通过抑制VEGF、IL-1β、TNF-α和PGE2等炎症因子的表达,阻断干眼的炎症反应,改善眼表泪液分泌情况。

玻璃体切割联合晶状体囊膜移植治疗难治性黄斑裂孔的效果和安全性

目的回顾性分析玻璃体切割联合晶状体囊膜移植治疗难治性黄斑裂孔的效果和安全性。方法收集2017年10月至2020年10月于武汉大学人民医院东院眼科行玻璃体切割联合晶状体囊膜移植治疗的难治性黄斑裂孔患者共15例(15眼)。使用OCT评估患者黄斑裂孔闭合情况,比较手术前后患者最佳矫正视力(BCVA),并记录术中、术后并发症情况。患者术后随访至少3个月。结果15例患者中有13例患者黄斑裂孔完全愈合,2例患者黄斑裂孔未愈合。未愈合者均为高度近视黄斑裂孔伴视网膜脱离的患者。黄斑裂孔愈合的患者未见裂孔再开放,解剖愈合率为86.7%。晶状体囊膜移植术前患者BCVA(logMAR)为1.49±0.33,术后为1.27±0.39,差异有统计学意义(t=2.913,P=0.011),术后BCVA较术前提高。所有患者术中均未发生晶状体囊膜移植片移位,术后随访期间均未出现眼内炎、晶状体上皮细胞或Müller细胞过度增殖等并发症。结论玻璃体切割联合晶状体囊膜移植能有效治疗难治性黄斑裂孔,提高黄斑裂孔愈合率,并能改善患者视力。

线粒体功能紊乱在糖尿病视网膜病变中作用的研究进展

糖尿病视网膜病变(DR)作为最常见的视网膜血管病变,是40岁以上人群主要致盲性眼病之一。抗血管内皮生长因子(VEGF)疗法在DR患者中有显著的临床效果,但需要长期不间断治疗,且大多数患者未能实现具有临床意义的视力改善。因此,寻找新的治疗靶点和方法迫在眉睫。线粒体是真核细胞中负责产生化学能量并协调细胞信号的细胞器,对维持细胞结构和功能起着关键作用。越来越多的研究表明,线粒体参与了DR病理生理过程。本文就线粒体功能紊乱在DR发病过程中的作用展开综述,为DR的发病机制和治疗方案提供新的思路。

非动脉炎性前部缺血性视神经病变患者急性期视盘周围脉络膜血流信号分析

目的利用光学相干断层扫描血管成像(OCTA)观察非动脉炎性前部缺血性视神经病变(NAION)患者急性期的视盘周围脉络膜血流信号特征。方法对2017年1月至2019年9月首次确诊为NAION且接受OCTA检查的13例(13眼)患者进行回顾性横断面研究。由两位医师分别定性分析OCTA中脉络膜毛细血管层的血流信号中的低信号区,并分区。将分区的结果与en face OCT、视野检查结果进行对比。患者均至少随访1个月。结果急性期NAION患眼的视盘OCTA在脉络膜毛细血管层水平的低信号区可分为视盘本身部位、视盘水肿部位和沿神经纤维方向延伸部位3个区域。13眼中,10眼首次就诊时出现3个低信号区,2眼在第2次就诊时出现3个低信号区,1眼仅出现视盘本身部位和视盘水肿部位的低信号区。其中,沿神经纤维方向延伸部位的低信号区与视野缺损关系密切,对应比例达91.6%,该低信号区平均出现时间为发病后19.9 d。随访期内,9眼沿神经纤维方向延伸部位的低信号区出现神经纤维层萎缩。结论NAION患者急性期的视盘周围脉络膜层面的血流信号可以通过OCTA提示神经纤维层水肿、消退以及萎缩的变化过程。

白藜芦醇对碱烧伤小鼠角膜纤维化反应的抑制作用

目的探索白藜芦醇(RSV)对碱烧伤小鼠角膜纤维化反应的抑制作用。方法选取SPF级、健康6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠48只,按照随机数字表法分为正常对照组、模型组和RSV组,每组16只。模型组和RSV组小鼠右眼建立角膜碱烧伤模型,左眼不做任何处理。RSV组小鼠用2 g·L^(-1)RSV溶液滴眼,模型组小鼠用相同剂量的羟丙基-β-环糊精溶液滴眼,连续滴眼21 d。正常对照组小鼠不做碱烧伤和滴眼干预。碱烧伤后21 d,裂隙灯显微镜观察各组小鼠角膜混浊情况,对角膜混浊程度进行评分;通过HE染色观察各组小鼠角膜组织结构变化;采用免疫荧光染色观察各组小鼠角膜组织中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅲ型胶原纤维蛋白α1链(COL3A1)的表达;利用Western blot检测各组小鼠角膜组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-SMA、COL3A1蛋白相对表达水平。结果碱烧伤后21 d,RSV组小鼠角膜混浊评分为(2.25±0.89)分,明显低于模型组(3.25±0.71)分,差异有统计学意义(P=0.026)。HE染色结果显示,模型组小鼠角膜基质中细胞增多,给予RSV干预后细胞相对减少。免疫荧光染色结果显示,RSV组小鼠角膜组织中α-SMA和COL3A1的表达均弱于模型组。Western blot检测结果显示,RSV组小鼠角膜组织中TGF-β1(0.60±0.17)、α-SMA(0.27±0.05)、COL3A1(0.49±0.21)蛋白相对表达水平均显著低于模型组TGF-β1(1.48±0.50)、α-SMA(0.55±0.18)、COL3A1(1.32±0.87),差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论在小鼠角膜碱烧伤中,RSV可以有效抑制角膜组织中TGF-β1的表达及肌成纤维细胞的活化,减少COL3A1沉积,从而抑制角膜的纤维化反应,进而减轻角膜混浊程度。

超广角荧光血管造影在视网膜疾病中的应用研究现状

超广角荧光血管造影(UWFA)是近些年眼底成像领域的一项新技术,该技术同时结合了超广角眼底成像技术和荧光造影的血管显影特点,为临床观察周边视网膜血管结构和功能提供了新途径。目前关于UWFA的研究涉及各类眼底疾病。不仅帮助人们更完整地认识了眼底病变的特征,同时还对疾病的治疗规范、监测及预后评估产生了影响,具有很大的临床及科研价值。本文对近年UWFA技术的更新和新的研究成果作一综述。

无视网膜病变的糖尿病患者视网膜血管和神经变化分析:基于OCTA的研究

目的应用光学相干断层扫描血管成像(OCTA)观察无糖尿病视网膜病变(NDR)的2型糖尿病患者视网膜血管和神经的改变。方法采取横断面对照研究,选取NDR的2型糖尿病患者63例63眼为NDR组,选取同期健康体检者30人30眼为对照组。应用OCTA测量NDR组和对照组入选眼的浅层毛细血管丛(SCP)和深层毛细血管丛(DCP)的血流密度,黄斑区中央凹无血管区面积、中央凹无血管区旁300μm的血流密度、神经节细胞复合体(GCC)厚度、黄斑区整体丢失体积(GLV)、黄斑区局部丢失体积(FLV)以及视盘周围视网膜神经纤维层(RNFL)厚度。比较两组入选眼间各指标的差异,并分析相关性。结果NDR组入选眼SCP的旁中心凹区的血管密度为(48.06±4.02)%,较对照组(49.80±3.75)%降低(P=0.049)。NDR组入选眼GCC厚度为(96.95±5.78)μm,较对照组(100.47±5.16)μm明显变薄(P=0.006),NDR组入选眼的GLV为1.80%(0.86%~3.48%),较对照组0.88%(0.49%~2.17%)明显增高(P=0.006),NDR组入选眼视盘周围下方鼻侧区域的RNFL厚度(135.56±29.12)μm较对照组(149.20±19.57)μm降低(P=0.022)。NDR组入选眼GCC厚度与SCP的整体、旁中心凹区的血流密度均呈正相关(r=0.316,P=0.002;r=0.270,P=0.009),FLV与SCP的整体、旁中心凹区的血流密度均呈负相关(r=-0.282,P=0.006;r=-0.291,P=0.005),FLV与DCP的中心凹区的血流密度呈负相关(r=-0.216,P=0.038),GLV与SCP的整体、旁中心凹区的血流密度均呈负相关(r=-0.405,P<0.001;r=-0.346,P=0.001)。结论NDR患者视网膜已经出现血管和神经的损害。SCP血流密度、GCC厚度、GLV可能是视网膜血管、神经损害的敏感指标,视盘周围下方鼻侧区域的视网膜可能是糖尿病视网膜神经病变的起始区域。

紫外线照射对人视网膜色素上皮细胞活性和沉默信息调节因子6(SIRT6)表达的影响

目的探讨紫外线照射对人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19细胞)活性和沉默信息调节因子6(SIRT6)表达的影响。方法将对数生长期的ARPE-19细胞按照照射剂量随机分为对照组(0 mJ·cm^(-2))及7.5 mJ·cm^(-2)、15.0 mJ·cm^(-2)、30.0 mJ·cm^(-2)、60.0 mJ·cm^(-2)、120.0 mJ·cm^(-2)、240.0 mJ·cm^(-2)照射剂量组进行干预培养。照射后继续常规培养24 h,采用倒置荧光显微镜观察细胞形态并拍照,CCK-8法检测细胞存活率,Western blot检测各组细胞中SIRT6的表达情况,采用免疫荧光染色对对照组、30.0 mJ·cm^(-2)照射剂量组和240.0 mJ·cm^(-2)照射剂量组ARPE-19细胞中SIRT6进行定位检测。结果对照组ARPE-19细胞呈梭形贴壁生长,边界清楚,连接紧密,细胞状态良好;30.0 mJ·cm^(-2)照射剂量组ARPE-19细胞形态不规整,细胞数量略有减少,细胞间连接疏松。CCK-8法检测结果显示与对照组相比,ARPE-19细胞在不同剂量紫外线照射后,细胞存活率显著降低且呈剂量依赖性(均为P<0.05)。与对照组相比,除较低照射剂量组(7.5 mJ·cm^(-2)、15.0 mJ·cm^(-2))外,其余各组SIRT6蛋白相对表达量均降低,且随着照射剂量的增加呈剂量依赖性逐渐降低(均为P<0.05)。经过30.0 mJ·cm^(-2)紫外线照射后,ARPE-19细胞随着再培养时间的延长,细胞中SIRT6蛋白的相对表达量逐渐下降(均为P<0.05)。对照组、30.0 mJ·cm^(-2)照射剂量组和240.0 mJ·cm^(-2)照射剂量组SIRT6主要表达于ARPE-19细胞核内;与对照组相比,30.0 mJ·cm^(-2)照射剂量组和240.0 mJ·cm^(-2)照射剂量组ARPE-19细胞中SIRT6的荧光强度显著降低,且240.0 mJ·cm^(-2)照射剂量组降低更明显。结论紫外线照射能够降低ARPE-19细胞的增殖活性,同时也能下调细胞中SIRT6的表达。

康柏西普玻璃体内注射治疗特发性脉络膜新生血管

目的探究康柏西普玻璃体内注射治疗特发性脉络膜新生血管(idiopathic choroidal neovascularization,ICNV)的疗效。方法选择2016年1月至2018年1月我院眼科收治的ICNV患者146例(146眼)纳入研究,所有患者均行玻璃体内注射康柏西普治疗,测量治疗前后最佳矫正视力(BCVA)、眼压、黄斑中心凹脉络膜厚度(subfoveal choroidal thickness,SFCT)及上侧脉络膜厚度(superior choroidal thickness,SCT)、下侧脉络膜厚度(inferior choroidal thickness,ICT)、鼻侧脉络膜厚度(nasal choroidal thickness,NCT)、颞侧脉络膜厚度(temporal choroidal thickness,TCT),观察并评价脉络膜新生血管(CNV)渗漏情况,比较患眼治疗前后BCVA、眼压及各区域脉络膜厚度,以及患眼及对侧眼脉络膜厚度差异。结果与治疗前比较,患眼治疗后1 d、1个月时BCVA均显著提高(均为P<0.05)。患眼治疗前后眼压比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。随访12个月时患眼渗漏区面积较治疗前均有下降,CNV渗漏治疗有效率为80.82%。治疗前患眼SFCT、NCT 2.2 mm、TCT 2.2 mm、TCT 3.45 mm均显著高于对侧眼(均为P<0.05);治疗后12个月患眼各部位脉络膜厚度均较治疗前显著降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。治疗过程中及治疗后均未见严重不良反应发生。结论玻璃体内注射康柏西普可改善ICNV患者视力,减少视网膜渗漏症状,降低SFCT,效果较好。

葡萄膜炎并发白内障患者晶状体前囊膜中NLRP3炎症小体相关蛋白的表达和前囊膜超微结构改变

目的探究葡萄膜炎并发白内障患者晶状体前囊膜中NLRP3炎症小体相关蛋白的表达和前囊膜超微结构改变。方法随机选取2018年8月至2019年6月在我院诊治的葡萄膜炎并发白内障患者17例(22眼)作为试验组;老年性白内障患者10例(18眼)作为对照组。均于白内障超声乳化手术中环形撕囊获取前囊膜。采用免疫组织化学法检测两组患者晶状体前囊膜NLRP3炎症小体的三个组成结构NLRP3、Caspase-1和接头蛋白ASC的蛋白表达,并对前囊膜进行电镜观察。结果两组患者晶状体前囊膜中均有NLRP3炎症小体相关蛋白的表达;试验组晶状体前囊膜中NLRP3、Caspase-1及接头蛋白ASC(光密度值分别为0.383±0.067、0.313±0.058、0.335±0.035)表达水平均明显高于对照组(光密度值分别为0.330±0.085、0.271±0.039、0.268±0.036)(均为P<0.05)。试验组患者前囊膜的晶状体上皮细胞可见明显的细胞核固缩,染色质浓缩边集,细胞核膜皱褶、轻度增宽,线粒体形态基本正常、部分线粒体嵴突消失,细胞质中可见典型的凋亡小体。对照组有轻度凋亡改变。结论NLRP3炎症小体可能参与了葡萄膜炎并发白内障的发病过程,细胞凋亡是葡萄膜炎并发白内障的重要病理改变。

关于我刊文后参考文献引用和著录标准的说明

为了正确执行国家标准GB/T 7714-2015《信息与文献参考文献著录规则》,自2016年1月起,我刊文后参考文献的引用和著录执行以下标准。1不同文献类型的引用和著录格式1.1阅读型参考文献(reading reference)著者为撰写或编辑论著而阅读过的信息资源,或供读者进一步阅读的信息资源。著录时需要标注文章的起始页。著录格式示例如下:[1]邵毅,余静,余瑶,高桂平,杨继玲,裴重刚,等.无缝线骨髓间充质干细胞羊膜移植预防角膜缘干细胞缺乏的实验研究[J].眼科新进展,2013,33(11):1011-1015.SHAO Y,YU J,YU Y,GAO G P,YANG J L,PEI Z G,et al.Novel sutureless bone marrow mesenchymal stem cells with amniotic membrane transplantation for corneal limbus stem cells defect in rabbit model[J].Rec Adv Ophthalmol,2013,33(11):1011-1015.

miRNA-let-7c在逆转大鼠糖尿病视网膜病变中的作用

目的探讨MicroRNA-let-7c(miRNA-let-7c)在逆转糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)中的作用。方法制作DR大鼠模型48只,分为6组空白模型组、miRNA-let-7c模拟物组、Anti-miRNA-let-7c组、阴性对照(NC)组、Anti-miRNA-let-7c+Anti-STAT3组、Anti-STAT3组;同时选择8只正常大鼠作为正常组。采用实时荧光定量PCR检测各组大鼠视网膜和转染后的293T细胞中miRNA-let-7c和STAT3的mRNA表达水平,Western blot检测各组大鼠视网膜中STAT3、VEGFA、BAX及Bcl蛋白水平,通过HE染色计数大鼠视网膜血管内皮细胞的数目以及荧光素酶报告基因分析miRNA-let-7c与STAT3的直接作用。结果各组大鼠视网膜和转染后的293T细胞中miRNA let-7c与STAT3的mRNA表达呈负相关(r=-0.906,P<0.001)。与NC组的血管内皮细胞核(22±3)个相比,Anti-STAT3组的血管内皮细胞核(14±3)个明显减少(P<0.05);而Anti-miRNA-let-7c组血管内皮细胞核(58±6)个显著增加(P<0.05)。与NC组相比,miRNA-let-7c组和Anti-STAT3组大鼠视网膜中的STAT3、VEGFA和Bax蛋白表达显著降低(P<0.05);而Anti-miRNA-let-7c组大鼠视网膜中的STAT3、VEGFA和Bax蛋白表达显著升高(P<0.05)。此外,miRNA-let-7c组miRNA-let-7c mRNA表达为2.24±0.25,较NC组miRNA-let-7c mRNA表达(1.32±0.17)显著升高(P<0.05),而Anti-miRNA-let-7c组miRNA-let-7c mRNA表达(0.62±0.05)显著降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测结果显示,STAT33’UTR-WT的相对荧光素酶活性为0.55±0.03,低于WT+NC组的1.04±0.18,差异有统计学意义(P<0.05),表明STAT3是miRNA-let-7c的靶基因。结论miRNA-let-7c的过表达可能下调STAT3的表达,从而阻止大鼠DR模型的发展。

双醋瑞因减轻小鼠角膜碱烧伤炎症反应的实验研究

目的探讨双醋瑞因减轻小鼠角膜碱烧伤炎症反应的作用。方法将174只小鼠角膜碱烧伤造模成功的小鼠随机分为三组:双醋瑞因组、地塞米松组和生理盐水组,分别给予双醋瑞因、地塞米松、生理盐水滴眼制剂滴眼,比较造模后2 d、3 d、4 d、5 d各组小鼠的角膜混浊度、病灶面积、上皮缺损面积及炎症细胞的浸润情况。结果双醋瑞因组造模后4 d、5 d角膜临床评分明显较生理盐水组低(均为P<0.01),地塞米松组造模后3 d、4 d、5 d角膜临床评分较生理盐水组低(均为P<0.05)。对于角膜上皮缺损而言,双醋瑞因组碱烧伤后各时间点角膜上皮缺损面积均小于生理盐水组(均为P<0.05),地塞米松组与生理盐水组角膜上皮缺损无明显差异。对角膜中性粒细胞进行统计发现,双醋瑞因组碱烧伤后各时间点中性粒细胞计量明显少于生理盐水组(均为P<0.01);地塞米松组造模后3 d、5 d中性粒细胞浸润少于生理盐水组(均为P<0.05)。对巨噬细胞进行统计发现,双醋瑞因组造模后3 d、5 d巨噬细胞均较生理盐水组浸润少(均为P<0.05);造模后5 d地塞米松组浸润少于生理盐水组(P<0.05)。通过MPO活性测定发现,双醋瑞因组和地塞米松组造模后2 d、3 d、5 d MPO活性均较生理盐水组明显降低(均为P<0.01)。结论双醋瑞因能够减轻小鼠角膜碱烧伤的炎症反应,改善角膜碱烧伤的预后。

视网膜色素变性患者血清脂肪代谢的异常变化

目的对比原发性视网膜色素变性(primary retinitis pigmentosa,PRP)、结晶样视网膜色素变性(bietti crystalline dystrophy,BCD)患者血清中游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)及心型脂肪酸结合蛋白(heart fatty acid binding proteins,HFABP)含量的变化,为探索其发病机理和防治提供参考。方法采用回顾性研究方法,纳入临床诊断标准的首都医科大学附属北京同仁医院眼科中心门诊PRP患者80例,BCD患者50例,与正常对照组60例进行比较,按盲法由专业技术人员完成血清中FFA及HFABP浓度检查。分析PRP、BCD患者体内FFA和HFABP含量与正常对照组的差别。结果 PRP患者血清FFA、HFABP浓度分别为(0. 547±0. 214) mmol·L^(-1)、(3. 594±0. 791) mmol·L^(-1); BCD患者血清FFA、HFABP浓度分别为(0. 529±0. 108) mmol·L^(-1)、(4. 237±1. 258) mmol·L^(-1);正常对照组的FFA、HFABP浓度分别为(0. 386±0. 251) mmol·L^(-1)、(5. 261±1. 471) mmol·L^(-1)。与正常对照组比较,两种退行性视网膜疾病的FFA浓度显著升高(均为P <0. 05),而HFABP浓度显著降低(均为P <0. 05)。结论 PRP及BCD患者血清FFA及HFABP浓度存在异常变化,提示了其可能与退行性视网膜疾病的发生发展有关,对疾病的治疗具有一定的指导意义。

葡萄膜黑色素瘤的治疗现状

葡萄膜黑色素瘤(uveal melanoma,UM)是起源于葡萄膜黑色素细胞的眼内恶性肿瘤。由于其生存率很大程度上取决于原发肿瘤的大小,因此早发现、早治疗非常重要。目前,UM尚无有效的辅助治疗方法。但分子生物学方面的新发现,如GNAQ和GNA11突变和涉及下游信号传导通路MAPK、PI3K/Akt和Hippo为代表的多种治疗,则有助于对UM发病机制的理解。还有研究开辟了新的生物标志物范围,以提高对UM转移的检测。此外,许多研究和临床试验也正在进行中。

miR-101-3p靶向TGFβR1/Smad抑制视网膜母细胞瘤细胞侵袭和迁移

目的探索miR-101-3p对视网膜母细胞瘤细胞侵袭和迁移的影响及作用机制。方法RT-PCR检测miR-101-3p及转化生长因子β受体1(transforming growth factor beta receptor 1,TGFβR1)表达水平;生物信息学预测miR-101-3p与TGFβR1的靶向关系并通过荧光素酶报告实验进行验证。将Y79细胞分为Control组、miR-101-3p mimic组(转染miR-101-3p mimic)、pcDNA-TGFβR1组(转染pc-TGFβR1)及miR-101-3p mimic+pc-TGFβR1组(共转染miR-101-3p mimic和pc-TGFβR1),MTT检测细胞增殖速率,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞侵袭,划痕实验检测细胞迁移,Western blot检测TGFβR1、Ki67、Bcl-2、Bax、cleaved Caspase-9、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、MMP-9、血管内皮生长因子、p-Smad2及p-Smad3的表达水平。结果在视网膜母细胞瘤组织中,miR-101-3p的表达为0.35±0.05,明显低于正常视网膜组织(P<0.01);视网膜母细胞瘤细胞株Y79中miR-101-3p的表达为0.24±0.04,明显低于视网膜上皮细胞株ARPE-19(P<0.01);与Control组相比,miR-101-3p mimic组miR-101-3p mRNA水平显著升高、TGFβR1 mRNA水平显著降低(均为P<0.01);miR-101-3p与TGFβR1之间存在连续结合片段。与Control组相比,miR-101-3p mimic组TGFβR1的表达水平显著降低,增殖速率及细胞中Ki67表达均显著降低,细胞凋亡率显著增加,Bax及cleaved Caspase-9表达显著升高、Bcl-2表达显著降低,侵袭细胞数目和划痕闭合率显著降低,MMP-2、MMP-9、血管内皮生长因子、TGFβR1、p-Smad2和p-Smad3的表达水平显著降低(均为P<0.01)。结论miR-101-3p通过靶向下调TGFβR1抑制视网膜母细胞瘤细胞的侵袭和迁移。

新型角膜内皮镜SP-1P检测中央角膜厚度的临床应用

目的研究角膜内皮镜SP-1P测量中央角膜厚度(central corneal thickness,CCT)的重复性,以及与A型超声角膜测厚仪(A超)和眼前节光学相干断层扫描仪(anterior segment optical coherence tomography,AS-OCT)检测CCT的一致性。方法前瞻性临床研究。收集2017年8月至10月在河南省眼科研究所准分子激光治疗中心矫正近视的患者114例(均纳入右眼),年龄为(22.14±4.83)岁,采用角膜内皮镜SP-1P连续测量3次CCT,同时通过AS-OCT和A超分别测量CCT,测量结果采用方差分析进行比较,进一步应用Bland-Altman法对一致性进行分析。结果角膜内皮镜SP-1P 3次测得的CCT值分别为(521.33±27.90)μm、(521.70±27.83)μm、(521.69±27.69)μm,差异无统计学意义(F=0.728,P=0.395);Bland-Altman分析结果显示,3次测量间的差值均至少95.6%的点在95%的一致性界限内。A超及AS-OCT测得的CCT值分别为(544.50±30.48)μm和(520.75±28.62)μm,其中角膜内皮镜SP-1P和AS-OCT测得的CCT值均较A超所测CCT值偏低,差异均具有统计学意义(均为P<0.001);而角膜内皮镜SP-1P和AS-OCT测量结果相比,差异无统计学意义(P=0.162)。结论角膜内皮镜SP-1P测量CCT具有良好的重复性和稳定性,角膜内皮镜SP-1P和AS-OCT具有同等的准确性及良好的一致性,可以相互替代;但二者测得的CCT值均较A超偏低。