靶向BRD4的ATTECs设计、合成与降解活性研究

目的基于自噬小体绑定化合物(ATTEC)策略,设计并合成靶向BRD4的自噬降解剂,验证其降解活性。方法以化合物伊斯平斯(ispinesib)为LC3配体,通过不同长度的linker与化合物JQ1相连,产物结构经1H NMR、13C NMR与ESI-MS确证,并使用蛋白印迹法(Western Blot)技术测试其在不同细胞系中诱导BRD4的降解活性。结果获得5个首次报道的BRD4-ATTEC分子,化合物4在不同细胞系中显示出一定的BRD4降解活性。结论本研究发现了新型BRD4自噬降解剂,拓展了靶向自噬降解的适用范围。

我院门诊中药房开展临床药学服务的效果研究

目的探讨临床药学服务在门诊中药房的作用。方法随机选取我院2021年7~10月非首次取药且已预约下次中医门诊的200名患者进行问卷调查,随之进行临床药学服务的干预后,再次进行问卷调查,对临床药学干预前后患者问卷调查的结果进行对比。结果中药临床药学干预后调查问卷的8项问题分值均有显著提高(除对正在服用药品的认知度一项P值外,其余7项P值均<0.05)。结论中药临床药学服务的开展,可以有效的提高患者的用药安全意识,且患者对中药的使用知悉度和用药依从性也明显提升,增强了药师在患者心中的辨识度,有效的提高了中药房门诊药学服务品质,对合理用药具有重要意义。

更名启事

经国家新闻出版署批准,《药学实践杂志》更名为《药学实践与服务》,国内统一连续出版物号由CN 31-1685/R变更为CN 31-2185/R,国际标准连续出版物号由ISSN 1006-0111变更为ISSN 2097-2024。期刊主管单位为海军军医大学,主办单位为海军军医大学药学系。更改刊名等信息后,《药学实践与服务》仍为中国科技核心期刊,国内外公开发行的综合性医药卫生类学术期刊。主要栏目设有论著、综述、药物与临床、药事管理、个案报道等。

核磁共振磷谱法测定磷酸氢钙咀嚼片中药物含量

目的建立一种高精密度和高专属性的核磁共振磷谱定量方法(31P-qNMR),用于检测磷酸氢钙咀嚼片中含磷药物的含量。方法使用六甲基磷酸酰胺作为内标,采集磷酸氢钙咀嚼片剂溶液的磷谱数据。研究磷酸氢钙在浓度范围1.0~9.0 mg/ml内的线性关系,并进行加样回收率和重复性实验。结果磷酸氢钙与内标的峰面积比在1.0~9.0 mg/ml范围内显示出良好的线性关系,回归方程为A=0.0043+0.1836C。低、中、高3种浓度的加样回收率分别为98.0%、98.1%、98.4%,相对标准偏差(RSD)分别为0.31%、0.68%、0.62%(n=9)。测定得到的磷酸氢钙咀嚼片中磷酸氢钙的平均含量为98.1%。结论成功建立了一种精密度高且专属性强的磷酸氢钙咀嚼片含量检测方法。该方法无需自身对照物,前处理过程简便,检测速度快,为含磷药品质量控制提供了新的技术支撑。

正极性驻极体联合5-氟尿嘧啶对瘢痕成纤维细胞生长抑制的协同作用

目的探讨驻极体及5-氟尿嘧啶(5-FU)对瘢痕成纤维细胞生长的影响及其可能的作用机制。方法利用全自动酶标仪检测+5000 V驻极体联合不同浓度5-FU对瘢痕成纤维细胞增殖的影响,利用荧光显微镜及RT-PCR技术研究在静电场作用下的瘢痕成纤维细胞的凋亡及p53等凋亡基因mRNA的表达变化。结果①正极性驻极体和不同浓度5-FU联用作用于细胞72 h后,细胞增殖率都有所降低,+5000 V驻极体+160μg/ml 5-FU组对瘢痕细胞的抑制率达到(0.15±0.051)%。②+5000 V驻极体组可促进瘢痕成纤维细胞凋亡;+5000 V驻极体与5-FU联用组细胞凋亡数高于5-FU单一使用组。③+5000 V驻极体作用组,4种凋亡基因mRNA的相对表达量都有所增加,+5000 V驻极体与5-FU联合作用组4种标志性基因表达量均较5-FU组增大。结论正极性驻极体与5-FU联合作用对抑制细胞生长有协同作用。正极性驻极体抑制瘢痕细胞生长的机制可能是通过促进细胞凋亡基因的表达,进而影响细胞的生长状态来抑制细胞生长。

水飞蓟素磷脂复合物微孔渗透泵控释片比格犬体内药动学及体内外相关性研究

目的 评价水飞蓟素磷脂复合物微孔渗透泵(SM-PC MPOP)控释片的体外释药特性、比格犬体内药动学及其体内外相关性。方法 释放介质为pH7.5的磷酸盐缓冲液(添加0.5%十二烷基硫酸钠),以高效液相色谱法(HPLC)检测SM-PC MPOP的体外释放特征。用6只比格犬进行双周期交叉对照实验,按照30 mg/kg的剂量给药。HPLC法测定比格犬血浆内水飞蓟素的主要成分水飞蓟宾的质量浓度,应用药动学软件进行数据分析。结果 SM-PC MPOP在12 h累积释放度超过85%。药动学研究情况表明,受试制剂(SM-PC MPOP)和参比制剂(市售水飞蓟素胶囊)在比格犬体内的主要药动学参数:T_(max)分别为(3.2±0.4)、(0.9±0.1)h,C_(max)分别为(0.298 6±0.068 9)、(0.629 9±0.076 5)μg/ml,AUC_(0→24)分别为(2.996 8±0.583 3)、(2.268 9±0.432 8) h·μg/ml,SM-PC-MPOP对市售水飞蓟素胶囊的相对生物利用度为(162.21±30.82)%。结论 自制的SM-PC MPOP实现了缓慢释药且增加生物利用度的目标,其体内吸收与体外释药具备相对较好的关联性(r=0.839 0)。

雪莲黄酮胶囊对高原缺氧诱导小鼠心肌损伤的保护作用研究

目的研究雪莲黄酮胶囊对模拟高原缺氧环境小鼠心肌组织的保护作用及其机制。方法将64只Balb/c小鼠随机分为正常对照组、缺氧模型组、阳性对照组和雪莲黄酮胶囊组,以500 mg/kg剂量进行单次灌胃给药后,在模拟海拔8000 m环境停留9 h,对心肌组织进行显微与超微结构观察,并检测缺氧相关指标的变化。通过RT-PCR法检测缺氧相关基因转录水平的变化,并通过蛋白质印迹法检测缺氧相关基因蛋白表达的变化,研究雪莲黄酮胶囊的作用机制。结果雪莲黄酮胶囊可明显缓解模拟高原缺氧环境对小鼠心肌的病理学损伤,提高心肌组织T-AOC活力,降低LD累积,还可以降低心肌组织HIF-1α、VEGF mRNA的表达水平,提高SOD、CAT mRNA及蛋白的表达水平。结论雪莲黄酮胶囊具有良好的抗高原缺氧作用,可保护心肌组织结构和功能,调节能量代谢和提高抗氧化能力。其机制可能与提高高原缺氧小鼠抗氧化能力、调节能量代谢以及影响HIF-1α、VEGF、SOD、CAT mRNA的蛋白表达有关。

肿瘤免疫检查点PD-1/PD-L1抑制剂的中药活性成分研究进展

肿瘤免疫治疗已成为新型的癌症治疗手段,有望彻底消除肿瘤。免疫检查点抑制剂,特别是程序性死亡受体-1(PD-1)和程序性死亡受体-配体1(PD-L1)抗体在多种实体瘤的治疗中取得很好的临床疗效,但是生物制剂存在免疫原性强、价格昂贵等缺点,因此,寻找免疫检查点小分子抑制剂成为未来肿瘤免疫疗法的新挑战。本文将综述近年发现的抑制PD-1/PD-L1表达的中药活性小分子及其对肿瘤免疫微环境的调控作用。

基于心血管芯片模型的4种深海毒素致伤评价与雷公藤甲素的保护作用研究

目的构建一种心血管芯片模型,评估四种海洋毒素即大田软海绵酸(OA)、芋螺毒素(CTX)、河豚毒素(TTX)和环亚胺毒素(GYM)对血管糖萼组织的损伤,初步探索雷公藤甲素对毒素致伤的保护作用。方法将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)接种于三通道结构的微流控芯片,并对所构建的心血管芯片模型进行表征。采用CCK-8法和免疫荧光染色法分析低、中、高三个浓度的海洋毒素对细胞活力和糖萼组织损伤情况,以及雷公藤甲素对毒素致伤的保护作用。结果所构建心血管器官芯片中的细胞生长状态良好,具有结构完整的糖萼组织,与对照组相比,OA中、高浓度以及GYM高浓度均对细胞活力具有一定抑制(P<0.05),CTX和TTX在所测浓度下对细胞没有明显活力抑制,但是四种毒素均引起细胞表面糖萼组织的严重损伤(P<0.01),且随着浓度增加,糖萼损伤率升高。经雷公藤甲素预保护后,四种毒素对HUVEC的毒性显著降低,糖萼组织损伤率下降。结论四种毒素对HUVEC细胞活力以及表面的糖萼组织具有损伤,且呈一定的剂量关系,而雷公藤甲素对毒素损伤后的HUVEC细胞具有保护作用。

门诊药房发药辅助系统的设计与应用

目的构建门诊发药辅助系统,减少差错,提升门诊药学服务质量。方法利用条码技术自主研发门诊药房发药辅助系统,从系统设计、系统功能等方面对其进行介绍,从对发药差错的影响、对发药效率的影响和药师评价等方面对系统的实际应用效果进行评价。结果该系统基于医院特殊的网络环境,整合了药品核对、处方权管理、效期管理和用药交待等功能。使用该系统后,年发药差错由84起减少至25起,患者取药等待时间缩短了151 s。接受调查的药师全部认可该辅助系统有助于药师工作。结论该系统提高了门诊药师的发药效率,并起到减少差错、提高效率的作用,进一步提升了药学服务质量。

肠道菌群调控骨代谢及中药应用研究进展

肠道菌群是定植在人体内复杂而庞大的微生物群落,肠道菌群及其代谢物短链脂肪酸在参与人体代谢、抵御外来致病菌以及调节免疫机制等方面发挥重要作用。近年来,不少研究发现肠道菌群与骨骼代谢密切相关。肠道菌群可通过营养吸收、短链脂肪酸生成、调节机体免疫、影响机体代谢等多种途径调控骨代谢,影响骨量变化。本文综述了肠道菌群影响骨代谢中骨量变化的潜在途径及作用机制,以及中药干预肠道菌群调控骨代谢的相关进展,以期为骨代谢相关疾病骨质疏松症的防治提供新思路。

111例马兜铃酸肾病调查分析

目的分析含有马兜铃酸成分的药物引起马兜铃酸肾病的临床特点和规律。方法回顾性研究111例服用含马兜铃酸成分的药物致肾损害患者的临床资料,分析马兜铃酸肾病的临床特点、服药及治疗方法等。结果111例患者中,女性多于男性(2.58∶1),大于50岁的101例(90.99%);年龄(63.70±11.67)岁;平均用药时间(8.08±6.94)年;涉及冠心苏合丸和龙胆泻肝丸共106例(95.50%);血肌酐升高108例,尿素氮升高106例,血红蛋白降低103例,多见低比重尿、轻中度蛋白尿和潜血;B超检查示肾脏均不同程度受损。肾脏病理活检为肾小管损害。多数患者起病隐匿,进展程度不一,与年龄、服药时间不成正比,临床上肾功能呈进行性损害,多数不可逆、预后较差。结论肾损害患者个体差异较大,肾损伤与服用马兜铃酸药物时间长短、剂量不平行;马兜铃酸肾病进展迅速,且停止服用含马兜铃酸药物后病情依然进展。加强药物警戒工作,实施早期的诊断和有效的干预,有助于减少马兜铃酸肾病的发生,延缓其发展。

细胞代谢组学及其在中枢神经系统疾病研究的应用进展

细胞代谢组学是代谢组学的重要分支,通过细胞代谢组学技术可以动态监测细胞反应及药物作用于细胞后的代谢变化,寻找具有潜在价值的生物标志物,阐明疾病的病理生理机制及药物治疗干预效果,近年来已被广泛应用于疾病机制、药效评价、新药研发等领域。综述细胞代谢组学的研究流程及其在中枢神经系统疾病中的应用,以期为深入研究中枢神经系统疾病的发病机制和药物防治提供理论依据。

核糖体蛋白及其在疾病中的作用

核糖体蛋白(RP)是核糖体的重要组成部分,在核糖体生物合成和蛋白质翻译中起关键作用。除此之外,核糖体蛋白还具有许多核糖体外功能,如调控基因表达、细胞增殖、分化、凋亡、DNA修复和其他多种细胞过程。RP的功能紊乱与包括血液、代谢、心血管疾病以及肿瘤在内的多种疾病的发生、发展密切相关,是多种疾病潜在的治疗靶点。本文将对RP的研究进展,包括RP的基本功能、核糖体外特性以及与人类疾病的联系进行综述,并探讨其作为生物标记物及在疾病治疗中的潜力。

基于网络药理学和分子对接技术探究青蒿素对多囊卵巢综合征的潜在治疗机制

目的应用网络药理学和分子对接技术探索青蒿素对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)的潜在作用机制。方法通过Pubchem、Swiss Target Prediction、PharmMapper数据库预测青蒿素作用靶点,利用GeneCard、DisGeNET数据库获取与PCOS有关靶点;应用韦恩图分析青蒿素与PCOS的交集靶点;利用String软件对交集靶点进行PPI蛋白网络互作分析,并利用Cytoscape软件进行核心靶点筛选;应用DAVID数据库进行基因本体(gene ontology,GO)功能、京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析,并借助在线软件对分析结果进行可视化;通过Chemdraw、PyMol、Auto Dock Tools软件及RCSB PDB数据库对青蒿素及核心靶蛋白进行分子对接。结果得到青蒿素靶点229个,PCOS靶点1292个,韦恩图分析交集靶点90个,潜在核心靶点5个,分别为丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine-protein kinase,AKT1)、雌激素受体(estrogen receptor 1,ESR1)、基质金属蛋白酶(matrix metalloprotein 9,MMP9)、过氧化物酶体增殖激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)、基质金属蛋白酶(matrix metalloprotein 2,MMP2),主要涉及磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)-蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)、Ras、内分泌抵抗等信号通路。分子对接结果显示青蒿素与对应核心靶蛋白之间存在分子结合位点。结论初步预测分析青蒿素可能通过多靶点、多机制对PCOS发挥治疗作用。

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中夏枯草消瘤合剂有效成分体内药动学研究

目的建立LC-MS/MS测定大鼠血浆样品中夏枯草消瘤合剂有效成分浓度的方法,并进行药动学研究。方法采用C18色谱柱正离子模式下流动相为甲醇-水(0.1%甲酸)体系,梯度洗脱,流速为0.3 ml/min。负离子模式下流动相为乙腈-水(0.1%甲酸)体系,梯度洗脱,流速为0.4 ml/min。分别对正离子模式下咖啡酸、迷迭香酸、丁香酸、芦丁及负离子模式下白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ进行测定。正常大鼠灌胃给予夏枯草消瘤合剂7.8 ml/kg,给药后在不同的时间点眼眶取血,采用经过验证的LC-MS/MS法测定血药浓度并采用DAS2.0软件的非房室模型计算大鼠给药后的药动学参数。结果夏枯草消瘤合剂药效成分咖啡酸等的药动学参数属于非房室模型,夏枯草消瘤合剂大鼠给药后体内咖啡酸、迷迭香酸、丁香酸及白术内酯Ⅲ等4种主要抗癌活性成分与文献报道单体给药后药动学特征相比,均存在明显差异。结论本研究建立的UPLC-MS/MS法快速、灵敏、准确,适用于测定大鼠血浆中夏枯草消瘤合剂主要活性成分,为其主要抗癌活性物质研究提供科学依据。

HPLC法同时测定盐酸阿霉素与氯尼达明的含量

目的建立同时测定盐酸阿霉素(DOX·HCl)与氯尼达明(LND)含量的测定方法。方法采用HPLC法,色谱柱为Agilent 5 HC-C_(18)(2)(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%TFA水溶液,梯度洗脱,甲醇比例随时间变化为:0~3 min,65%甲醇;3~7 min,65%→90%甲醇;7~13 min,90%甲醇;13~15 min,90%→65%甲醇;15~20 min、65%甲醇。采集时间20 min,平衡时间3 min,紫外检测波长205 nm及253 nm,流速1.0 ml/min,柱温35℃,进样量:10μl。结果该方法专属性好,盐酸阿霉素在1~40μg/ml的浓度范围内线性良好,氯尼达明在6~240μg/ml的浓度范围内线性良好。该方法之下,两种化合物的精密度、稳定性、回收率均符合要求。结论建立了同时检测盐酸阿霉素与氯尼达明含量的液相分析方法,该方法专属性强,准确可靠。